Böbrek hücre kültürlerinde kalsiyum oksalat kristallerinin agregasyonunun araştırılması
Başlık çevirisi mevcut değil.
- Tez No: 88871
- Danışmanlar: Belirtilmemiş.
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: Nefroloji, Nephrology
- Anahtar Kelimeler: Böbrek taşları, Hücre kültürü, Kalsiyum oksalat, Sistematik sapma-epidemiyoloji, Kidney calculi, Cell culture, Calcium oxalate, Bias-epidemiology
- Yıl: 1999
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ege Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Nefroloji Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
ÖZET Böbrek taşlan oldukça sık rastlanan ve önemli morbidite taşıyan bir sağlık sorunudur. En sık rastlanan böbrek taşı kalsiyum oksalat taşlandır. Taş oluşumu kalsiyum ve oksalat süpersaturasyonunun bulunduğu tübül sıvısında kristal nükleasyonu ile başlar. Ancak taş oluşumunun bundan sonraki safhaları net olarak bilinmemektedir. Tübül segmentlerindeki süpersatürasyonlar ve in vitro deneylerde kalsiyum oksalat kristallerinin maksimum büyüme hızı hesaplandığında bir kristalin tübüllerde takılacak kadar büyüyemeden idrarla taşınıp atılacağı sonucuna varılmaktadır(33). Agregasyon kristallerin tübülde tutunma ihtimalini belirgin şekilde arttınr, çünkü relatif olarak kısa bir zamanda büyük bir partikül oluşturabilir(38). Normal idrar agregasyonu inhibe eden faktörler içerdiği halde taş oluşumu görülen kişilerin idrarında bu inhibisyon daha zayıftır(30) ve agregasyon defektinin düzeyi taş oluşumu sıklığı doğru orantılıdır(41). Tüm bu nedenlerle agregasyon böbrek taşı oluşumunda önemli bir mekanizma olarak ortaya çıkmaktadır. Bu çalışmada MDCK(Madin-Darby Canine Kidney Cells) hücre kültürlerinde saptanan kristal agrege edici aktivitenin incelenmesi ve saflaştınlması amaçlanmıştır. Yapılan deneylerde tek katmanlı MDCK hücre kültürlerinin yüksek miktarda kristal agrege edici aktivite taşıdığı ve kristal agrege edici faktör (KAF) adı verilen bu maddenin disülfit bağlan içeren kuvvetli derecede anyonik bir protein yapısında olduğunu görüldü. KAF'ün hücrelerin apikal yüzünden salındığı saptandı. KAF'ün değişik kristaller üzerinde etkisi incelendiğinde, kalsiyum içeren kristaller olan kalsiyum oksalat, hidroksiapatit ve bruşit agrege olurken ürik asit ve Na-H ürat kristalleri etkilenmedi. KAF'ün saflaştınlması için kolon kromatografisi ile aynlan aktif fraksiyonlar toplanarak konsantre edildi. Bu materyal SDS-PAGE elektroforezi ile analiz edildi. İndirgemeyen koşullarda yaklaşık 670 kDa ağırlığında tek bir bant, indirgeyen koşullarda disülfit bağlarının kınlması ile ise molekül ağırlıklan 35 ila 150 kDa arasında değişen altı ayn bant saptandı. Jelden elusyon yapılarak bu bantlann her birinde kristal agrege edici aktivite arandı. Kristal agrege edici aktivite sadece indirgemeyen koşullarda elde edilen 670 kDa bantta, yani intakt 32faktörde bulundu. Yapılan amino asit analizinde büyük miktarda asparagin/aspartik asit (%. 12.4) ve glutamine/glutamik asit(% 17.3) rezidüleri içerdiği görüldü. Bu faktörün taşıdığı yüksek negatif yükü açıklar. Karbohidrat miktarı % 6.3 olarak saptandı. Amino asit dizilim analizine tabi tutulan 670 kDa bandın ilk altı amino asiti belirlendi. Ayrıca 150 kDa ve 85 kDa bantlar da analiz edildi. 670 kDa proteinin ve indirgeme sonrası ortaya çıkan 150 kDa parçasının N-terminal amino asit dizilimi alfa 2- makroglobuline kuvvetli bir benzerlik gösterdi. 150 kDa bandın lisin-C parçalaması ile elde edilen fragmanları da alfa 2-makroglobulinin amino asit dizilimi ile benzerlik taşıyordu. 85 kDa ağırlığındaki bandın lisin-C ile parçalanma sonrası analizinde Ig u zinciri ile kuvvetli bir benzerlik saptandı. Ticari alfa 2-makroglobuIin ve IgM tek tek veya birarada değişen konsantrasyonlarda kristal agregasyonuna neden olmadı. Bu bulguların ışığında, kristal agrege edici faktörün MDCK hücre kültür sıvısında oluşan ve başlıca komponentleri alfa 2-makroglobulin ve Ig m zincirini olan bir protein kompleksi olduğu sonucuna varıldı. Alfa 2-makroglobulinin muhtemelen MDCK hücreleri tarafından salman bir protein ile aktive olarak şekil değiştirdiği ve kompleksin temelini oluşturduğu düşünülmektedir. Distal tübül / toplayıcı kanal hücrelerini temsil eden MDCK kültürlerinin böyle kristal agregan aktivite taşıması böbrek taşlarının oluşumu patogenezinde önemli olabilir. 33
Özet (Çeviri)
Özet çevirisi mevcut değil.
Benzer Tezler
- Üç farklı tip kök kanal dolgu maddesinin sitotoksik etkileri ve duvar adaptasyonlarının karşılaştırmalı olarak değerlendirilmesi
Comparative evaluation of the cytotoxic effects and the dentinal wall adaptation of three different root canal filling pastes
MELAHAT GÖRDUYSUS AKIN
- Koyunlarda abortusa sebep olan Chlamydia Psittaci'nin izolasyonu üzerine çalışmalar
Studies on isolation of Chlamydia Psittaci caused to abortion in ewes
HÜLYA TÜRÜTOĞLU
- İmmünoglobülin A nefropatili hastalarda immün faktörlerin araştırılması
Investigation of immune factors in IgA nephropathy
AYLA GÜNLEMEZ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1998
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıAnkara ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MESİHA EKİM