Aktinoninin MCF-7 kanser hücrelerinde mitofaji üzerine etkilerinin incelenmesi
Investigation of the effects of actinonin on mitophagy in MCF-7 cancer cells
- Tez No: 977513
- Danışmanlar: DOÇ. DR. OSMAN NURİ KELEŞ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Histoloji ve Embriyoloji, Histology and Embryology
- Anahtar Kelimeler: Aktinonin, gen ekspresyonu, immünoloji, makrofaj polarizasyonu, MFN2, mitofaji, onkoloji, Histopatoloji, İmmün sistem, Actinonin, gene expression, immunology, macrophage polarization, MFN2, mitophagy, oncology, Histopathology, Immune system
- Yıl: 2025
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Amaç: Mitokondriyal dinamiklerin, kanser hücrelerinde önemli roleri olduğu tanımlanmasına rağmen kanser patogenezinde rolleri büyük ölçüde belirsizliğini korumaktadır. Bu çalışmada, mitofusin-2'nin, meme kanserindeki rolünü gösteriyoruz. Ayrıca, mitofaji ajanı Aktinonin'in, MFN2 geninin siRNA ile susturulduğu MCF-7 meme kanseri hücrelerinde mitokondriyal dinamikler, pro ve anti-apoptotik gen ekspresyon profilleri etkilerini amaçlanmaktadır. Materyal ve Metot: MCF-7 hücre hattı monokültür modelinde siKontrol, siMFN2, Aktinonin, siMFN2 + Aktinonin grupları oluşturuldu. Mono kültürdeki her bir grup için MCF7 hücrelerinde MFN2, DRP1, CDK4, CDK6, Ki67, PCNA, BAX, BCL2, P53, AKT3, mTOR, MAPK1, STAT3, PTEN, ESR1, PGR, TLR4 gen ekspresyonları ve immünfloresan boyalarla hücre ölümü ve mitokondriyal dinamikler analiz edildi. Ko-kültür gruplarında M0 makrofajların M1 ve M2 makrofajlara polarizasyonu gösteren CD206 ve CD86 gen ekspresyon profilleri ve kültür medyumunda TNF-α ve IL-10 düzeyleri ölçüldü. Bulgular: siKONTROL grubuna siMFN2, Aktinonin ve siMFN2+Aktinonin gruplarında MFN2 ekspresyonu azalırken DRP1'in gen ekspresyonu artmıştır. Buna paralel olarak tedavi gruplarında mitokondriyal füzyondan fisyona kayış ve mitofaji artışı immünfloresan boyamalarda gözlemlendi. Bu tedavi gruplarında kontrole göre proliferasyon göstergeci olan CDK4, CDK6, Ki67 ve PCNA gen ekspresyonlarında azalış, pro-apoptotik BAX ve P53 gen ekspresyonlarında artış, anti-apoptotik BCL2gen ekspresyonunda azalış, ESR1 ve PGR hormon reseptör genlerinde azalış ve sinyal iletim yolakları olan AKT3, mTOR, MAPK1, STAT3 ve PTEN'deki anlamlı azalış gözlemlendi. Ayrıca tedavi gruplarında apoptotik hücre ölümü artışı immünfloresan boyamalarda görüldü. siMFN2+Aktinonin grubunda diğer tedavi gruplarına göre üstteki değişimler en yüksek düzeydedir. Ko-kültür sisteminde siKONTROL grubuna göre diğer tedavi gruplarında M1 makrofaj CD86 reseptöründe artış ve M2 makrofaj CD206 reseptöründe azalış gözlemlendi. siMFN2+Aktinonin grubunda diğer tedavi gruplarına göre M0 makrofajlarının M1 makrofajlara polarizasyonu en yüksek düzeydeydi Sonuç: MFN2 geninin susturulması, Aktinonin ve kombine tedavisi MCF7 kanser hücreleri üzerine mitokondriyal dinamikleri etkileyerek pro-apoptotik ve anti-proliferatif aktiviteye sahip olmakla beraber potansiyel antikanser bir tedavi stratejisi olabileceğini düşündürmektedir.
Özet (Çeviri)
Aim: Although mitochondrial dynamics are known to play critical roles in cancer cells, their precise contribution to cancer pathogenesis remains largely unclear. In this study, we demonstrate the role of Mitofusin-2 (MFN2) in breast cancer and investigate the effects of the mitophagy-inducing agent Actinonin on mitochondrial dynamics and the pro-/anti-apoptotic gene expression profile of MCF-7 breast cancer cells in which the MFN2 gene knockdown was used to siRNA. Material and method: In the MCF-7 monoculture model, four experimental groups were established: siControl, siMFN2, Actinonin, and siMFN2 + Actinonin. For each group, the expression levels of MFN2, DRP1, CDK4, CDK6, Ki67, PCNA, BAX, BCL2, P53, AKT3, mTOR, MAPK1, STAT3, PTEN, ESR1, PGR, and TLR4 were analyzed, and mitochondrial dynamics as well as cell death were assessed using immunofluorescence staining. In the co-culture model, the polarization of M0 macrophages into M1/M2 phenotypes was evaluated using CD86 and CD206 gene expression profiles. Additionally, TNF-α and IL-10 levels were measured in the culture medium. Results: Compared with the siControl group, MFN2 expression decreased while DRP1 expression increased in the siMFN2, Actinonin, and siMFN2 + Actinonin groups. Consistent with these findings, immunofluorescence analyses showed a shift from mitochondrial fusion toward fission and enhanced mitophagy. Treatment groups exhibited reduced expression of proliferation-associated markers (CDK4, CDK6, Ki67, PCNA), increased expression of pro-apoptotic genes (BAX, P53), and decreased expression of the anti-apoptotic BCL2 gene. Significant downregulation was also observed in ESR1 and PGR hormone receptor genes and in key signaling pathway genes, including AKT3, mTOR, MAPK1, STAT3, and PTEN. Additionally, increased apoptotic cell death was observed in the treatment groups using immunofluorescence staining. The above changes were highest in the siMFN2+Aktinonin group compared to the other treatment groups. In the co-culture system, treatment groups showed increased expression of the M1 macrophage marker CD86 and decreased expression of the M2 marker CD206 compared with the siControl group. The siMFN2 + Actinonin group exhibited the highest degree of polarization of M0 macrophages toward the M1 phenotype. Conclusion: MFN2 gene knockdown treatment, Actinonin treatment, and their combined application exert anti-proliferative and pro-apoptotic effects on MCF-7 breast cancer cells by modulating mitochondrial dynamics. These findings suggest that especially combined treatment may represent a promising potential anticancer therapeutic strategy.
Benzer Tezler
- Balb/c farelerde TNF-alfa/aktinomisin D ile oluşan ince bağırsak hasarında GLP-2'nin biyolojik rolü
Biological role of GLP-2 on TNF-alpha/actinomycin D-induced intestinal injury in balb/c mice
BAHRİYE PELİN ARDA PİRİNÇÇİ
- Katı kültür fermentasyonu ile Aktinomiset M135-3'den Aktinomisin D üretimi
Actinomycin D production with solid state fermentation from Actinomycetes M135 -3
CANBERK İŞLER
Yüksek Lisans
Türkçe
2012
BiyolojiEge ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. E. ESİN HAMEŞ KOCABAŞ
- All-trans retinoik asit, metotreksat ve aktinomisin D kemoterapilerinin farklı koryokarsinom hücre kültür modelleri üzerindeki etkilerinin karşılaştırılması
The comparison of the effect of all-trans retinoic acid, methotrexate, actinomycin D and combined chemotherapy on the different choriocarcinoma cell culture models
GÖRKER SEL
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2014
Kadın Hastalıkları ve DoğumBülent Ecevit ÜniversitesiKadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MÜGE HARMA
- Role of actinomycin d on the activity of RNA binding protein Hur
Aktı̇nomı̇sı̇n D'nı̇n RNA'ya bağlanan proteı̇n Hur'nı̇n aktı̇vı̇tesı̇ üzerı̇ndekı̇ rolü
AYDAN TORUN
Doktora
İngilizce
2025
BiyolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SREEPARNA BANERJEE
- Elongasyon faktörü 2 (EF-2) ve protein sentezi sonrası modifikasyonlar-otokatalitik biçimde gerçekleşen ADP-ribozillenme üzerine bir çalışma
Başlık çevirisi yok
A.NUR SAYHAN(BUYRU)