Wharton jeli kökenli mezenkimal kök kücrelerin (iWJ-MKH'lerin) ımmünomodulatuvar özellikleri
Immunomodulatory properties of wharton jelly-derived mesenchymal stem sells (iWJ-MSCs)
- Tez No: 848286
- Danışmanlar: DOÇ. DR. AYLA EKER SARIBOYACI
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Genetik, Biyoloji, Allerji ve İmmünoloji, Genetics, Biology, Allergy and Immunology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2024
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Eskişehir Osmangazi Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kök Hücre Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Amaç: Bu tez çalışmasının amacı, hem potensi hem de allojenik kullanımları ile ön plana çıkmış olan iWJ-MKH'lerin immunosupresif etkinliğini artırmak için immünregülasyonda görev alan matür miRNA-181a'yı transfekte etmek ve transfeksiyonun etkisini, in vitro bağışıklık sistemi modeli olan insan pan T hücre modelinde analiz etmektir. Yöntem: Bu tez çalışmasında miRNA transfekte iWJ-MKH'lerle ko-kültür sonrası T hücre yanıtı; canlılık ve proliferasyon (CCK8), apoptosis (AnnexinV-PI yöntemi) ve hücre siklusu değişimi (flow sitometrik hücre siklusu analizi), anti- ve pro-inflamatuar sitokinler (TGF-beta1, IL-6, TLR-4 ve STAT1), regülatuar T-hücre (Treg) (CD4+CD25+Foxp3+), T-bet ve T hücre belirteç/gen ekspresyonları (CD3,CD4, CD45, CD4+CD8 ve CD69) üzerindeki etkisi analiz edildi. Bulgular: PHA-M ile aktive edilmiş T lenfositlerinde faz konstrat mikroskopu ile belirgin ve canlılık oranı yüksek koloni oluşturma yetenekleri gösterildi. Hem miRNA transfekte edilmiş hem de edilmemiş iWJ-MKH'lerin 4. günde apoptotik etki göstermediği üstelik apoptozun azaldığı tespit edildi. Hücre siklusu analizinde 4. günde yalnız T hücreleri ile karşılaştırdığımızda MKH'ler ile ko-kültür edilen T hücrelerinde proliferasyon ve apoptozun azaldığı ve miRNA transfekte MKH'ler ile ko-kültür edilenlerde ise proliferasyonun azaldığı ve apoptozun arttığı (*p<0.05) belirlendi. Her iki ko-kültür grubunda da T hücre belirteçlerini eksprese eden T hücre %'sinin azaldığı belirlendi. TGF-beta gen ekspresyonu azalmışken kokültür besiyerindeki hem MKH hem Treg'den sekreyonunun arttığı ve Tbet hücre populasyonunun artmasına rağmen salgısı olan IFN-gama sekreyonunun ise azaldığı belirlendi. MKH'lerde miRNA transfeksiyonunun, T hücre proliferasyon, apoptoz ve Treg ve T-bet populasyonunu arttırdığı gözlemlendi. Sonuç: miR-181a transfeksiyonunun MKH'lerin immunsupresif etkilerini IL-6, STAT-1 ve DUSP5 genleri ve TGF-beta ve IFN-gama sitokinleri yoluyla düzenlediği sonucuna varıldı. Bu proje TUSEB A2 31858 nolu projesi ile desteklenmiştir.
Özet (Çeviri)
Objective: The aim of this thesis is to transfect mature miRNA-181a involved in immunoregulation to increase the immunosuppressive efficacy of iWJ-MSCs, which have come to the forefront with both their potency and allogeneic use, and to analyze the effect of transfection in the human pan T cell model, an in vitro immune system model. Methods: In this thesis, T cell response after co-culture with miRNA transfected iWJ-MKCs; viability and proliferation (CCK8), apoptosis (AnnexinV-PI method) and cell cycle change (flow cytometric cell cycle analysis), anti- and pro-inflammatory cytokines (TGF-beta1, IL-6, TLR-4 and STAT1), regulatory T-cell (Treg) (CD4+CD25+Foxp3+), T-bet and T-cell marker/gene expressions (CD3, CD4, CD45, CD4+CD8 and CD69) were analyzed.. Results: PHA-M activated T lymphocytes were shown to be capable of forming distinct and highly viable colonies by phase-constrate microscopy. Both miRNA-transfected and non-miRNA-transfected iWJ-MSCs did not show apoptotic effect on day 4 and apoptosis was decreased. In cell cycle analysis, proliferation and apoptosis were decreased in T cells co-cultured with CCPs and proliferation was decreased and apoptosis was increased (*p<0.05) in those co-cultured with miRNA transfected CCPs compared to T cells alone on day 4. The percentage of T cells expressing T cell markers decreased in both co-culture groups. While TGF-beta gene expression was decreased, its secretion from both MSCs and Tregs in coculture medium increased and IFN-gamma secretion decreased despite the increase in Tbet cell population. It was observed that miRNA transfection increased T cell proliferation, apoptosis and Treg and T-bet populations in CRCs. Conclusion: It was concluded that miR-181a transfection regulates the immunosuppressive effects of CCPs through IL-6, STAT-1 and DUSP5 genes and TGF-beta and IFN-gamma cytokines. This study was financially supported by grants (YL A2 31858) Turkish Institutes of Health (TÜSEB
Benzer Tezler
- Ön koşullandırma ile eğitilmiş insan Warton jeli kökenli mezenkimal kök hücrelerin immunoterapötik yeteneklerinin araştırılması
Investigation of immunotherapeutic capabilities of preconditioned human Wharton jelly derived mesenchymal stem cells
LAMIYA MAHMUDOVA
Yüksek Lisans
Türkçe
2025
Tıbbi BiyolojiEskişehir Osmangazi ÜniversitesiKök Hücre Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ SİBEL GÜNEŞ BAĞIŞ
- Çip üzerinde organ çalışmalarında intrasellüler analizler için mikrofiltrasyon geliştirilmesi
Development of microfiltration for intracellular analysis in organ-on-chip studies
AYTAN HUMMATOVA
Yüksek Lisans
Türkçe
2026
BiyolojiEskişehir Osmangazi ÜniversitesiKök Hücre Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HÜSEYİN AVCI
ÖĞR. GÖR. HAMED GHORBANPOOR
- Kordon kökenli mezenkimal kök hücrelerinin hepatosit hücrelerine farklılaştırılmasının optimizasyonu
Optimisation of the differentiation of cord originated mesenchymal stem cells into hepatocyte cells
MELİKE ERSÖZ
Doktora
Türkçe
2014
BiyokimyaYıldız Teknik ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ADİL ALLAHVERDİYEV
- 3D patterned cardiac tissue construct formation using biodegradable materials
Biyobozunur malzemelerden üç boyutlu, yönlendirilmiş kalp kas dokusu oluşturulması
HALİME KENAR
Doktora
İngilizce
2008
BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyoteknoloji Bölümü
DOÇ. DR. GAMZE TORUN KÖSE
PROF. DR. VASIF HASIRCI
- Eksozom metformin kombinasyon terapötik ajanının geliştirilmesi ve in vitro kas atrofi modelinde etkinliğinin incelenmesi
Development of exosome-metformin combination therapeutic agent and investigation of its efficacy in an in vitro muscle atrophy model
SENA ONUK
Yüksek Lisans
Türkçe
2025
Biyomühendislikİstinye ÜniversitesiKök Hücre ve Doku Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ ASLI PINAR ZORBA YILDIZ