Koyun beyni glutatyon redüktazının saflaştırılması ve bazı özelliklerinin incelenmesi
Başlık çevirisi mevcut değil.
- Tez No: 11346
- Danışmanlar: PROF. DR. E. FERHAN TEZCAN
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Beyin, Glütatyon redüktaz, Koyunlar, Brain, Glutathione reductase, Sheep
- Yıl: 1990
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
ÖZET Koyun beyni glutatyon redüktazı amonyum sülfat kesiti (%35-55), ısı denattirasyonu (65°C*da 1 saat), 2', 5'-ADP Sepharose 4B ve Sephadex G 2 00 kromatografilerini içeren bir yöntemle yaklaşık 10 0 00 kez saflaştırıldı. Saflaştırı- lan enzimin spesifik aktivitesi 190 U/mg idi. Koyun beyni GSSGR'si birbirinin aynı olan iki alt- birimden oluşmaktadır. Sephadex G 200 jel filtrasyonu yöntemi ile enzimin molekül ağırlığı 116 000, SDS poliakrilamid jel elektroforezi yöntemi ile de altbirim molekül ağırlığı 64 000 olarak bulundu. Enzim molekül başına iki FAD içermektedir. FAD' sin den ayrılan apoenzimin aktivitesini büyük ölçüde kaybettiği gözlendi. FMN ve riboflavin ile inkübasyon apoenzim aktivitesinde değişikliğe yol açmadı. FAD inkübasyonu ile apoenzime kısmen aktivite kazandırmak mümkün oldu. Enzim FAD ile çok sıkı bağ yapmaktadır. İki ayrı yöntemle FAD için dissosiasyön sabiti 70 ve 13 nM olarak bulundu. Apöenzimdeki FAD bağlanma yerlerinin eşdeğer ve birbirinden bağımsız olduğu gösterildi. FAD bağlanması için aktivasyon enerjisi 14,8 kcal/mol olarak hesaplandı. GSSGR'nin aktivitesini gösterebilmesi için optimum pH=6,8, en uygun sodyum fosfat tamponu konsantrasyonu ise-85- 0,1 M olarak saptandı. Enzim 65 C'de 90 dakikaya kadar aktivitesini korumakta; düşük konsantrasyonlardaki saf enzim dondurulunca inaktive olmaktadır. Koyun beyni GSSGR' sinin substrat olarak tercih ettiği koenzim NADPH'dır. Enzim NADH ile NADPH ile olanın %5'i kadar bir hızla aktivite gösterir. Geri reaksiyon ise fizyolojik şartlarda hemen hemen hiç olmamaktadır. Enzimin reaksiyon mekanizmasının çift substrat inhibisyonlu ping pong bi bi sistemine uyduğu gözlenmiş, çalışılan şartlarda NADPH için Km= 67,1 uM, Ki= 23,5 yM ve GSSG için. Km= 63,9 uM, Ki= 4945 uM olarak saptanmıştır. NADP *nin GSSG'ye göre kesim noktaları lineer nonkompetitif inhibitor olduğu bulunmuş, K_ = 281,5 uM NADP ve os= 0,048 olarak hesaplanmıştır. Enzimin kinetik davranışının dallı reaksiyon mekanizmasına uyduğu düşünülmektedir.
Özet (Çeviri)
Özet çevirisi mevcut değil.
Benzer Tezler
- Koyun beyni psödokolinesterazının saflaştırılması ve bazı özelliklerinin incelenmesi
Başlık çevirisi yok
A.NEŞE ÇOKUĞRAŞ
- Kinetic and equilibrium binding analysis of sheep brain opioid receptors
Koyun beyni opat reseptörlerinin kinetik ve denge hali bağlanma analizleri
HOMA MAHBOOBİ
- Streptococcus pneumoniae suşlarında penisilin direncinin belirlenmesi
Başlık çevirisi yok
DİLEK KILIÇ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1994
Enfeksiyon Hastalıkları ve Klinik MikrobiyolojiAnkara ÜniversitesiPROF.DR. GÜLTEKİN ALTAY
- Yerli sığır, koyun ve keçilerde Hypophysis cerebrinin morfolojik yapısı ve meningeslerle ilişkileri
Başlık çevirisi yok
MEHMET ÇAKIR
