Geri Dön

Hastane kökenli Pseudomonas aeruginosa suşlarının virülans faktörlerinin quorum sensing yönünden değerlendirilmesi ve epitel hücrelerindeki etkileri

Evaluation of virulence factors of hospital-acquired Pseudomonas aeruginosa strains for quorum sensing and their effects on epithel cells

PDF İndir

  1. Tez No: 495452
  2. Yazar: CEREN YAVUZ
  3. Danışmanlar: PROF. DR. HÜLYA SİVAS, DOÇ. DR. TUBA YILDIRIM
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyoloji, Mikrobiyoloji, Biology, Microbiology
  6. Anahtar Kelimeler: Pseudomonas aeruginosa, Virülans faktörler, hTERT-HPNE, Gerçek zamanlı PZR, Western Blot, Pseudomonas aeruginosa, Virulence factors, hTERT-HPNE, Real Time PCR, Western Blotting
  7. Yıl: 2018
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Anadolu Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) bağışıklık sistemi baskılanmış bireylerde önemli morbidite ve mortalite nedenidir. Sahip olduğu quorum sensing (QS) mekanizması ve virülans faktörleri epitel doku hasarı yaparak sistemik enfeksiyonlara neden olur. Bu çalışmada, seftazidim dirençli klinik izolatların virülans faktörleri QS yönünden değerlendirilerek epitel hücreler üzerindeki etkileri araştırılmıştır. Hastane örneklerinden 100 seftazidim dirençli P. aeruginosa izolatının antibiyotik duyarlılıkları disk difüzyon ve mikrodilüsyon yöntemiyle, virülans faktörleri ise biyofilm, slime faktör, homoserin lakton oluşumu, piyosiyanin, elastaz ve proteaz üretimi bakımından fenotipik testlerle analiz edilmiştir. Virülans faktörlerin düzenlenmesinde yardımcı olan QS genlerinin (intakt ve internal lasI, lasR, rhlI ve rhlR) varlığı PZR yöntemiyle gösterilmiştir. P. aeruginosa'nın virülans faktörlerinden 3-oxo-C12-HSL'nin sitotoksik etkisi MTT ile, Cox-2 ve IL-8'in ifadesi üzerine etkisi gerçek zamanlı PZR ve Western Blot yöntemi ile hTERT-HPNE hücrelerinde araştırılmıştır. İzolatların servislere göre dağılımı incelendiğinde, birinci sırada %38 ile yoğun bakım üniteleri tespit edilmiştir. Hastane servisleri ile antibiyotik dirençliliği arasında anlamlı fark bulunmuştur (p<0,05). İzolatların %76'sında Biyofilm, %57'sinde slime faktör, %51'inde homoserin lakton oluşturduğu, %65'inde piyosiyanin, %66'sında elastaz ve %88'inde proteaz ürettiği ve hareketli olduğu bulunmuştur. QS analizinde; las sistemi için lasI geni %96 intakt, %95 internal ve lasR geni %91 intakt, %95 internal, rhl sistemi için rhlI geni %91 intakt, %90 internal ve rhlR geni %80 intak, %90 internal olarak bulunmuştur. hTERT-HPNE hücrelerinde, N-3-oxododecanoly-L-homoserin lakton'un (3-oxo-C12-HSL) sitotoksik olduğu (IC50 75 μM) belirlenmiştir. 3-oxo-C12-HSL, Cox-2 mRNA seviyesini 2-5 kat, IL-8 mRNA seviyesini 1,5-2 kat arttırmıştır. Cox-2 ve IL-8 protein seviyeleri de artmıştır. Sonuç olarak; bu çalışma klinik izolatların, antibiyotik direnç profilinin ve virülans faktör seviyelerinin yüksek olduğunu ayrıca hTERT-HPNE hücrelerinde proinflamatuvar sitokinlerin seviyesini arttırdığını göstermektedir. Bu çalışma pankreasta P. aeruginosa'nın kolonizasyon oluşturarak inflamasyona neden olabileceğini göstermekte ve bunun önüne geçilebilecek hedef ilaçların geliştirilmesinin önemini vurgulamaktadır.

Özet (Çeviri)

Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) is an important cause of morbidity and mortality in individuals with suppressed immünity system. The quorum sensing (QS) mechanism and virulence factors which it possesses produce epithelial tissue damage, causing systemic infections. In this study, virulence factors of clinic isolates resistant to ceftazidime were evaluated in terms of QS and their effects on epithelial cells were investigated. Antibiotic susceptibility of 100 isolates of Pseusomonas aeruginosa resistant to ceftazidime among hospital samples were analyzed with the disk diffusion and the microdilution method, and their virulence factors were analyzed with phenotypic tests in terms of formation of biofilm, slime factor, homoserin lactone existence, and production of pyocyanin, elastase and protease. The existence of QS genes (intact and internal lasI, lasR, rhlI and rhlR) that involved in the regulation of virulence factors was shown with PCR method. Effects of N-3-oxododecanoly-L-homoserin lakton (3-oxo-C12-HSL) which is one of the virulence factor of P. aeruginosa, on the cytotoxicity and Cox-2 and IL-8 expression were investigated by the MTT, real time PCR and Western Blotting method in hTERT-HPNE cells. Intensive care units were found to be at the first rank with 38%, when the distribution of the isolates was evaluated according to hospital services. A significant difference was found between hospital services and antibiotic resistance (p<0.05). It was found that 76% of isolates formed biofilm, 57% slime factor and 51% homoserin lactone, 65% of isolates produced pyocyanin, 66% elastas, and 88% protease and they were found to be mobile. In QS analysis, lasI gene was found to be 96% intact and 95% internal and lasR gene was found to be 91% intact 95% internal for las system; rhlI gene was found to be 91% intact 90% internal and rhlR gene was found to be 80% intact and 90 % internal for rhl system. 3-oxo-C12-HSL was determined to be cytotoxic on hTERT-HPNE cells (IC50 75 μM). 3-oxo-C12-HSL increased the mRNA level by 2-5 fold and IL-8 mRNA level by 1.5-2 fold. Cox-2 and IL-8 proteins were also increased. Consequently, this study shows that the antibiotic resistance profile and virulence factor levels of clinical isolates were high and also they increase the levels of proinflammatory cytokines in hTERT-HPNE cells. This study shows that P. aeruginosa in the pancreas causes colonization and induces inflammation, and emphasizes the importance of developing targeted drugs to prevent this inflammation.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    700982

    Pseudomonas aeruginosa izolatlarında virulans faktörlerinin fenotipik ve genotipik yöntemlerle araştırılması

    Investigation of virulence factors in Pseudomonas aeruginosa isolates by phenotypic and genotypic methods

    ERHAN ÖZSOY

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Enfeksiyon Hastalıkları ve Klinik MikrobiyolojiTokat Gaziosmanpaşa Üniversitesi

    Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. UMUT SAFİYE ŞAY COŞKUN

  2. Tez No

    339602

    Hastane enfeksiyonu etkeni pseudomonas aeruginosa suşları arasındaki klonal ilişkinin araştırılması

    Investigation of clonal relatedness among the nosocomial pseudomonas aeruginosa isolates

    AYŞE BİLGE SİPAHİ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    MikrobiyolojiGazi Üniversitesi

    Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. KAYHAN ÇAĞLAR

  3. Tez No

    411940

    Dirençli gram negatif basillerin neden olduğu toplum ve hastane kökenli kan akımı enfeksiyonları

    Community-acquired and hospital-acquired antibiotic-resistant gram-negative bacilli bloodstream infections

    TÜRKAN AYDIN TEKE

    Tıpta Yan Dal Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıSağlık Bakanlığı

    Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NACİYE GÖNÜL TANIR

  4. Tez No

    158174

    Bilier sistem enfeksiyonlarında bakteriyolojik çalışma

    Başlık çevirisi yok

    MEHMET ÜNSEL

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2003

    ÜrolojiEge Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. OKTAY TEKEŞİN

  5. Tez No

    293205

    Hastane kaynaklı Pseudomonas aeruginosa Suşlarının SDS- PAGE ve PFGE Yöntemleri ile karakterizasyonu

    Characterization of hospital -acquired Pseudomonas aeruginosa strains with SDS-PAGE and PFGE methods

    TÜLİN GÜVEN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2008

    MikrobiyolojiÇukurova Üniversitesi

    Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. FATİH KÖKSAL

Geri Dön