Geri Dön

Comparison of enzymatic and non-enzymatic isolation methods for menstrual blood mesenchymal stem cells in maintenance of stemness

Menstrüel kan mezenkimal kök hücrelerde kök hücre olma özelliğinin enzimatik ve enzimatik olmayan izolasyon yöntemleri ile karşılaştırılması

PDF İndir

  1. Tez No: 727329
  2. Yazar: SERRA ŞENER
  3. Danışmanlar: PROF. DR. DİLEK TELCİ, PROF. DR. AHMET CEM BATUKAN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoteknoloji, Biotechnology
  6. Anahtar Kelimeler: Endometriyum, Enzimatik yöntemler, Kök hücreler, Endometrium, Enzymatic methods, Stem cells
  7. Yıl: 2022
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Yeditepe Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Endometrium, rahmin iç kısmında yer alan ve embriyo için zemin sağlayan ince bir epitel tabakadır. Endometrium tabakası her ay gebelik için embriyoya uygun hale gelir, gebelik olmadığı durumlarda adet ile dökülür ve endometriyal tabakayı tekrar gebeliğe hazırlar. Endometriyal tabakada endometriyal mezenkimal kök hücrelerin (eMKH) varlığı, menstrüel kanda (MK-MKH) kök hücre olasılığını beraberinde getirmiştir. MK-MKH'leri tanımlayan çalışmalar, bu hücrelerin mezenkimal kök hücre özellikleri gösterdiğini ve dolayısıyla izolasyon kolaylığı nedeniyle klinik çalışmalarda kullanılma potansiyeline sahip olduğunu belirtmiştir. Literatürde MK-MKH'lerin izolasyonunda farklı yöntemler kullanılmış olmasına rağmen, bu izolasyon yöntemlerinin hiçbiri kök hücre özelliklerini koruma açısından bugüne kadar karşılaştırılmamıştır. Bu bağlamda, bu tezin amacı, enzimatik olmayan, kolajenaz tip 1 ve ikili sindirim yöntemi olmak üzere üç farklı izolasyon yöntemini karşılaştırmak ve menstrüel kandan izole edilen MKHlerin geç pasajlara kadar kök hücre özelliklerini koruma potansiyelini araştırmaktır. İzolasyon yöntemleri karşılaştırıldığında hücre morfolojisinde herhangi bir farklılık gözlenmemiştir. Benzer şekilde, akış sitometrisi ile yüzey belirteçlerinin analizi, kök hücre özelliklerinin erken ve geç pasaj MK-MKH'lerinde korunduğunu ve izolasyon yöntemleri arasında bir fark olmadığını gösterilmiştir. MK-MKH'lerin koloni oluşturma özelliği açısından, üç izolasyon yöntemi arasında erken pasajda en iyi izolasyon yönteminin ikili sindirim izolasyon yöntemi olduğu belirlenmiştir. WST-1 testi kullanılarak hücre büyüme hızı analiz edildiğinde erken pasaj hücrelerinde en iyi izolasyon yönteminin enzimatik olmayan yöntem olduğu görülmüştür. Bununla birlikte, geç pasaj için kaydedilen çoğalma oranındaki azalma, elde edildikleri izolasyon yönteminden bağımsız olarak tüm MK-MKH'lerde belirgin olarak tespit edilmiştir. Sonuç olarak, literatürde ilk kez, MK-MKH'lerin izolasyon yöntemleri kök hücre özellikleri açısından karşılaştırılmış ve sonuçlarımız enzimatik olmayan yaklaşımın en iyi izolasyon yöntemi olarak önermiştir.

Özet (Çeviri)

Endometrium is a thin epithelial layer located on the inside of the uterus and provides the ground for the embryo. Endometrium layer becomes suitable for the embryo every month for pregnancy, sheds with menstruation in cases where there is no pregnancy and prepares the endometrial layer for the pregnancy again. Presence of endometrial mesenchymal stem cells (eMSCs) in the endometrial layer brought about the possibility of stem cells in the menstrual blood (MenSCs). Early studies that identified MenSCs stated that these cells showed mesenchymal stem cell characteristics and hence possessed potential to be used in clinical studies due to their ease in isolation. Although different methods were employed in the isolation of MenSCs in the literature, up to now none of these isolation methods have not been compared in terms of preserving the stem cell properties. In this context, the purpose of this thesis is to compare the three different isolation methods including non-enzymatic, collagenase type 1 and dual digestion method and investigate the potential of MSCs isolated from menstrual blood to maintain their stemness until late passages. No difference in cell morphology was observed when the isolation methods were compared. Similarly, analysis of surface markers by flow cytometry showed that stem cell characteristics were preserved in early and late passage MenSCs and there was no difference between the isolation methods. In terms of colony forming feature for MenSCs, cells isolated with dual digestion method demonstrated an advantage compared to the other protocols at early passage. When cell proliferation rate was analysed using WST-1 assay, it was seen that the best isolation method in early passage cells was the non-enzymatic method. However, the decrease in the proliferation rate recorded for the late passage was evident in all MenSCs regardless of the isolation method they were derived from. As a result, for the first time in the literature, isolation methods of MenSCs were compared in terms of stemness characteristics and our results suggested non-enzymatic approach as the best isolation method.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    364169

    Kordon kökenli mezenkimal kök hücrelerinin hepatosit hücrelerine farklılaştırılmasının optimizasyonu

    Optimisation of the differentiation of cord originated mesenchymal stem cells into hepatocyte cells

    MELİKE ERSÖZ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    BiyokimyaYıldız Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ADİL ALLAHVERDİYEV

  2. Tez No

    898601

    Marmara Denizi'nden izole edilen endemik bacillus türünün yardımıyla kitosan üretimi ve kullanımı

    Production and utilization of chitosan using endemic bacillus sp. isolated from the Marmara sea

    EZGİ AYGEL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    MikrobiyolojiGebze Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ YOSUN MATER

  3. Tez No

    372811

    Yüzeye modifiye edilen aptamer uç gruplarının aptamer-protein etkileşimlerine etkisinin kütle spektrometresi ile incelenmesi

    Investigation of the effects of surface modified aptamer end groups on aptamer-protein interactions by mass spectrometer

    FUNDA YILDIRIM

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    KimyaHacettepe Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. BEKİR SALİH

  4. Tez No

    995033

    Effect of extreme conditions on enzyme profiles:cytochrome P450 systems as a case study

    Ekstrem koşulların enzim profilleri üzerindekietkisi: sitokrom P450 sistemleri

    HANDE MUMCU

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2026

    Biyokimyaİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)

    PROF. DR. NEVİN GÜL KARAGÜLER

  5. Tez No

    307979

    Diabetik ve diabetik olmayan lomber disk hernili olgularda kollajen tip ıx düzeylerinin karşılaştırılması

    Comparison of the type ix collagen levels in the cases with diabetic and non-diabetic lomber disc herniation

    LUTFÜ ARICI

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    NöroşirürjiFırat Üniversitesi

    Beyin ve Sinir Cerrahisi Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. METİN KAPLAN

Geri Dön