Geri Dön

Teofilin ve kafeinin sığır serum ve albuminine bağlanması

Binding of theophylline and caffeine to bovine serum albumin

  1. Tez No: 69703
  2. Yazar: MELTEM ÇETEMEN
  3. Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. H. CANAN BAYAR
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Albüminler, Kafein, Kan proteinleri, Teofilin, Albumins, Caffeine, Blood proteins, Theophylline
  7. Yıl: 1998
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

ÖZET Bu çalışmada kafein, teofilin ve 1,3-dimetilürik asit'in sığır serum albumini (BSA) ile etkileşmeleri, BSA'ya tersinir olarak bağlanan ANS'nin (1-anilino-8- naftalen sülfonat) fluoresansı (Ex: 370 nm, Em: 470 nm) üzerinden incelenmiştir. Non-lineer regresyon analizleri BSA üzerinde ANS için biri yüksek (KaNS1: 0.058 ^M, n^ 0.33) ve diğeri düşük affiniteli (KaNS2: 1.1 nM, n2: 1.79) olmak üzere iki bağlama bölgesi olduğunu göstermiştir. Bulgularımız kafein ve teofilinin BSA ile ANS arasındaki bağlanmayı kompetitif olarak inhibe ettiğini göstermiştir. BSA üzerinde kafein için benzer affiniteli iki bağlama bölgesi (Kkafi: 2.3 ± 0.53 mM ve Kkaf2: 1 -8 ± 0.52 mM) ve teofilin için ise biri yüksek (KTEov 1-1 ± 0.33 mM), diğeri düşük affiniteli (KTEo2: 3.7 ± 0.85 mM) iki bağlama bölgesi olduğu saptanmıştır. Kafein veya teofilin varlığında ve yokluğunda elde edilen n1 ve n2 değerlerinin toplamının 1.9 ± 0.2 olarak bulunması BSA'nın ANS bağlama kapasitesini 2 ANS : 1 BSA olarak belirlemiştir. Ancak ANS bağlanmasıyla ilgili n-ı değerlerinin <1 çıkması, çalışılan pH'da (pH 7) BSA'nın iki farklı izomerik formun karışımı halinde olduğunu düşündürmektedir. Bulgularımız kafein ve teofilin varlığında n-, ve n2 bağlama bölgeleri kapasitelerinin değiştiğini göstermiştir. Bu sonuç kafein ve teofilinin, protein yapısında konformasyonal değişikliğe neden olarak, BSA'nın iki izomerik formu arasındaki dengeyi etkilediğini düşündürmektedir. Çalışmalarımızda elde edilen veriler gerek ANS'nin, gerekse kafein ve teofilinin BSA'nın triptofan yan zincirleriyle etkileştiklerine işaret etmektedir. Buna karşılık, gözlemlerimiz BSA'da teofilin ve kafein için, ANS'ninkinden farklı, tek (büyük olasılıkla ortak) bir bağlama bölgesi olduğu fikrini de desteklemektedir. Sonuç olarak kafein ve teofilin; ANS ile aynı bölgelere ya da farklı tek bir bölgeye bağlanıyor olsunlar, BSA'ya bağlanmak için birbirleri ile yarışmaları söz konusu olabilecektir. iv

Özet (Çeviri)

SUMMARY In this study, the interactions of caffeine, theophylline and 1,3-dimethyluric acid with bovine serum albumin (BSA) was investigated using the fluorescence signal from ANS (1-anilino-8-naphthalene sulfonate) (Ex: 370 nm, Em: 470 nm) which binds to BSA reversibly. Non-linear regression analysis indicated the involvement of one binding site with a high affinity (Kansv 0.058 \xM, ni: 0.33) and a second site with a low affinity (Kans2: 1.1 (J.M, n2: 1.79). Data showed that both caffeine and theophylline inhibit the binding of ANS to BSA competitively. We determined that BSA has two binding sites with similar affinities for caffeine (Kkafi: 2.3 ± 0.53 mM, Kkaf?: 1.8 ± 0.52 mM). Theophylline, on the other hand, has one binding site with a high affinity (Kteoi: 1-1 ± 0.33 mM) and a second site with a low affinity (KTE02: 3.7 + 0.85 mM). The finding that the sum of n., and n2 values which were obtained in the presence or absence of caffeine and theophylline was 1.9 ± 0.2 showed that the binding capacity of BSA for ANS was 2 ANS : 1 BSA. However the finding that ni values associated with ANS binding were <1 suggested that BSA existed as a mixture of two isomeric forms at the pH studied (pH 7). Data showed that the capacities of the n1 and n2 binding sites were altered in the presence of caffeine or theophylline. This finding suggested that caffeine and theophylline could influence the balance between the two isomeric forms of BSA by causing a conformational change in the protein structure. Data obtained in our studies pointed that both ANS and caffeine or theophylline interacted with tryptophan residues in BSA. However, our observation also suggested that BSA has only one (most probably common) binding site for caffeine and theophylline which is distinct from that for ANS. As a result, whether caffeine and theophylline bind to the same sites for ANS or an only site which is distinct from ANS, they can compete with each other for binding to BSA

Benzer Tezler

  1. İzole sıçan diyafragmasında yorgunluk, teofilin ve kafeinin taze ve yorgun kasa etkisi

    Başlık çevirisi yok

    ASUMAN GÖLGELİ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    1992

    FizyolojiErciyes Üniversitesi

    PROF.DR. ÇİĞDEM ÖZESMİ

  2. Sıçan serebellar hücre kültürlerinde kafeinle oluşturulan nörotoksisitede voltaj bağımlı kalsiyum kanal blokeri nimodipinin rolü

    Response to nimodipine in caffeine induced neurotoxicity in cerebellar granular cell culture of rat pups

    SONGÜL TUNA

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1998

    Eczacılık ve FarmakolojiAtatürk Üniversitesi

    Farmakoloji Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. AKÇAHAN GEPTİREMEN

  3. Kafein ve teofilin metabolizmaları arasında etkileşim

    Intraction between the metabolisms of caffeine and theophylline

    CANAN BAYAR

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    1996

    BiyokimyaHacettepe Üniversitesi

    PROF.DR. İNCİ ÖZER

  4. İnsan üreteral düz kaslarda teofilin etkisinin ve konsantrasyonunun incelenmesi

    Examination of response to and concentration of theophylline on the isolate human urethral smooth muscle

    NURSEL SİVRİKAYA

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1995

    Eczacılık ve FarmakolojiKaradeniz Teknik Üniversitesi

    DOÇ.DR. NEJAT GACAR