Yeşil floresan protein ifadeleyen escherichia coli hücre fabrikalarda fenotipik heterojenitenin adaptasyona etkisi
Impact of phenotypic heterogenity in green flouresance protein expressing escherichia coli cell factories on adaptation
- Tez No: 678870
- Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ EVREN DORUK ENGİN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoteknoloji, Mikrobiyoloji, Biotechnology, Microbiology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2021
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ankara Üniversitesi
- Enstitü: Biyoteknoloji Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Gelişen Biyoteknoloji uygulamalarının getirdiği en büyük katkılardan biri heterolog protein üretimidir. Sentetik biyoloji ve genetik mühendisliği sayesinde heterolog protein eldesi için kolay manipüle edilebilen, hızlı, düşük maliyetli ve yüksek verimli mikrobiyal hücre fabrikaları üretimi mümkün hale gelmiştir. Mikrobiyal hücre fabrikalarından elde edilen birçok kimyasal ve bileşen, endüstriyel ve sağlık sektörleri başta olmak üzere birçok alanda rol almaktadır. Hücre fabrikaların oluşturulmasında kullanılmak üzere kurgulanan hücrelerin gürbüz, yüksek biyokütle ve verime sahip olmalarının yanında ürettikleri peptidlerin fonksiyonel ve çözünür nitelikte olmaları büyük önem taşır. İfadelenecek gen her ne kadar rasyonel tasarımlarla hücreye aktarılmış olsa da hücre bankalarının istenilen özelliklerde oluşturulması büyük ölçüde evrimsel süreçler ile mümkün olmaktadır. Bu tez çalışmasında, T7 promotörü kontrolünde yeşil floresan protein üreten ΔrecA ve ΔmutS genotipe sahip E. coli hücre fabrikaları elde edilmiştir. Hücrelerin düşük ve yüksek heterolog rekombinant protein ifade heterojenitesi gösterdikleri fermantasyon koşulları optimize edilmiş ve bu koşullarda pasajlar boyunca indüklenen kültürlerin proteomik ve genomik parmak izi profillemesi yapılmıştır. Böylece, genetik olarak stabil ΔrecA bakteriler ile nokta mutasyonlar geliştirmeye yatkın ΔmutS hücre fabrikalarının adaptasyon hızları karşılaştırılmıştır.
Özet (Çeviri)
Heterologous protein production is one of the biggest contributions that developing biotechnology applications bring. Thanks to synthetic biology and genetic engineering, it becomes possible to produce easy to manipulate, fast, cost effective and high yield protein producing microbial cell factories. The chemicals and products obtaining from microbial cell factories have been used for industrial and health purposes and in other areas. It is incredibly important that the cells that is programmed to be cell factories should be robust with having high biomass and yield, besides being able to produce functional and soluble peptides. Although how well the circuit is designed, creating such microbial cell factories is up to evolutional processes, mostly. In this thesis study, two genetically different Escherichia coli cell factories, one has ΔrecA genotype and other has ΔmutS genotype, that produce green fluorescent protein under T7 promoter were created. The fermentation conditions which made the cells produce high and low recombinant protein expression heterology were optimized and the cells were passaged under these conditions. Then the passaged cultures were analyzed by genomic and proteomic finger printing. Therefore, adaptation rate of genetically stabile ΔrecA cell factories and the ΔmutS cell factories that tend to have point mutation were compared.
Benzer Tezler
- Yeşil floresan protein etiketli rekombinant antimikrobiyal peptid fermantasyon optimizasyonu ve biyoaktivitesinin belirlenmesi
Optimization of the fermentation and determination of the bioactivity of recombinant antimicrobial peptide tagged with green fluorescent protein
GAMZE BALCI
Yüksek Lisans
Türkçe
2025
BiyoteknolojiSağlık Bilimleri ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. AHMET KATI
DR. ESRA AYAN
- İki farklı genin (Güçlendirilmiş yeşil floresan protein geni, insan gamma interferon geni) ayrı ayrı veya birlikte mikroenjeksiyonunun transgenik fare eldesi üzerine etkilerinin araştırılması
Effects of seperate or simultaneous injection of two different genes (Enhanced green-fluorescence protein gene, human gamma interferon gene) on transgenic mice recovery
KORHAN ARSLAN
Doktora
Türkçe
2009
GenetikErciyes ÜniversitesiTıbbi Genetik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HAYDAR BAĞIŞ
PROF. DR. MUNİS DÜNDAR
- Model bı̇r yeşı̇l flöresan proteı̇n ı̇çı̇n aptamer üretı̇mı̇nı̇n ve optı̇k bı̇yosensörlerde uygulanmasının araştırılması
Investigation of aptamer production for a model green fluorescent protein and its application to optic biosensors
DİLBER ECE AKGÜN
Yüksek Lisans
Türkçe
2013
BiyomühendislikHacettepe ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET MUTLU
- Hıyar bitkisinde (Cucumis sativus L.) rejenerasyonun optimizasyonu ve agrobacterium aracılığıyla GFP (yeşil floresan protein) geninin aktarılması
Regeneration optimisation of cucumber (Cucumis sativus L.) and GFP (green fluorescent protein) gene transformation via agrobacterium tumefaciens aler
SİNEM SERBEST KOBANER
Yüksek Lisans
Türkçe
2006
BiyoteknolojiÇukurova ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. YEŞİM YALÇIN MENDİ
- Insan b2-adrenerjık reseptöründe oluşturulan bazı mutasyonların reseptör-yeşil floresan protein füzyonu ile hücre içi dağılımının incelenmesi
Visualing intracellular distribution of wild type and mutant b2-afrenergic receptor by means of green flourescent protein fusion
OLGA ALTUNTAŞ