Temozolomid ve genistein yüklü polimerik nanopartiküllerin anti-proliferatif ve apoptotik etkilerinin insan glioblastoma hücrelerinde karşılaştırmalı analizi
Comparative analysis of antiproliferative and apoptotic effects of temozolomide and genistein loaded polymeric nanoparticles in human glioblastoma cells
- Tez No: 676367
- Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ AYŞEGÜL ERDEMİR ÜSTÜNDAĞ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Genetik, Biyoteknoloji, Genetics, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Beyin hücreleri, Brain cells
- Yıl: 2021
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Yıldız Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Glioblastoma multiforme (GBM), en yaygın ve agresif beyin kanser türlerinden biridir. GBM'nin yüksek düzeyde invaziv doğası ve kan-beyin bariyeri (KBB) gibi fizyolojik engellerden ilaç penetrasyonunun zorluğu GBM tedavisini zorlaştırmaktadır. Temozolomid (Tmz), GBM tedavisinde kullanılan standart kemoterapi ajanıdır. Ancak, KBB ve tümör hücre zarlarından düşük geçirgenlik, Tmz'nin farmakolojik aktivitesini ve biyoyararlanımını azaltmaktadır. Daha etkin glioblastoma tedavisi için kemoterapi duyarlılığını arttıracak ve yan etkileri azaltacak yeni stratejilerin geliştirilmesine ihtiyaç duyulmaktadır. İnsan diyetindeki en büyük izoflavon olan genistein (Gen) hücre bölünmesi kontrolü, apoptotik hücre ölümü, hücre göçü, invazyon, anjiyogenez ve metastaz gibi hücresel olayları kontrol eden potansiyel bir kemoterapötik ajandır. Ancak bu molekülün anti-kanser ajan olarak kullanımı suda düşük çözünürlüğü sebebiyle sınırlıdır. Nano-ilaç taşıma sistemleri, hem temozolomid hem de genisteinin dezavantajlarının üstesinden gelmek ve biyolojik aktivitelerini geliştirmek için kullanılabilecek önemli araçlardır. Bu tez çalışmasında, Gen ve Tmz yüklü PLGA nanopartikül sistemlerinin (TmzGenNP) üretimi, karakterizasyonu ve U87MG glioblastoma hücreleri üzerindeki anti-tümör aktivitelerinin değerlendirilmesi amaçlanmıştır. Bu amaçla temozolomid ve genistein yüklü PLGA nanopartiküller tekli emülsiyon (o/w) çözücü uçurma yöntemi ile sentezlenmiştir. Nanopartiküllerin fizikokimyasal karakterizasyonu, nanopartiküllerin küçük boyutlu, uniform ve kontrollü salım özelliklerine sahip olduğunu ortaya koymuştur. TmzGenNP'nin U87MG glioblastoma hücreleri üzerindeki sitotoksik aktiviteleri MTT yöntemi ile belirlenmiştir. U87MG hücrelerinin Tmz/Gen kombinasyonu ve TmzGenNP ile 24 saat inkübasyonu sonrası IC50 değerleri sırasıyla 15.29 μg/ml ve 16.72 μg/ml, 48 saat inkübasyonu sonrası IC50 değerleri ise 71.48 μg/ml ve 3.43 μg/ml olarak belirlenmiştir. Yara iyileşme testi ile TmzGenNP'nin U87MG hücre göçünü önemli ölçüde inhibe ettiği gösterilmiştir. BrdU inkorporasyon analizi, TmzGenNP'nin U87MG hücre proliferasyonunu doza bağımlı olarak azalttığını ortaya koymuştur. TmzGenNP'nin apoptotik genlerin ekspresyonunu arttırdığı kantitatif real-time PCR analizi ile gösterilmiştir. Ayrıca, TmzGenNP'nin U87MG hücrelerinde intrinsik apoptozu indüklediği immunoblot analizi ile tespit edilmiştir. Bu tez çalışmasından elde edilen bulgular, TmzGenNP'nin U87MG hücrelerinde gelişmiş anti-tümör aktivitesi sergilediğini ve ikili nano-ilaç dağıtımının glioblastomaya karşı umut verici bir strateji olabileceğini göstermiştir.
Özet (Çeviri)
Glioblastoma multiforme (GBM) is one of the most common and aggressive types of brain cancer. The highly invasive nature of GBM and the difficulty of drug penetration from physiological barriers such as the blood-brain barrier (BBB) make GBM treatment difficult. Temozolomide (Tmz) is the standard chemotherapy agent used in the treatment of GBM. However, low permeability through BBB and tumor cell membranes reduces the pharmacological activity and bioavailability of Tmz. For more effective glioblastoma treatment, new strategies are needed to increase chemotherapy sensitivity and reduce side effects. Genistein (Gen), the largest isoflavone in the human diet, is a potential chemotherapeutic agent that controls cellular events such as cell division control, apoptotic cell death, cell migration, invasion, angiogenesis, and metastasis. However, the use of this molecule as an anti-cancer agent is limited due to its low solubility in water. Nano-drug delivery systems are important tools that can be used to overcome the disadvantages of both temozolomide and genistein and improve their biological activity. In this thesis, it is aimed to produce and characterize Gen and Tmz loaded PLGA nanoparticle systems (TmzGenNP) and to evaluate their anti-tumor activities on U87MG glioblastoma cells. For this purpose, temozolomide and genistein-loaded PLGA nanoparticles were synthesized by a single emulsion (o/w) solvent evaporation method. Physicochemical characterization of nanoparticles revealed that nanoparticles have a small size, uniform, and controlled release properties. The cytotoxic activities of TmzGenNP on U87MG glioblastoma cells were determined by the MTT method. After 24 hours incubation of U87MG cells with Tmz/Gen combination and TmzGenNP, IC50 values were determined as 15.29 μg/ml and 16.72 μg/ml, respectively and after 48 hours of incubation, IC50 values were determined as 71.48 μg/ml and 3.43 μg/ml, respectively. With the wound healing assay, it has been shown that TmzGenNP significantly inhibited U87MG cell migration. BrdU incorporation analysis revealed that TmzGenNP decreased U87MG cell proliferation in a dose-dependent manner. Quantitative real-time PCR analysis has shown that TmzGenNP increases the expression of apoptotic genes. In addition, induction of intrinsic apoptosis in U87MG cells by TmzGenNP was determined by immunoblot analysis. Findings from this thesis showed that TmzGenNP exhibits enhanced anti-tumor activity in U87MG cells and dual nano-drug delivery can be a promising strategy against glioblastoma.
Benzer Tezler
- Temozolomid ve vismodegib kombinasyonunun beyin tümörü patogenezindeki rolünün moleküler boyutta incelenmesi
Investigating the role of temozolomide and vismodegib combination on brain tumor pathogenesis in molecular dimension
ÖZGÜN ÖZALP
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
Tıbbi BiyolojiEge ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ÇIĞIR BİRAY AVCI
- Temozolomid ve resveratrolün glioma hücrelerindeki stres proteinleri üzerine etkileri
The effects of temozolomide and resveratrol on stress proteins in glioma cells
ELİF MERTOĞLU
Doktora
Türkçe
2019
Biyokimyaİstanbul ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. EVREN ÖNAY UÇAR
- Lipopolisakkarit ve temozolomid ile muamele edilmiş glioblastoma hücresinde gremlin -1 ekspresyon düzeylerinin belirlenmesi
Determination of gremlin-1 expression levels in glioblastoma cell processed with lipopolysaccharide and temozolomide
ÖZGE KEDİK
Yüksek Lisans
Türkçe
2020
OnkolojiTekirdağ Namık Kemal ÜniversitesiTümör Biyolojisi ve İmmünolojisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SAVAŞ GÜZEL
- Glioblastoma multiforme'de konkomitant ve adjuvant Temozolomid'in prognoz ve sağkalıma etkisi
Effect on prognosis and survival on treatment results of glioblastoma multiforme patients treated with concomitant and adjuvant temozolomide
CAN SEZER
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2010
NöroşirürjiÇukurova ÜniversitesiBeyin ve Sinir Cerrahisi Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. TAHSİN ERMAN
- Radyoterapi ile eş zamanlı ve adjuvan temozolomid tedavisi uygulanmış glioblastoma multiformeli olgularda progresyon ve psödoprogresyon ayrımının perfüzyon MRG ile değerlendirilmesi
Evaluation of differentiaton between progression and pseudoprogression in glioblastome multiforme cases taking radiotherapy with concomitant and adjuvant temozolomid treatment via perfusion MRG
OLGUN ŞAHİN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2010
Radyoloji ve Nükleer TıpEge ÜniversitesiRadyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. M. CEM ÇALLI