İnsan protein disülfit izomeraz (hPD) enzim aktivitesinin in vitro mutasyon çalışmaları ile araştırılması
Başlık çevirisi mevcut değil.
- Tez No: 55374
- Danışmanlar: PROF.DR. EROL AKÖZ
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyoloji, Biology
- Anahtar Kelimeler: Enzimler, İn vitro, İzomerazlar, Enzymes, In vitro, Isomerases
- Yıl: 1996
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
IV ÖZET Bu tez çalışmasında hücrede protein katlanımını katalizleyen temel faktörlerden biri olan protein disülfit izomeraz (PDI) enziminin aktivitesi ve aktif merkezi arasındaki bağlantı in vitro mutasyon çalışmaları ile araştırıldı. In vitro mutasyon çalışmaları oligonükleotid ile yönlendirilen nokta mutasyonları şeklinde gerçekleştirildi. Enzimin aktif merkezlerinde (a/a' domeyinleri) bulunan ve diğer tüm oksidoredüktazlarda da mayadan insana kadar korunmuş CXXC motifindeki Histidin amino asiti, yine küçük bir oksidoredüktaz olan tiyoredoksin model alınarak Prolin amino asitine çevrildi. Sonuçda a domeyinin aktivite değeri 0.728 U/ mi, yabanıl tip aktivite değeri 1.424 U/ml olarak ölçüldü. Böylece a domeyinin aktivite değerinin yabanıl tipe oranla %50 düşüş gösterdiği bulundu. Bu değerler mutant a' domeyini için 0.285 U/ml ve yabanıl tip için 1.402 U/ml olarak ölçüldü, a' domeyininin ise yabanıl tipe oranla %80 aktivite düşüşü gösterdiği bulundu. Böylece aktif merkezdeki CXXC motifinde yer alan Histidin amino asitinin enzim aktivitesi üzerinde direkt etkili olduğu saptandı.
Özet (Çeviri)
ABSTRACT In this thesis, relationship between the activity and active site structure of protein disulfide isomerase which is one of the basic factor that catalyses protein folding in the cell was investigated by in vitro mutagenesis studies. For this porpose, in vitro mutagenesis studies was carried out as oligonucleotide directed point mutations. CXXC motif which is found not only in the active sites (a/a' domains) of this enzyme but also in all oxidoreductases is highly conserved in many organisms from yeast to human. Histidine amino acid of this sequence was converted to proline amino acid which is found in thioredoxin that is one of the small oxidoreductase as a model system. Mutant and wild type activities were measured by sRNAase assay. Consequently, mutant a domain and wild type a domain activities were measured and detected as 0.738 U/ml and 1.424 U/ml respectively. This result indicates to a 50 % decrease in a domain activity compared to wild type. On the other hand, a' domain activities of the mutant and wild type were also determined and was found that a' domain activity in this case decreased 80% accordingly to the wild type. As a result, it is a conclusion that histidine amino acid which is found in CXXC motif has a direct effect on the enzyme activity.
Benzer Tezler
- Antimalaryal ilaçların insan alyuvar tiyol redoks potansiyeli üzerine in vitro etkilerinin araştırılması
The Investigation of the in vitro effects of antimalarial drug on thiol redox potential of human erythrocytes
MELTEM MÜFTÜOĞLU
- Trombosit protein ve glikoproteinlerinin poliakrilamid jel elektroforezi yöntemleri ile incelenmesi
The Analysis of platelet protein and glycoproteins by polyarcrylamide gel electrophoresis methods
PARİCHEHR HANACHİ
- Piyasada satılan ticari çocuk mamaları ve ek besinlerin protein kalitelerinin incelenmesi
Başlık çevirisi yok
ESRA ÖZEROĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
1993
Veteriner HekimliğiAnkara ÜniversitesiBesin Hijyeni ve Teknolojisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AHMET YURTYERİ
- Activity of protein kinase C as a function of in-vivo and in-vitro ageing in human skin fibroblast and the role of antioxidants
İn-vivo ve in-vitro yaşlanmanın bir fonksiyonu olarak insan deri fibroblastlarında protein kinaz C aktivitesi ve antioksidanların rolü
HATİCE DUYGU ONAT
Yüksek Lisans
İngilizce
1998
BiyolojiBoğaziçi ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. S. HÜVEYDA BAŞAĞA
- Serim amiloid A proteinin insan dokularındaki ekspressiyonu
Expression of serum amyloid a protein in human tissues
HAKKI TAŞTAN