İnsan tümör hücre dizilerinde MDR1/P-170 ve MRP1/P-190 aktivitelerinin incelenmesi
Evaluation of MDR1/P-170 and MRP1/P-190 activities in human tumor cell lines
- Tez No: 99005
- Danışmanlar: DOÇ.DR. DİCLE GÜÇ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Onkoloji, Biochemistry, Oncology
- Anahtar Kelimeler: MDR1/P-170, MRP1/P-190, Rhl23, CFDA, kalsein-AM, MDR1/P-170, MRPl/P-190, Rhl23, CFDA, calcein-AM A *$ j&*
- Yıl: 2000
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
ÖZET Doğan, A.L., İnsan tümör hücre dizilerinde MDR1/P-170 ve MRP1/P-190 aktivitelerinin incelenmesi, Hacettepe Üniversitesi Sağlık Bilimleri Enstitüsü Kanser Biyokimyası Programı BUim Uzmanlığı Tezi. Ankara, 2000. MDR1/P-170 ve/veya MRP1/P-190 aktivitelerinin incelenmesi için Rodamin 123 (Rhl23), kalsein asetoksimetil ester (kalsein-AM) ve karboksifloresan diasetat (CFDA) floresan boyaları kullanılabilir. Bu çalışmada, MRP1/P-190 için en iyi aktivite yöntemini belirlemek ve aynı hücrede MDR1/P-170 ve MRP1/P-190 aktivitelerini birbirinden ayırmak amaçlandı. MDR1/P-170 ve MRP1/P-190 ekspresyon düzeyleri farklı olan 11 hücre dizisi ile çalışıldı. MDR1/P-170 ve MRP/P- 190 ekspresyonlan akım sitometri ile ölçüldü ve MDR1/P-170 için UIC2 MoAb'u ve MRP1/P-190 için MRPm.6 MoAb'u kullanıldı. MDR1/P-170 ve MRP1/P-190 aktiviteleri, MDRl/P-170'in özgül modülatörü olan siklosporin A (CsA) (2uM) ve MRP/P-190'm özgül modülatörleri olan probenesid (2mM) ve MK571 (lOuM) varlığmda ve yokluğunda kalsein-AM, CFDA ve Rhl23 alımı/atılımı kullanılarak akım sitometri ile incelendi. MDR1/P-170 ekspresyonu ile CsA'mn Rhl23 alımına etkisi (p<.0001), Rhl23 atılımına etkisi (p=.002) ve kalsein-AM alımına etkisi (p=.01) arasmda korelasyon saptandı. Bunun yamsıra, MRP1/P-190 ekspresyonu ile MK571'in kalsein-AM alımma etkisi (p=.01) ve probenesidin CFDA alımma etkisi (p=.02) arasmdaki korelasyonlar anlamlı bulundu. Probenesidin kalsein-AM alımma etkisi ile MRP1/P-190 düzeyi arasmdaki ilişki sınırda anlamlı idi (p=.09). Bu sonuçlar, MRP1/P-190 aktivitesini belirlemek için MK571 ile kalsein-AM alımı testi ve probenesid ile CFDA alımı testi kullanılabileceğini ve MDR1/P-170 için de CsA ile hem Rhl23 alımı ve/veya atılımı testi hem de kalsein-AM alımı testinin kullanılabileceğini göstermektedir. CFDA MDR1/P-170 substratı olmayabilir. Kalsein-AM ± CsA ± MK571, MDR1/P-170 ve MRP1/P190 aktivitelerini birlikte incelemek için en uygun testtir.
Özet (Çeviri)
VI ABSTRACT Doğan, A.L., Evaluation of MDR1/P-170 and MRP1/P-190 activities in human tumor cell lines. Hacettepe University Health Sciences Institute MSc Thesis in Cancer Biochemistry, Ankara, 2000. The fluorescent dyes Rhodamine 123 (Rhl23), calcein acetoxymethyl ester (calcein-AM) and carboxyfluorescein diacetate (CFDA) can be used to assess MDR1/P-170 and MRP1/P-190 activities. This study aimed to determine the best functional test for MRP1/P-190 measurement and discriminate between MDR1/P-170 and MRP1/P-190 activities in the same cell. We used 11 cell lines with different levels of MDR1/P-170 and MRPl/P-190 expression. MDR1/P-170 and MRP1/P-190 proteins expression were measured by flow cytometry using UIC2 and MRPm6 MoAbs, respectively. We analysed the activities of MDR1/P-170 and MRP1/P-190 by flow cytometry using calcein-AM, CFDA and Rh 123 uptake/efflux in the presence and absence of specific modulators of MDR1/P-170 [2uM of cyclosporin A, (CsA)] and MRP1/P-190 (2 mM of probenecid and lOuM of MK571). There was a correlation between MDR1/P-170 expression and CsA effect on Rhl23 uptake (p<.0001), on Rhl23 efflux (p=.002) and calcein-AM uptake (p=.01). Besides, the correlations between MRP1/P-190 expression and MK571 effect on calcein-AM uptake (p=.01) and between MRP1/P-190 expression and probenecid effect on CFDA uptake (p=.02) were significant. The correlation between MRP1/P-190 expression and probenecid effect on calcein-AM uptake (p=.09) was marginally significant. These results demonstrate that, calcein-AM uptake with MK571 and CFDA uptake with probenecid may be used to measure MRPl/P-190 activity, and that both Rhl23 uptake and/or efflux test and calcein-AM uptake test with CsA may be used for MDR1/P-170 activity measurement. CFDA may not be a substrate for MDR1/P-170. Calcein-AM ± CsA + MK571 is the sole test to assess the activities of both MDR1/P-170 and MRPl/P-190.
Benzer Tezler
- Taksol'e bağlı olarak oluşan radyoduyarlılığın moleküler mekanizmasının araştırılması
Studies on the molecular mechanisms of Taxol-induced radiosensitization
BELMA KURDOĞLU
Doktora
Türkçe
1998
Onkolojiİstanbul ÜniversitesiTemel Onkoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EMİN DARENDELİLER
- TE 671 hücrelerinde asetilkolin reseptörleri: immünfloresan yöntemle inceleme
Acetylcholine receptors in TE 671 cells: Investigation on immunofluoresan method
BANU ANLAR
- Ceşitli tipte insan tümör dokularındaki nonhiston proteinlerin poliakrilamit gel elektroforezi ile incelenmesi
Başlık çevirisi yok
LALE AFRASYAP
- Renal hücreli karsinomda immünohistokimyasal metallothionein ekspresyonunun prognostik önemi ve tümör derecesi, histolojik tip ve sağkalımla ilişkisi
Immunohistochemical metallothionein expression in renal cell carcinoma: Correlation with tumor grade, histological subtype and patient survival
EMRE TÜZEL
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1999
ÜrolojiDokuz Eylül ÜniversitesiÜroloji Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. M. UĞUR MUNGAN
- İnsan glioblastoma multiforme hücre dizisi (cell line) oluşturulması
Başlık çevirisi yok
ABDURRAHMAN BAKIR