Preparation of cellulase gene probes for thermophilic fungi by PCR
PCR yöntemi ile termofilik mantar türleri için selülaz gen sondalarının hazırlanması
- Tez No: 82737
- Danışmanlar: DOÇ. DR. ZÜMRÜT B. ÖGEL
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Gıda Mühendisliği, Food Engineering
- Anahtar Kelimeler: Mantarlar, Polimeraz zincirleme reaksiyonu, Selülaz, Fungi, Polymerase chain reaction, Cellulase
- Yıl: 1999
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
oz PCR YÖNTEMİ İLE TERMOFİLİK MANTAR TÜRLERİ İÇİN SELÜLAZ GEN SONDALARININ HAZIRLANMASI ÖZTÜRK, Zahide Neslihan Yüksek Lisans, Gıda Mühendisliği Bölümü Tez Danışmanı: Doç. Dr. Zümrüt B. ÖGEL Yardımcı Tez Danışmanı: Dr. Mehmet BATUM Haziran 1999, 103 sayfa Bu tezin amacı termofılik mantar türleri için PCR yöntemi ile selülaz gen sondalarının hazırlanmasıdır. Bu amaçla, PCR yöntemi ile, termofilik mantar türlerinin selülaz, asıl olarak endoglukanaz genlerim sayıca çoğaltabilecek dejenere primerler dizayn edilmiştir. Dejenere primerlerin dizaynı, mantarların selüloza bağlanan bölgelerinde bulunan iyi korunmuş bölge temel alınarak yapılmıştır. Dizayn sırasında, primerlerin dejeneresini azaltmak için Trichoderma reesei, Humicola insolens ve Trichoderma longibrachiatum endoglukanaz dizilimlerine özel önem verilmiştir. Dizayn edilen dejenere primerler Torula thermophila ve H. insolens'va. hücre DNA'sının, PCR yöntemi ile sayıca çoğaltılmasında kullanılmıştır. T. thermophila hücre DNA'sı uzunlukları 300 ve 100 baz çifti olan iki parça, H. insolens hücre DNA'sı ise uzunluğu 100 baz çifti olan tek parça vermiştir. Bu parçaların özgüllüğü T. reeseVmn, PCR ileçoğaltılmasıyla elde edilmiş radyoaktivite ile işaretlenmiş, 1584 baz çiftlik egB geni kullanılarak heterolog hibridleşme yöntemi ile analiz edilmiştir. Sonuç olarak, T. reeseV nin egl3 geni ile gözlenen benzeşmeye bağlı olarak, dejenere primerlerin hem H. insolens>'m hem de T. thermophild'mn selülaz genleri içindeki bir bölgeyi sayıca çoğaltılmış olmasının kuvvetle muhtemel olduğu belirlenmiştir. Buna bağlı olarak, hem T. thermophild' n\n hem de H. insolens' in hücre DNA'sından dejenere primerler yardımı ile sayıca çoğaltılan gen parçalan termofılik mantarların selülaz genlerinin klonlanmasında kullanılabilecektir. Anahtar kelimeler; Selülaz, Selülaz sondası, PCR, T. thermophila, H. insolens, T. reesei. vı
Özet (Çeviri)
ABSTRACT PREPARATION OF CELLULASE GENE PROBES FOR THERMOPHILIC FUNGI BY PCR ÖZTÜRK, Zahide Neslihan M.S., Department of Food Engineering Supervisor: Assoc. Prof. Dr. Zümrüt B. ÖGEL Co-Supervisor: Dr. Mehmet BATUM June 1999, 103 pages The aim of this thesis was the preparation of cellulase gene probes for thermophilic fungi by PCR. In this respect, degenerate primers were designed which can amplify cellulase, mainly endoglucanase genes of thermophilic fungi by PCR. The design of the degenerate primers was based on the well-conserved re gion found in the cellulose binding domains of fungi. In the design, the endoglu canase sequences of Trichoderma reesei, Humicola insolens and Trichoderma longibrachiatum were given special emphasis to decrease the degeneracy of prim ers. Degenerate primers designed were used in the amplification ofTorula thermo- phila and H. insolens genomic DNA by PCR. T. thermophila genomic DNA re sulted two fragments of lengths 300 and 100 base pairs and H. insolens genomic DNA gave a single band of length 100 base pairs. The specificity of these frag ments were analyzed by heterologous hybridization using radioactively labeled, iiiPCR-amplifıed, 1584 base pairs egB gene of T. reesei. The results strongly sug gest that the degenerate primers have amplified a region within the cellulase genes of T. thermophila as well as H. insolens due to the established homology with the egB gene of T. reesei. Accordingly, the genomic fragments amplified by the de generate primers, from both T. thermophila and H. insolens DNA, can be used as cellulase gene probes for cloning cellulase genes of thermophilic fungi. Key words; Cellulase, Cellulase probe, PCR, T. thermophila, H. insolens, T. reesei. IV
Benzer Tezler
- Thermastabilization of cellulases by cross-linking
Çapraz bağlama ile selülaz ısıl dayanıklılığının arttırılması
JÜLİDE BİLEN
Yüksek Lisans
İngilizce
1997
Gıda MühendisliğiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. UFUK BAKIR
- Ağır metallere karşı seçici olan selüloz matris yapılı iyon değiştirici üretimi
The production of cellulose based ion exchanger selective to heavy metals
MÜMİN DİZMAN
Yüksek Lisans
Türkçe
1997
Kimya Mühendisliğiİstanbul Teknik ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TUNÇER ERCİYES
- Controlled release of 2',7'-dıchlorofluorescein and aldicarb from carboxymethyl cellulose microspheres
Karboksimetil selüloz mikrokürelerden 2',7'-diklorofloresinin ve aldıcarb'ın kontrollu salımı
RAMİN DARVARI
- Uzatılmış etkili preparatlarda selüloz eter matriks sistemleri ile çalışmalar
Başlık çevirisi yok
ASLIGÜL KENDİRCİ
- Seryumla organik fonksiyonel uç gruplu polimerlerin sentezi
Synthesis of polymers with organofunctional end groups by using cerium
NESRİN KÖKEN