Eritropoietik hücre farklılaşması süresince gözlenen membran abnormalitelerinin SDS_PAGE yöntemi kullanılarak belirlenmesi
Determination of the membrane abnormalities occured during the differentation of erythropoietic cell by SDS-Page method
- Tez No: 70572
- Danışmanlar: PROF. DR. HÜSEYİN BAĞCI
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Tıbbi Biyoloji, Medical Biology
- Anahtar Kelimeler: Elektroforez, Eritrositler, Erythropoiesis, Membran proteinleri, Electrophoresis, Erythrocytes, Erythropoiesis, Membrane proteins
- Yıl: 1998
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Akdeniz Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
ÖZET Eritrosit membranının sodyum dodesilsülfat poliakrilamid jel elektroforezi (SDS-PAGE) analizi birbirinden farklı protein tiplerinin varlığını ortaya çıkartmış ve bunların büyük bir çoğunluğu tanımlanmıştır. Bugüne kadar eritrosit deformabilitesi, özellikle bir çok hemoglobinopati tipinde çalışılmıştır. Buna rağmen eritrosit membran proteinlerinin oksidasyonuna bağlı olarak ortaya çıkan membran bozuklukları ve bunların hemoglobinopatilerde gözlenen şiddetli anemi durumu ile olan klinik bağlantıları üzerine az sayıda çalışma yapılmıştır. Eritrosit membran proteinlerinin SDS-PAGE yöntemi ile elektroforetik olarak incelenmesi, bu hastalıkların klinik olarak tanımlanması ve teşhislerinde büyük önem taşımaktadır. Çalışmanın ilk aşamasında hemin ile eritroid farklılaşma için indüklenen K562 hücre hattında, insan eritrolökemia hücre hattı, farklılaşan eritroid hücrelerin membranlarında bulunan proteinlerin tanımlanabilmesi amaçlanmıştır. İkinci aşamada ise; eritroid farklılaşmanın yanı sıra, hücrelerin fenilhidrazin ile muamele edilmesi a globin zincir oksidasyonunu indüklendiği ve ? talasemi majör benzeri eritroid hücrelerin yaratılması amaçlanmış ve a globin zincir birikimi neticesinde ortaya çıkan serbest radikallerin spesifik olarak hangi tip membran proteinlerini etkilediğine bakılmıştır. K562 hücrelerinin hemin ile indüklenmesi sonrasında eritroid farklılaşmanın 2.,3.,4. ve 5. günlerinde fenilhidrazin ile muamele edilerek membran proteinleri izole edilmiştir. Farklıklılaşmanın belirtilen günlerinde fenilhidrazin ile muamele edilmemiş kontrol grubu hücrelerinden de membran proteinleri izole edilmiştir. Bu her iki gruptaki hücrelerin ve farklı günlerdeki hücrelerin membran proteinleri birbirleri ile karşılaştırıldığında bir farklılık gözlenememiştir. Sağlıklı bireylerden almış olduğumuz eritrositlerin fenilhidrazin ile muamele edilmesi sonucunda ise globin zincirinde ve protein 4.9 banımda değişimler gözlenmiştir. Hücre membran proteinlerini incelemek amacı ile kullandığımız SDS-PAGE yönteminin, çeşitli hemoglobinopatilerdeki membran protein anormalliklerini göstererek bu hastalıkların patogenezine ışık tutabilecek bir potansiyele sahip olduğu görüşündeyiz.
Özet (Çeviri)
ÖZET Eritrosit membranının sodyum dodesilsülfat poliakrilamid jel elektroforezi (SDS-PAGE) analizi birbirinden farklı protein tiplerinin varlığını ortaya çıkartmış ve bunların büyük bir çoğunluğu tanımlanmıştır. Bugüne kadar eritrosit deformabilitesi, özellikle bir çok hemoglobinopati tipinde çalışılmıştır. Buna rağmen eritrosit membran proteinlerinin oksidasyonuna bağlı olarak ortaya çıkan membran bozuklukları ve bunların hemoglobinopatilerde gözlenen şiddetli anemi durumu ile olan klinik bağlantıları üzerine az sayıda çalışma yapılmıştır. Eritrosit membran proteinlerinin SDS-PAGE yöntemi ile elektroforetik olarak incelenmesi, bu hastalıkların klinik olarak tanımlanması ve teşhislerinde büyük önem taşımaktadır. Çalışmanın ilk aşamasında hemin ile eritroid farklılaşma için indüklenen K562 hücre hattında, insan eritrolökemia hücre hattı, farklılaşan eritroid hücrelerin membranlarında bulunan proteinlerin tanımlanabilmesi amaçlanmıştır. İkinci aşamada ise; eritroid farklılaşmanın yanı sıra, hücrelerin fenilhidrazin ile muamele edilmesi a globin zincir oksidasyonunu indüklendiği ve ? talasemi majör benzeri eritroid hücrelerin yaratılması amaçlanmış ve a globin zincir birikimi neticesinde ortaya çıkan serbest radikallerin spesifik olarak hangi tip membran proteinlerini etkilediğine bakılmıştır. K562 hücrelerinin hemin ile indüklenmesi sonrasında eritroid farklılaşmanın 2.,3.,4. ve 5. günlerinde fenilhidrazin ile muamele edilerek membran proteinleri izole edilmiştir. Farklıklılaşmanın belirtilen günlerinde fenilhidrazin ile muamele edilmemiş kontrol grubu hücrelerinden de membran proteinleri izole edilmiştir. Bu her iki gruptaki hücrelerin ve farklı günlerdeki hücrelerin membran proteinleri birbirleri ile karşılaştırıldığında bir farklılık gözlenememiştir. Sağlıklı bireylerden almış olduğumuz eritrositlerin fenilhidrazin ile muamele edilmesi sonucunda ise globin zincirinde ve protein 4.9 banımda değişimler gözlenmiştir. Hücre membran proteinlerini incelemek amacı ile kullandığımız SDS-PAGE yönteminin, çeşitli hemoglobinopatilerdeki membran protein anormalliklerini göstererek bu hastalıkların patogenezine ışık tutabilecek bir potansiyele sahip olduğu görüşündeyiz.
Benzer Tezler
- CD34 pozitif kemik iliği hücrelerinden dentritik hücre gelişiminde hepatosit growth faktörün rolü
Effects of hepatocyte growth factor on dentritic cell generation from bone marrow CD34(+) stem cells
ERCÜMENT OVALI
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1998
Endokrinoloji ve Metabolizma HastalıklarıMarmara Üniversitesiİç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TEVFİK AKOĞLU
- Pre ve erken postnatal döneme ait sıçan dalağında kan yapımının (Hematopoiesis) histolojik olarak incelenmesi
Başlık çevirisi yok
ERDOĞAN KOCAMAZ
- Köpeklerde deneysel nefrotoksikozisde eritropoietin ve bazı hematolojik parametreler üzerine araştırmalar
Investigation on erythropoietin level and some blood parameters in experimental nephrotoxicosis in dogs
EBUBEKİR CEYLAN
Doktora
Türkçe
1998
Veteriner HekimliğiYüzüncü Yıl ÜniversitesiVeterinerlik İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ZAHİD TEVFİK AĞAOĞLU
- Anemilerde serum transferrin reseptör düzeyi
Serum transferrin receptor level in anemias
İLHAN ÇAKABAY
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1999
HematolojiÇukurova Üniversitesiİç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. İ. FİKRİ BAŞLAMIŞLI
- Çocuklarda normal, aplastik anemi, akut lösemi kemik iliklerinin ve kemik iliğinden perifere hücre çıkışının“scanning”elektron mikroskobu ile incelenmesi
Başlık çevirisi yok
LEYLA AĞAOĞLU
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1997
Çocuk Sağlığı ve Hastalıklarıİstanbul ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı