Geri Dön

Ökaryotlarda ağır metal direncinden sorumlu metalotiyonin geninin belirlenmesi

Identification of metalotiyonin gene, responsible from heavy metal resistance, in eucaryotes

  1. Tez No: 86452
  2. Yazar: AYLİN ÖZDEMİR
  3. Danışmanlar: PROF. DR. ENGİN BERMEK
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyofizik, Biophysics
  6. Anahtar Kelimeler: Ağır metaller, Bakır, Metalothionein, Heavy metals, Copper, Metallothionein
  7. Yıl: 1999
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: İstanbul Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyofizik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

ÖZET: Metalotiyoninler (MTler) sisteyince zengin, düşük molekül ağırlıklı ağır metal direncinden sorumlu proteinlerdir. Mayadan memelilere kadar çok çeşitli organizmalarda mevcutturlar. Metalotiyonin proteini ilk olarak 1957 yılında at böbreği korteksinde doğal olarak kadmiyum bağlanmasından sorumlu protein olarak tanımlanmıştır. MTler, ökaryotlarda glukokortikoid hormonuyla, ağır metallerle ve çeşitli büyüme hormonlarıyla indüklenirler. Bu tez çalışmasında, ökaryotik canlılara model sistem olarak tek hücreli ökaryotik bir canlı olan Dunaliella viridis yeşil algi kullanıldı. İlk olarak D.vf/idisTm büyüme koşullan optimize edildi. En iyi büyüme 25 °C sıcaklıkta, ışık atanda çalkalanmak suretiyle sağlandı. Alg hücrelerinden protein özütlenmesinde çeşitli kimyasal ve fiziksel yöntemler denendi ve en verimli parçalamanın hücreleri sıvı azot ile muamele ederek sağlandığı belirlendi. Bunu takiben farklı bakır derişimlerinde yetiştirilen alg hücrelerinde metalotiyoninin mRNA ve protein düzeyinde indüksiyonu incelendi. Farklı bakır derişimlerinde yetiştirilen alglerden izole edilen proteinler SDS-PAGE'de ayrıştırıldıktan sonra Western emdirimi ile indüklenen alg metalotiyonin proteini insan metalotiyonin antikoruyla belirlendi. Bunun yanısıra özütlenen proteinler denature etmeyen PAGE ile aynşunlıp, bakır iyonu ile etkileşerek kahverengi renk verdiği bilinen dietil-ditiyo karbomik asit ile boyandığında bakır bağlayan nativ MT proteinine ait kahverengi bant gözlendi. mRNA düzeyinde belirlemek için yapılan otoradyografide ise radyoaktif işaretli Douglas fir metalotiyonin geninin alg metalotiyonin mRNA'sıyla hibritlendiğini gösteren bulgular elde edildi. 35

Özet (Çeviri)

SUMMARY: Metallothioneins (MTs) are cysteine-rich, low-molecular weight proteins which are responsible for heavy metal resistance in organisms. They appears in very different organisms including yeast to mammals. MT was discovered in horse kidney cortex in 1957, as a cadmium-binding protein responsible for the natural accumulation of cadmium in this tissue. MTs are induced by glucocorticoid hormone, heavy metals and several growth hormones in eucaryotes. In this study; as a model organism, Dunaliella sriridis green alga, a single- celled eucaryotic organism was used. At first, growth conditions of D. viridis was optimised. The most appropriate growth was obtained by continous shaking under light at 25 °C. Different chemical and physical methods were tried to isolate proteins from alga cells. The most efficient lysis was obtained by treating cells with liquid nitrogen. After that, induction of metallothionein at tine level of protein and mRNA was studied in alga cells which were grown at different copper concentrations. Proteins isolated from cells which were grown at different copper concentrations were analyzed by SDS-PAGE. Then, induced MT were detected by using human MT antibody. In addition, isolated proteins were analyzed by non- denature PAGE and treated with diethyldithio-carbamic acid, which gives brown color when binds to copper ion. After treatment, detected brown colored band showed that this band belongs to native MT protein binding copper. Autoradiography results showed that radioactively labelled Douglas fir MT gene hibridized witti alga MT mRNA. 36

Benzer Tezler

  1. Tez No

    27692

    Ökaryot elongasyon faktörü 2(EF-2)'nin farklı dokularda eldesi ve miktarlarının karşılaştırılması

    Başlık çevirisi yok

    ABDULLAH SEVİNÇ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1993

    Tıbbi BiyolojiMarmara Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. BEKİ KAN

  2. Tez No

    93013

    Isolation and characterisation of the mouse homologue of the human SOX20 gene

    İnsan SOX20 geninin faredeki karşılığının izolasyonu ve karakterizasyonu

    ŞAFAK YAYLAOĞLU

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2000

    BiyolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. TÜLİN GÜRAY

  3. Tez No

    68489

    Effect of cell cycle regulatory genes on the utilization of histone H3/H4 promoters in alfalfa and maize protoplasts

    Yonca ve mısır protoplastlarında hücre döngüsü düzenleyici genlerin histon H3/H4 promotörlerinin kullanılması üzerine etkileri

    FAHRİYE SETENCİ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    1997

    Bilim ve TeknolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MERAL YÜCEL

  4. Tez No

    34498

    Schizosaccharomyces pombede 2-deoksitimidin 5-monofosfat mutantlarının izolasyonuna ilişkin çalışmalar

    Başlık çevirisi yok

    F.GONCA TOPOHAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1994

    Biyolojiİstanbul Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. GÜLER ORALER TEMİZKAN

Geri Dön