İnek sütü ksantin oksidazının saflaştırılması ve bazı kinetik özelliklerinin incelenmesi
Purification and some kinetic properties of bovine milk xanthine oxidase
- Tez No: 58843
- Danışmanlar: DOÇ. DR. KADER KÖSE
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Ksantin oksidaz, Süt, Xanthine oxidase, Milk
- Yıl: 1997
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Erciyes Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Bu çalışmada, inek sütünden, ksantin oksidoredüktaz (XOR)'ın serbest radikal üretimine yol açan Tip O formunda saflaştırılması ve saflaştırılan enzimin kinetik özelliklerinin incelenmesini takiben, SOD aktivitesi tayininde kullanılabilirliğinin araştırılması planlandı. Dithiothreitol (DTT) (T) içeren ve içermeyen (E) ortamlarda enzim saflaştırılması yapıldı. Ksantin oksidaz, DTT'siz ortamda 23.74 kez, DTTli ortamda 74 kez saflaştırıldı. İki farklı ortamda saflaştırılan enzimin SDS-PAGE ile molekül ağırlığı 80.000 D olarak belirlendi. Ksantin oksidaz (I ve II) için optimum sıcaklık 25°C, optimum pH 8,0 olarak bulundu. Ksantin oksidaz (I ve II)'nin ksantin substratına ait Km değerleri sırasıyla 0,034 mM, 0,047 mM olarak ve maksimum hız değerleri 800 uM/dk, 813 uM/dk olarak hesaplandı. N-nitrozomorfolin (NMOR)'in, DTTli ve DTTsiz ortamda saflaştınlan enzimi nonkompetitif oalrak inhibe ettiği gözlendi. Saflaştırmayı takiben ^O^C'de, 3 aylık sakalama süresi içinde, XO(I)'in aktivitesinin değişmediği, XO(ü)'m aktivitesinin ise % 29 oranında azaldığı görüldü. Sadece DTTli ortamda saflaştırılan enzimin, uygun bir düzeltme faktörü yardımıyla, SOD aktivitesi tayininde kullanılabileceği belirlendi. Sonuç olarak DTTsiz ortamda saflaştırılan fakat DTTli ortamda, -20°C'de sakalanılan inek sütü XO'in; SOD tayinininde, bir düzeltme faktörü yardımıyla, kullanılabileceği görüşüne varıldı.
Özet (Çeviri)
Our objectives were to purify the Type O form of Xanthine oxidoreductase (XOR) which leads to free radical generation from bovine milk and to examine whether this purified enzyme could be used in the determination of SOD activity followed by the examination of kinetic properties of XOR. The purification of XOR was carried out under two different mediums, in the presence (I) or absence of dithiothreitol (DTT) (II). The rate of purification was found to be 23,74 and 73.7 according to the mediums containing DTT (I) or not (II). The molecular mass (M.W) of XO (I and II) was determined as 80.000 D. It has been found that 25°C and pH 8.0 were optimal for XO ( I and II). Km and V max of XO (I and II) were found to be 0,034 mM, 0,047 mM and 800 uM.min,813 uM.min, respectively. N-nitrosomorpholine (NMOR) showed non- competitive inhibition on the activity of XO (I and H). Following the purification XO (I) activity was not changed but XO (D) activity decreased by 29 %, in a period of 3 months at - 20°C. It has been determined that only the enzyme purified under DTT containing medium could be used for assaying SOD activity, using an appropriate co-efficient factor. In conclusion, XO purified from bovine milk, without DTT, but stored at-20°C under DTT containing medium could be used for the determination of SOD activity with tiie help of a co-efficient factor.
Benzer Tezler
- İnek, koyun ve keçi sütlerinden üretilen ve farklı materyallerde olgunlaştırılan tulum peynirlerinin özellikleri üzerinde karşılaştırmalı bir araştırma
Başlık çevirisi yok
MEHMET GÜVEN
Doktora
Türkçe
1993
Gıda MühendisliğiÇukurova ÜniversitesiGıda Bilimi ve Teknolojisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ATİLLA KONAR
- İnek ve keçi sütlerinden üretilen ve 15 gün süre ile depolanan meyveli/aromalı ve sade yoğurtların nitelikleri üzerinde karşılaştırmalı bir araştırma
Research on the qualities of the set type plain and fruit-aroma yogurts produced from cowis and goats milk and stured for 15 days
MUSA SERDAR AKIN
Doktora
Türkçe
1996
Gıda MühendisliğiÇukurova ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF.DR. ATİLLA KONAR
- Farklı yöntemlerle inek sütünden kımız üretimi üzerinde bir araştırma
A Study on the manufacture of koumiss from cow's by using different methods
MELİKE ÖZER
- Hellim peyniri yapımında soya sütü kullanımı
Using of soymilk in helloum chease making
HASAN TEMİZ
Doktora
Türkçe
1999
Gıda MühendisliğiOndokuz Mayıs ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. A. KADİR HURŞİT
- İnek sütlerine B-galaktosidaz (laktoz) enzimi katılarak yapılan beyaz peynirlerin özellikleri üzerine araştırmalar
Başlık çevirisi yok
MİHRİBAN KORUKLUOĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
1986
Gıda MühendisliğiEge ÜniversitesiTarım Ürünleri Teknolojisi Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. ERGİN OKTAR