Alfa-sinüklein fibrili ile oluşturulan Parkinson hastalığı hücre kültürü modelinde Sfingosin-1-fosfat ve SEW2871'in otofajiye etkilerinin incelenmesi
Investigation of the effects of Sphingosine-1-phosphate and SEW2871 on autophagy in an alpha-synuclein fibril-induced Parkinson's disease cell model
- Tez No: 974314
- Danışmanlar: DOÇ. DR. BANU CAHİDE TEL, DR. ÖĞR. ÜYESİ ELHAM BAHADOR ZIRH
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Eczacılık ve Farmakoloji, Pharmacy and Pharmacology
- Anahtar Kelimeler: Alfa sinüklein, Blotting-western, Eczacılık, Farmakoloji, Hücre kültürü, Mikroskopi-elektron, Mikroskopi-flüoresans, Otofaji, Parkinson hastalığı, Sfingozin 1-fosfat, Alpha synuclein, Blotting-western, Pharmacy, Pharmacology, Cell culture, Microscopy-electron, Microscopy-fluorescence, Autophagy, Parkinson disease, Sphingosine 1-phosphate
- Yıl: 2025
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Farmakoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Farmakoloji Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Parkinson hastalığı (PH), alfa-sinüklein (a-sin) birikimi ve nigral dopaminerjik nöron kaybı ile karakterize nörodejeneratif bir hastalıktır. Çözünmeyen a-sin fibrilleri, lipitler ve disfonksiyonel organelleri de içeren Lewy cisimciklerini oluşturur. Lipit homeostazındaki bozulmaların yanı sıra otofaji yolağındaki işlev kaybı da hücre içi a-sin agregasyonuna neden olur. Sfingosin-1-fosfat (S1P), sfingolipit ailesine ait biyoaktif bir lipittir ve S1P reseptör-1 (S1PR1) üzerinden nöroprotektif etkilere sahiptir. Ancak S1P yolağının otofaji ve PH patogenezindeki rolü anlaşılamamıştır. Bu çalışmada, S1P ve S1PR1 agonisti SEW2871'in hücre içi a-sin birikimi ve otofaji yolağı üzerindeki etkileri araştırılmıştır. Farklı sonikasyon parametrelerinin a-sin fibril uzunluğuna etkileri transmisyon elektron mikroskobu ile incelenmiştir. Sıfır derece santigratın altındaki sıcaklıkta ardışık sonikasyon darbeleriyle ortalama uzunluğu 100 nm altında fibriller elde edilmiştir. SH-SY5Y hücrelerinde karakterize fibriller ile a-sin birikimi indüklenmiş ve S1P ile SEW2871 tedavileri uygulanmıştır. Uygulama sonrası a-sin birikimi ile otofajiye ilişkin proteinler (mTOR, beklin-1, p62, LC3B) immünblot ve immünfloresan yöntemleriyle değerlendirilmiştir. S1P ve SEW2871, kısmen S1PR1 aracılı mTOR inhibisyonu üzerinden otofajiyi aktive ederek a-sin birikimini azalttığı saptanmıştır. S1P ve SEW2871 tedavileri p62 ve LC3B yıkımını artırarak a-sin'in otofajik yıkımını artırmış ve beklin-1 düzeyini artırarak otofagozom oluşumunu sağlamıştır. Sonuçta, S1P ve SEW2871 otofajiyi düzenleyerek a-sin birikimini azaltmada PH tedavisinde potansiyel terapötik bir hedef olabilir.
Özet (Çeviri)
Parkinson's disease (PD) is a neurodegenerative disorder characterized by alpha-synuclein (a-syn) accumulation and nigral dopaminergic neuron loss. Insoluble a-syn fibrils form Lewy bodies containing lipids and dysfunctional organelles. Disruptions in lipid homeostasis and impaired autophagy contribute to intracellular a-syn aggregation. Sphingosine-1-phosphate (S1P), a bioactive sphingolipid, exerts neuroprotective effects via S1P receptor-1 (S1PR1), but its role in autophagy and PD pathogenesis remains unclear. This study investigated the effects of S1P and the S1PR1 agonist SEW2871 on a-syn accumulation and autophagy. Sonication parameters affecting fibril length were examined using transmission electron microscopy. Sequential sonication at subzero temperatures produced fibrils under 100 nm. SH-SY5Y cells were treated with characterized a-syn fibrils and then treated with S1P or SEW2871. A-syn accumulation and autophagy-related proteins (mTOR, beclin-1, p62, LC3B) were analyzed by immunoblot and immunofluorescence. S1P and SEW2871 reduced a-syn accumulation by partially inhibiting mTOR via S1PR1, enhancing autophagic flux, and promoting autophagosome formation. These findings suggest S1P and SEW2871 as potential therapeutic targets in PD through autophagy modulation.
Benzer Tezler
- Alfa-sinüklein fibrili ile oluşturulan parkinson hastalığı sıçan modelinde alfa-sinüklein patolojisinin şiddet ve dağılımında glimfatik sistemin rolü
The role of the glymphatic system on the severity and distribution of ALPHA-synuclein pathology in ALPHA-synuclein PRE-formed fibril induced rat model of parkinson's disease
ECE GÖK DURSUN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2022
NörolojiHacettepe ÜniversitesiNöroloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. GÜL YALÇIN ÇAKMAKLI
- Sıçanlarda intraserebroventriküler plazmid ve preformed fibril enjeksiyonu ile oluşturulan alfasinükleinopati parkinson hastalığı modelinde brimonidinin olası nöroprotektif etkisinin incelenmesi
Investigation of possible neuroprotective effect of brimonidine in a alphasynucleinopathy parkinson's disease model created by intracerebroventricular plasmid and preformed fibril injection in rats
GÖKÇE ÇALIŞKAN
Doktora
Türkçe
2023
Eczacılık ve FarmakolojiBaşkent ÜniversitesiFarmakoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ŞABAN REMZİ ERDEM
- BV-2 mikroglial hücre hattında fibril formdaki alfa-sinüklein uygulanmasının IRRK2 metilasyonu üzerine etkisinin araştırılması
Investigation of the effect of alpha-synuclein fibril administration on IRRK2 methylation in BV-2 microglial cell line
MELİHA SÜMEYYE AKAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2022
Eczacılık ve FarmakolojiSüleyman Demirel ÜniversitesiFarmakoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. FATMA NİHAN CANKARA
- Development of a new parkinson's disease model using zebrafish to study alpha-synuclein aggregation
Zebra balığı kullanılarak yeni bir parkinson hastalığı modelinin geliştirilmesi ve alfa sinükleinin rolü
ELİF AKIŞ
Yüksek Lisans
İngilizce
2024
Genetikİhsan Doğramacı Bilkent ÜniversitesiMalzeme Bilimi ve Nanoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
DOÇ. DR. FATİH İNCİ
DR. AYÇA ARSLAN ERGÜL
- Geçici fokal serebral iskemi sonrası alfa-sinüklein ve ubikütin proteinlerinin incelenmesi
Brief focal cerebral ischemia induces alpha-synuclein aggregates in the mouse brain
IŞIN ÜNAL ÇEVİK