Triple negatif meme kanserinde WNT/B-katenin sinyal yolağının inhibisyonunun terapötik etkisi
Therapeutic effect of inhibition of WNT/β-catenin signal pathway in triple negative breast cancer
- Tez No: 777620
- Danışmanlar: DOÇ. DR. ENİS DİKİCİER
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: Genel Cerrahi, Onkoloji, General Surgery, Oncology
- Anahtar Kelimeler: Triple negatif meme kanseri, Wnt/β-katenin, TNIK, NCB-0846, Beta katenin, Meme hastalıkları, Meme neoplazmları, Neoplazmlar, Sinyal nakli, İnhibisyon, Triple negative breast cancer, Wnt/β-catenin, TNIK, NCB-0846, Beta catenin, Breast diseases, Breast neoplasms, Neoplasms, Signal transduction, Inhibition
- Yıl: 2023
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Sakarya Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Genel Cerrahi Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
GİRİŞ VE AMAÇ: Wnt/β-katenin sinyal yolağının aktivatör kinazı olan TNIK' ın NCB-0846 ile inhibisyonunun triple negatif meme kanseri üzerindeki terapötik etkisinin moleküler düzeyde araştırılması amaçlanmıştır. YÖNTEM: Triple negatif meme kanseri hücre hattı olarak MDA-MB-231, kontrol hücre hattı olarak ise MCF-10A hücreleri kullanılmıştır. WST-1 analizi ile NCB-0846'nın sitotoksik etkisi, Annexin V analizi ile apoptotik etkisi, hücre döngüsü analizi ile hücre döngüsüne etkisi ise , Akridin Oranj boyama ile hücre morfolojisine olan etkisi gösterilmiştir. Ayrıca CTNNB1 (β-katenin) gen ekspresyonu üzerindeki etkisi RT-PCR analizi gösterilmiştir. Tüm analizlerde hücrelere 1, 2 ve 3 μM dozlarda NCB-0846 uygulanmış ve NCB-0846 uygulanmayan hücre hatları negatif kontrol grubu olarak değerlendirilmiştir ve deneyler üçer kez tekrar edilmiştir. BULGULAR: NCB-0846, MDA-MB-231 hücrelerindeki canlılık oranları zaman ve doz bağımlı olarak anlamlı bir şekilde azalmıştır (p<0,01). MDA-MB-231 hücreleri için en düşük canlılık oranları 72 saat inkübasyon sonrasında 3 μM dozda %42,20 olarak belirlenmiştir. MCF-10A hücrelerinde 72 saat inkübasyon sonrasında 3 μM dozda canlılık oranı %53,92 olarak belirlenmiştir (p<0.01). Apoptotik hücre oranları, MDA-MB-231 ve MCF-10A hücrelerinde 3 μM NCB-0846 inkübasyon için sırasıyla %60,5 ve % 39,33 olarak tespit edilmiştir. MDA-MB-231 hücrelerinde NCB-0846'nın artan konsantrasyonuna bağlı olarak G2/M evresinde hücre tutulmasına neden olduğu belirlendi (p<0.01). Ayrıca morfolojik olarak, MDA-MB-231 hücrelerinde DNA fragmentasyonu, kromatin yoğunlaşması ve hücre büzülmesi gözlemlendi. RT-PCR analizinde ise MDA-MB-231 hücrelerinde CTNNB1 ekspresyon seviyesi azalırken, MCF-10A hücrelerinde anlamlı bir şekilde arttığı tespit edilmiştir. SONUÇ: NCB-0846'nın, MDA-MB-231 hücrelerinde hücre canlılığını inhibe ederken, apoptozu indüklediği gösterildi. Sonuçlarımız, NCB-0846'nın kanser tedavisi için uygun bir aday olabileceğini, ancak moleküler düzeyde etki mekanizmalarını daha iyi anlamak için daha ileri in vitro ve in vivo çalışmaların gerekli olduğunu göstermektedir.
Özet (Çeviri)
AIM: It was aimed to investigate the therapeutic effect of NCB-0846 inhibition of TNIK, which is the activator kinase of Wnt/β-catenin signaling pathway, on triple negative breast cancer at the molecular level. MATERIAL AND METHOD: MDA-MB-231 cells were used as triple negative breast cancer cell line and MCF-10A cells were used as control cell line. WST-1 analysis showed the cytotoxic effect of NCB-0846, Annexin V analysis showed its apoptotic effect, cell cycle analysis showed its effect on cell cycle, and Acridine Orange staining showed its effect on cell morphology. In addition, the effect of NCB-0846 on CTNNB1 (β-catenin) gene expression was demonstrated by RT-PCR analysis. RESULTS: The viability rates in NCB-0846, MDA-MB-231 cells decreased significantly in a time and dose dependent manner (p<0.01). The lowest viability rates for MDA-MB-231 cells were determined as 42,20% at the 3 μM dose after 72 hours of incubation. After 72 hours of incubation in MCF-10A cells, the viability rate was determined as 53,92% at 3 μM dose (p<0.01). Apoptotic cell rates were determined as 60,5% and 39,33% for 3 μM NCB-0846 incubation in MDA-MB-231 and MCF-10A cells, respectively. It was determined that NCB-0846 caused cell uptake in the G2/M phase due to the increasing concentration in MDA-MB-231 cells (p<0.01). In the RT-PCR analysis, while the expression level of CTNNB1 was decreased in MDA-MB-231 cells, it was determined that it increased significantly in MCF-10A cells. CONCLUSION: NCB-0846 was shown to induce apoptosis while inhibiting viability in MDA-MB-231 cells. Our results suggest that NCB-0846 may be a suitable candidate for cancer therapy, but further in vitro and in vivo studies are required to better understand its mechanisms of action at the molecular level.
Benzer Tezler
- Kolorektal kanserli hastalarda axin1 ve galektin-3 gen varyantlarının incelenmesi ve galektin-3 serum düzeyinin belirlenmesi
Invesitgation of axin 1 and galektin-3 gene variants and detection of galectin-3 serum levels in colorectal cancer patients
GURBET KORKMAZ
Yüksek Lisans
Türkçe
2013
Moleküler Tıpİstanbul ÜniversitesiMoleküler Tıp Ana Bilim Dalı
PROF. DR. İLHAN YAYLIM
- Triple negatif meme kanserinde immünhistokimyasal androjen reseptörü ekspresyonunun klinikopatolojik parametreler ile ilişkisi
Relationship between immunohistochemical androgen receptor expression and clinicopathological parameters in triple negative breast cancer
AYŞE GÜL ÖRMECİ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2016
PatolojiAdnan Menderes ÜniversitesiTıbbi Patoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MUHAN ERKUŞ
- Triple negatif meme kanserinde tümör lenfosit infiltrasyonunun prognostik önemi
Prognostic value of tumor lymphocyte infiltration in triple negative breast cancer
ÖZGECAN DÜLGAR
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2016
Onkolojiİstanbul Üniversitesiİç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ZEYNEP HANDE TURNA
- Triple negatif meme kanserinde elimusertib ATR inhibitörünün anti-kanser etkisinin belirlenmesi
Determination of anti-cancer effect of elimusertib ATR inhibitor on triple-negative breast cancer
AYTEN HACIEFENDİ
Yüksek Lisans
Türkçe
2022
Tıbbi BiyolojiSakarya ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. GAMZE GÜNEY ESKİLER
- Triple negatif meme kanserinde çoklu ilaç direncinde rol alan miRNA ve hedeflediği genlerin terapötik etkisinin araştırılması
The investigation of therapeutic effect of miRNA and targeted genes involved in multidrug resistance in triple negative breast cancer
SERCAN KENANOĞLU