Geri Dön

Dizel egzoz partiküllerinin (DEP) serumlu ortamda insan akciğer epitel hücre canlılığı üzerindeki etkisi

Effects of diesel exhasust particles (DEP) on human airway epithelial cell viability under serum condition

  1. Tez No: 242973
  2. Yazar: FÜSUN FAKILI
  3. Danışmanlar: PROF. DR. HASAN BAYRAM
  4. Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
  5. Konular: Göğüs Hastalıkları, Chest Diseases
  6. Anahtar Kelimeler: Dizel kurum, Diesel soot
  7. Yıl: 2009
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Gaziantep Üniversitesi
  10. Enstitü: Tıp Fakültesi
  11. Ana Bilim Dalı: Göğüs Hastalıkları Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Partiküler hava kirliliği ile solunum hastalıkları arasında yakın bir ilişki gösterilmesine rağmen altta yatan mekanizmalar açık değildir. Çalışmalarda, dizel egzoz partiküllerinin (DEP), serumsuz kültür ortamında hava yolu epitel hücre proliferasyonuna yol açtığı gösterildiği halde, inflame hava yollarında gözlenene benzer serumlu ortamda DEP'nin hava yolu hücre canlılığını etkileyip etkilemeyeceği bilinmemektedir. Çalışmamda, DEP'nin serumlu (FCS) kültür ortamında A549 hücre canlılığı üzerindeki etkilerini ve altta yatan mekanizmaları araştırmayı amaçladım.A549 hücre kültürleri 12 kuyucuklu `plate'lerde ekilerek, %0-10 FCS'li ortamda N-asetil sistein (NAC), c-jun N-terminal kinaz (JNK), extra regulated kinaz (ERK) ve nükleer faktör (NF)-?B inhibitörlerinin varlığında veya yokluğunda 0-1000?g/ml DEP'e maruz bırakılarak, hücre canlılığı MTT boyama tekniği ile değerlendirildi. `Flask'lara ekilen hücreler %3.3 FCS ortamında 200?g/ml DEP'e maruz bırakılarak, akım sitometri tekniği (FACS) ile apoptozis çalışıldı. Benzer flasklardan elde edilen hücrelerde p21, p27 ve p53 proteinlerinin mRNA ekspresyonu gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (RT-PCR) ile araştırıldı.Serumsuz ortamda, DEP (50-200?g/ml) hücre canlılığını artırırken, %1 FCS'li ortamda bu etki gözlenmedi. %3.3 FCS ortamında ise 50-1000?g/ml DEP hücre canlılığını baskılarken, %10 FCS varlığında bu etki ortadan kalktı. Hücreler %3.3 FCS varlığında çalışma drugları ile inkübe edildiğinde, NAC (3.3-33mM) ve JNK (10-33 ?M), ERK (3.3-33?M) ile NF-?B (3.3-33?M) inhibitörleri hücre canlılığını baskılarken, 200?g/ml DEP eklendiğinde sadece 33mM NAC ve 33?M JNK inhibitörü hücre canlılığını azalttı. DEP, FACS çalışmalarında hücre apoptozisini etkilemezken, p21 ekspresyonunda bir artış eğilimi gözlendiyse de, teknik sorunlardan dolayı p21, p27 ve p53 mRNA ekspresyonu istatistiksel olarak değerlendirilemedi.Bu bulgular DEP'nin ödemli hava yollarında hava yolu epitel hücre canlılığını baskılamak suretiyle astım ve KOAH gibi hastalıklarının patogenezinde rol oynayabileceklerini düşündürmektedir. Ancak altta yatan mekanizmaların araştırılması için daha fazla çalışmaya ihtiyaç vardır.

Özet (Çeviri)

Although there is a close association between particular air pollution and respiratory diseases, the underlying mechanisms are unclear. It has been reported that diesel exhaust particles (DEP) induce epithelial cell proliferation under serum-free condition; however, it is not known whether these particles have any effect on the proliferation of airway epithelial cells in the presence of serum, a condition that can be seen in inflamed airways. The aim of my studies was to investigate effects of DEP on viability of A549 cells under serum condition (FCS), and the underlying mechanisms.We cultured A549 cells in 12 well culture plates, and incubated these with N-acetyl cysteine (NAC), and inhibitors of c-jun N-terminal kinase (JNK), extra regulated kinase (ERK) and nuclear factor (NF)-?B in the presence and absence of DEP (0-1000 ?g/ml) under 0-10% FCS condition, and assessed cell viability using MTT staining. Cells cultured in flasks under 3.3% FCS media incubated with 200?g/ml DEP, and analysed for apoptosis by flow cytometry (FACS). Cells obtained in similar flasks were also analysed for p21, P27 and p53 mRNA expression by means of real-time polymerase chain reaction (RT-PCR).Although DEP (50-200?g/ml) increased cell viability under serum free condition, this was not observed in the presence of 1% FCS. DEP (50-1000?g/ml) decreased cell viability under 3.3% FCS, however; when 10% FCS added this effect disappeared. NAC (3.3-33mM) and inhibitors of JNK (10-33?M), ERK (3.3-33?M) and NF-?B (3.3-33?M) decreased cell viability under 3.3% FCS condition, whereas only 33mM NAC and 33?M JNK inhibitor further reduced cell viability in the presence of 200?g/ml DEP under the same condition. While DEP did not show any effect on cell apoptosis in FACS studies, these particles tended to increase p21 mRNA expression. However, because of technical problems, the mRNA expression of p21, p27 and p53 could not be statistically evaluated.These findings suggest that DEP may play a role in the pathogenesis of airway diseases such as asthma and COPD by decreasing airway epithelial cell viability in airways with oedema. However, further studies are needed to investigate the underlying mechanisms.

Benzer Tezler

  1. Dizel egzoz partiküllerinin insan nazal epitelhücrelerinin inflamatuar parametrelerine etkisi

    Effects of dıesel exhaust partıcles on ınflammatory parameters of human nasal epıthelıal cells

    AYŞE BİLGE ÖZTÜRK

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    Allerji ve İmmünolojiGaziantep Üniversitesi

    Göğüs Hastalıkları ve Tüberküloz Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HASAN BAYRAM

  2. Diesel motorlarında is partiküllerinin filtre edilmesi

    Filtration of the carbon particles which come out of the diesel engines

    İBRAHİM UĞUR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1995

    Makine MühendisliğiGazi Üniversitesi

    Makine Eğitimi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ALİ YÜCEL UYAREL

  3. Nano yakıtların dizel motor performans ve egzoz emisyonu üzerine etkilerinin deneysel olarak incelenmesi

    The experimental ivestigation of the efects of nano fuels on diesel engine motor performance and exhaust emissions

    ALİ SONER GÜMÜŞ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    EnerjiOndokuz Mayıs Üniversitesi

    Makine Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. HAKAN ÖZCAN

  4. Otto motorlarında LPG kullanımının motor performansına ve egzoz emisyonlarına etkisinin irdelenmesi

    Analysing the effects of using LPG in otto engines to the performance of the engine and to exhaust emissions

    İSMAİL AKTAY

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2002

    Makine MühendisliğiDumlupınar Üniversitesi

    Makine Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. RAMAZAN KÖSE

  5. Experimental study of NOx conversion efficiency and BSFC for a thermally insulated SCR system

    Termal olarak izole edilmiş bir SCR sisteminin, NOx indirgeme ve özgül yakıt tüketiminin deneysel olarak incelenmesi

    FATİH TABAK

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2010

    Makine Mühendisliğiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Makine Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. METİN ERGENEMAN