Geri Dön

İn vitro kültür ortamına leonurin ilavesi dondurulmuş sığır embriyolarının viyabilitesini etkiler mi?

Can supplementation of leonurine to in vitro culture medium affect the cryosurvival of bovine embryos?

PDF İndir

  1. Tez No: 977512
  2. Yazar: BERRAK IŞIK SOYTÜRK
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. KÜBRA KARAKAŞ ALKAN
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Veteriner Hekimliği, Veterinary Medicine
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2025
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Selçuk Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Veterinerlik Doğum ve Jinekolojisi Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Sunulan tez çalışması in vitro embriyo üretimi (IVEP) sırasında leonurin ilaveli kültür medyumunda gelişen blastosistlerin, vitrifiye edilerek 1 hafta, 1 ay ve 6 ay muhafaza edilmesinin ardından çözdürüldüğünde viyabilitelerini korumalarını amaçlanmıştır. Mezbahadan alınan 368 adet ovaryumdan aspirasyon yöntemi ile toplanan 1 717 adet A kalite oosit çalışmaya dahil edildi. İn vitro kültür aşamasında çalışma grupları; kontrol (herhangi bir ilave yok) ve leonurin (20 µM) olarak oluşturuldu. Kültür aşamasıda blastosistler açık uçlu modifiye payet (OPS) yöntemi ile donduruldu. Embriyolar 1 hafta, 1 ay ve 6 ay muhafaza edilmesinin ardından çözdürülerek re-ekspansiyon ve hatched olma oranları değerlendirildi. Re-ekspande olan embriyolar diferansiyel boyama yöntemi ile iç hücre kitlesi (ICM), trofektoderm (TE) ve toplam hücre sayılarının (THS) belirlenmesi, TUNEL boyama yöntemi ile apoptotik hücre (AHS) ve THS ile apoptotik indeksinin (API) tespit edilmesi, farklı boyanma yöntemleri ile reaktif oksijen türleri (ROS) ve glutatyon (GSH) seviyelerinin ölçülmesi amacıyla sınıflandırıldı. Veriler SPSS 25.0 ile analiz edildi; normallik değerlendirmesinde normal dağılan değişkenlerde t testi, embriyo viyabilitelerinin karşılaştırılmasında ise One-way ANOVA ve Tukey HSD testleri uyguladı. Blastosist oranı leonurin grubunda %35,85; kontrol grubunda %28,04 olarak belirlendi (p<0,001). Vitrifiye edilerek farklı saklama sürelerinde çözdürülen embriyolarda leonurin grubunun re-ekspansiyon oranı tüm sürelerin sonunda daha yüksek bulundu (p<0,001). Hatched olma oranında ise istatistiksel bir farklılık belirlenmedi (p>0,05). Vitrifiye edilerek 1 hafta, 1 ay ve 6 ay saklama süresinin ardından çözdürülen ve re-ekspande olan embriyoların TUNEL boyama yöntemi ile THS'leri leonurin grubunda sırasıyla 186,70±31,07; 146,50±13,5 ve 123,80±20,63; kontrol grubunda ise 146,30±24,81; 130,70±17,58 ve 115,20±26,56 olarak belirlendi (p<0,001). Aynı zamanda AHS leonurin grubunda sırasıyla 6,70±2,45; 7,30±3,02 ve 7,50±3,02; kontrol grubunda ise 9,80±2,25; 11,40±1,26 ve 17,60±5,35 olarak bulundu. Diferansiyel boyama sonucunda leonurin grubunun hücre sayıları daha yüksek belirlendi (p<0,001). Embriyoların ROS seviyesi belirlenen günlerde leonurin grubunda sırasıyla 22,02±5,3; 42,07±4,05 ve 79,46±9,80; kontrol grubunda ise 35,14±0,05; 63,45±7,01 ve 125,66±25,62 olarak bulundu (p<0,001). Aynı zamanda GSH seviyesinin leonurin grubunda yüksek olduğu (p<0,001) fakat her iki grupta da saklama süresinin uzamasına bağlı olarak değişmediği tespit edildi (p>0,05). Sonuç olarak sığırlarda IVEP aşamalarında leonurinin kullanılabileceği, böylece hem blastosist oranının artırılmasında hem de vitrifikasyon işleminin ardından farklı saklama sürelerinde muhafaza edilen embriyoların viyabilitelerinin korumasında etkili olabileceği belirlendi.

Özet (Çeviri)

The aim of this thesis study was to determine whether blastocysts developed in a culture medium supplemented with leonurin during in vitro embryo production (IVEP) would remain viable after being thawed following vitrification and stored for different periods. A total of 1,717 Grade-A oocytes were collected by aspiration from 368 abattoir-derived ovaries. During the in vitro culture phase, two groups were established: a control group (no supplementation) and a leonurine group (20 µM). Blastocysts obtained during culture were vitrified using the open-pulled straw (OPS) method. Following storage for 1 week, 1 month, or 6 months, thawed embryos were evaluated for re-expansion and hatching rates. The embryos were thawed after storage periods of one week, one month and six months, after which their re-expansion and hatching rates were evaluated. Re-expanded embryos were classified to determine the inner cell mass (ICM), trophectoderm (TE) and total cell counts (TCC) using differential staining; to determine the apoptotic cell (AHC) and TCC and apoptotic index using TUNEL staining; and to measure the levels of reactive oxygen species (ROS) and glutathione (GSH) using different staining methods. The blastocyst formation rate was 35.85% in the leonurine group and 28.04% in the control group (p < 0.001). Re-expansion rates after vitrification were significantly higher in the leonurine group across all storage durations (p < 0.001), whereas hatching rates did not differ between groups (p > 0.05). After vitrification, embryos thawed and re-expanded after storage periods of 1 week, 1 month, and 6 months showed THS values in the leonurin group of 186.70±31.07; 146.50±13.5 and 123.80±20.63, respectively; in the control group, they were determined as 146.30±24.81; 130.70±17.58 and 115.20±26.56 (p<0.001). Concurrently, AHS was found to be 6.70±2.45, 7.30±3.02, and 7.50±3.02 in the leonurin group, respectively, and 9.80±2.25, 11.40±1.26, and 17.60±5.35 in the control group. Differential staining revealed higher cell counts in the leonurin group (p<0.001). The ROS levels of the embryos on the specified days were 22.02±5.3; 42.07±4.05 and 79.46±9.80 in the leonurin group, and 35.14±0.05; 63.45±7.01 and 125.66±25.62, respectively (p<0.001). Concurrently, it was ascertained that the GSH level was elevated in the leonurin group (p<0.001). However, this level remained constant in both groups due to the extended storage period (p>0.05). Consequently, it was determined that leonurin, recognized for its antioxidant properties, could be administered as a supplement to the culture stage of IVEP in cattle. This approach has the potential to enhance the blastocyst rate and preserve the viability of embryos undergoing vitrification.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    1013996

    İn vitro kültür ortamına katılan kuersetinin sığır embriyo gelişimine etkisi

    Effect of quercetin added to in vitro culture environment on bovine embryo development

    SİDARHAN YATÇI

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2026

    Veteriner HekimliğiAksaray Üniversitesi

    Veterinerlik Fizyolojisi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. TAHİR KARAŞAHİN

  2. Tez No

    870600

    Koyun oositlerinin seçim kriterleri ve kültür ortamına göre in vitro gelişim düzeylerinin araştırılması

    Investigation of in vitro developmental levels of sheep oocytes according to selection criteria and culture medium

    RAMAZAN SEVGİ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    Veteriner HekimliğiSelçuk Üniversitesi

    Veteriner Doğum ve Jinekoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. SAKİNE ÜLKÜM ÇİZMECİ

  3. Tez No

    295809

    İnsan göbek kordon kanı ve periferik kan kaynaklı mezenkimal kök hücrelerinin in vitro kültür ortamına adaptasyonuna etki eden faktörlerin incelenmesi

    Investigation of factors affecting adaptation of human umbilical cord blood and peripheral blood derived mesenchymal stem cell in vitro

    OLGA NEHİR ÖZTEL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2010

    BiyomühendislikYıldız Teknik Üniversitesi

    Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ADİL ALLAHVERDİYEV

  4. Tez No

    431864

    In vitro embriyo kültür medyumlarına ve sperma dilüsyon solüsyonlarına ilave edilen eritropoietinin spermatolojik parametreler, oksidatif stres ve embriyo gelişimi üzerine etkisi

    Effects of erythropoietin addition to sperma dilution solutions and in vitro embryo culture mediums, on spermatological parameters, oxidative stress and embryo development

    MUHARREM SATILMIŞ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    Veteriner HekimliğiAnkara Üniversitesi

    Farmakoloji ve Toksikoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ALİ BİLGİLİ

    PROF. DR. ENDER YARSAN

    PROF. DR. MUSTAFA KAYMAZ

  5. Tez No

    547445

    Sığır oositlerinin in vitro olgunlaştırılmasında kültür medyumuna serum ilavesinin ısı şok protein70 miktarına etkisinin belirlenmesi

    Effect of serum supplementation to culture media in vitro maturation of bovine oocytes on the level of HSP70 synthesis

    RABİA YAŞAR TÜREGÜN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    BiyoteknolojiOndokuz Mayıs Üniversitesi

    Tarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET KURAN

Geri Dön