Geri Dön

Akut promyelositik lösemi hücre hattı (HL-60) ve normal insan lenfosit hücre kültüründe idarubisin sitotoksisitesine karşı bromelainin etkilerinin araştırılması

Investigation of the effects of bromelain versus cytotoxicity of idarubicin to on acute promyelocytic leukemia cell line (HL-60) and normal human lymphocyte cell culture

PDF İndir

  1. Tez No: 489832
  2. Yazar: ABDULLAH TAŞKIN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. MEHMET TARAKÇIOĞLU
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Hematoloji, Biyokimya, Onkoloji, Hematology, Biochemistry, Oncology
  6. Anahtar Kelimeler: Bromelin, Comet tekniği, Hücre dizisi, Hücre kültürü, Lösemi, Sitotoksisite, İdarubisin, Bromelain, Comet assay, Cell line, Cell culture, Leukemia, Cytotoxicity, Idarubicin
  7. Yıl: 2017
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Gaziantep Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

İdarubisin (İDA), akut lösemiler ve birçok kanserin tedavisinde yaygın bir şekilde kullanılan sentetik antrasiklin antikanser bir ilaçtır. İdarubisinin primer sitotoksik etkisi, hücresel membranlardan kolayca geçip, hücre membranı ve organellerde oksidatif hasar oluşturarak, özellikle çoğalan hücrelerde DNA topoizomeraz II enzimini inhibe ederek ve DNA interkalasyonuyla nükleik asit sentezini bozarak ölümcül DNA zincir kırıklarına yol açmasından ileri gelmektedir. Bromelain, (BRO) ananas bitkisinden elde edilen, antiinflamatuvar, antikanser ve immünmodülatör etkileri gibi birçok terapötik özelliklere sahip proteolitik enzimleri içerir. Araştırmalar antikanserojenik maddelerin kemoterapi ajanlarıyla birlikte kullanımının genellikle additif ve sinerjik etkiler oluşturduğunu göstermektedir. Çalışmamızda, HL-60 akut promyelositik lösemi hücre hattı ve insan lenfosit hücre kültüründe idarubisin sitotoksisitesine karşı bromelainin muhtemel etkileri araştırıldı. İDA ve BRO'nun optimal konsantrasyonları kombine edilerek HL-60 hücre hattı ve lenfosit hücre kültüründe 24, 48 ve 72 saat süreyle inkübe edildi. Her bir inkübasyon süresi sonunda İDA-BRO kombinasyonunun HL-60 ve lenfosit hücreleri üzerindeki sitotoksik etkilerini tespit etmek için luminesans ATP hücre canlılık testi, genotoksik etkilerinin tespiti için Comet assay yöntemiyle DNA hasarı, ELISA yöntemiyle kaspaz-3 düzeyi ve akridin orange/ethidium bromid (AO/EB) ve DAPI floresan boyalarıyla morfolojik incelemeler yapılmıştır. Sonuçlar SPSS istatistik analiz programında nonparametrik analiz metodlarıyla değerlendirildi. İDA-BRO kombinasyonlarının sitotoksik etkisi ve DNA hasarı düzeyleri HL-60 hücre hattında, lenfosit hücre kültürüne göre hemen hemen tüm inkübasyon sürelerinde daha yüksek ve istatistiksel olarak anlamlı bulundu (p<0.05). Lenfosit hücre kültüründeki kaspaz-3 düzeyleri, 24 saatlik inkübasyon periyodu sonunda HL-60 hücre hattına göre daha yüksek iken, 48 ve 72 saatlik inkübasyon süreleri sonunda daha düşük bulundu (p<0.05). AO/EB ve DAPI floresan boyama metodlarıyla elde edilen sonuçların hücre canlılığı, DNA hasarı ve kaspaz-3 düzeyleri ile ilişkili olduğu bulundu. Sitotoksik etkili İDA'nın, BRO ile birlikte kombine edildiğinde, tek başına kullanıldığından daha fazla sitotoksik etkiyi, kombinasyonla daha düşük konsantrasyonlarda gerçekleştirdiği tespit edildi. Bulgularımız, bundan sonra yapılacak in vitro ve in vivo çalışmalar için yol gösterici olacak, lösemi tedavisinde yeni yaklaşımların geliştirilmesine, yeni moleküllerin tasarlanması ve bromelain preparatlarının kullanımı için aydınlatıcı olacaktır.

Özet (Çeviri)

Idarubicin (IDA) is a synthetic anthracycline anticancer drug that is widely used in the treatment of acute leukemias and many cancers. The primary cytotoxic effect of the idarubicin is that it leads to lethal DNA chain breaks by diffusing easily from cellular membranes and by causing oxidative damage to cell membranes and organelles, particularly by inhibiting DNA topoisomerase II enzyme in proliferating cells and by disrupting nucleic acid synthesis with DNA intercalation. Bromelain (BRO) includes proteolytic enzymes that have many therapeutic properties such as anti-inflammatory, anticancer and immunomodulatory effects, originating from the pineapple plant. Studies have shown that the use of anticarcinogenic substances with chemotherapeutic agents generally has additive and synergistic effects. In our study, the possible effects of bromelain against idarubicin cytotoxicity in HL-60 acute promyelocytic leukemia cell line and human lymphocyte cell culture were investigated. Optimal concentrations of idarubicin and bromelain were combined and incubated for 24, 48 and 72 hours in HL-60 cell line and lymphocyte cell culture. At the end of each incubation period, luminescent ATP cell viability test, DNA damage by comet assay method for detection of genotoxicity, caspase-3 level by ELISA method and morphological examinations by using acridine orange/ethidium bromide (AO/EB) and DAPI fluorescence staining methods were made in the detection of cytotoxicity of IDA-BRO combination in HL-60 and lymphocyte cells. The results were evaluated by nonparametric analysis methods in SPSS statistical analysis program. The cytotoxic effect of the IDA-BRO combinations on the HL-60 cell line was higher and statistically significant in all incubation times than in the lymphocyte cell culture (p<0.05). The DNA damage level of the combinations in the HL-60 cell line was also higher and statistically significant compared to the lymphocyte cell culture at almost all incubation times (p<0.05). Caspase-3 levels were higher in the lymphocyte cell culture than in the HL-60 cell line at the end of the 24 hour incubation period, but lower at the end of the 48 and 72 hour incubation periods (p<0.05). The results obtained with AO/EB and DAPI fluorescent staining methods were found to be related to cell viability, DNA damage and caspase-3 levels. We found that when combined with BRO, cytotoxic IDA was achieved at lower concentrations with combination more cytotoxic effect than when used alone. Our findings will be a guide for future study in vitro and in vivo, for the development of new approaches in the treatment of leukemia, for the design of new molecules and for the use of bromelain preparations.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    807908

    Bortezomibin HL-60 promyelositik lösemi hücrelerindeki antikanser etkisinin JAK/STAT sinyal yolağı ile ilişkisinin araştırılması

    Investigation of the relationship between the anticancer effect of bortezomib in HL-60 promyelocytic leukemia cells and the JAK/STAT signaling pathway

    ZAHRAA ABDULKAREEM NASHOOR NASHOOR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    BiyolojiAksaray Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. EMİNE ÖKSÜZOĞLU

  2. Tez No

    359638

    All-trans retinoik asit, metotreksat ve aktinomisin D kemoterapilerinin farklı koryokarsinom hücre kültür modelleri üzerindeki etkilerinin karşılaştırılması

    The comparison of the effect of all-trans retinoic acid, methotrexate, actinomycin D and combined chemotherapy on the different choriocarcinoma cell culture models

    GÖRKER SEL

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    Kadın Hastalıkları ve DoğumBülent Ecevit Üniversitesi

    Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MÜGE HARMA

  3. Tez No

    689653

    Akut promyelositik lösemi hücre hattında (HL-60) çoklu ilaç direncininin azaltılmasında manyetik nanopartikül destekli ilaç kullanılması

    Using magnetic nanoparticle supported drug in reducing multiple drug resistance in acute promyelocytic leukemia cell line (HL-60)

    HASAN ULUSAL

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    BiyokimyaGaziantep Üniversitesi

    Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET TARAKÇIOĞLU

  4. Tez No

    123748

    İnsan akut promyelositik lösemi hücre serilerinde (HL 60) allium sativum (sarmısak)'un farklı ekstre ve preparatlarının hücrenin oksidan/antioksidan durumu ile hücre büyümesi üzerine olan etkilerinin incelenmesi

    The effects of different preparations of garlic (allium sativum) on oxidant/antioxidant status and cell growth on human acute promyelocytic leukemia cell line (HL 60)

    YASEMİN GÜLGÜN İŞGÖR

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2002

    BiyokimyaAnkara Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. MESUDE İŞCAN

    PROF.DR. İLKER DURAK

  5. Tez No

    236231

    Deksametazon ve meperidinin HL-60 akut promyelositik lösemi hücre soyunda vinorelbin sitotoksisitesi üzerine etkisi

    The effect of dexamethasone and meperidin on vinorelbine cytotoxicity in HL-60 acute promyelocytic leukemia cell line

    TUNA SEVİLCAN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2009

    Histoloji ve Embriyolojiİstanbul Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AYHAN BİLİR

Geri Dön