İn vitro alzheimer modelinde farklı seskiterpenlerin nöron koruyucu etkilerinin değerlendirilmesi
In vitro evaluation of neuroprotective effects of different sesquiterpenes against alzheimer model
- Tez No: 468098
- Danışmanlar: PROF. DR. HASAN TÜRKEZ
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Nöroloji, Biyoloji, Genetik, Neurology, Biology, Genetics
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2017
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Erzurum Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Alzheimer hastalığı (AH) genel anlamda zihinsel hastalıkların %60'ını kapsamaktadır ve en önemli nörodejeneratif hastalıklardan biridir. Bu çalışmamızda, insan nöroblastom hücre hattı (SH-SY5Y) retinoik asit uygulanarak nöron benzeri hücrelere dönüştürülmüştür. Dönüştürülen hücrelerde Alzheimer ortamını oluşturmak için geniş doz aralıklarında β-amiloid 1-42 proteini (0-200 µM) 24/48 saat uygulanmış ve IC50 değerleri belirlenmiştir. Ardından, dört farklı seskiterpen (farnesen, gayzulen, östrisin, lökomisin) β-amiloid uygulanmış hücre ortamına geniş dozlarda (0-100 µg/ml) uygulanarak oluşturulan toksisiteye karşı nöron koruyucu etkisi incelenmiştir. İn vitro Alzheimer modelinde hücre canlılık oranlarının tespiti için 3- (4,5-dimetil-tiazol-2-il) 2,5-difeniltetrazolyum bromid (MTT) ve laktat dehidrogenaz (LDH) salınım testleri yapılmıştır. Ardından hücrelerde toksisitenin yol açtığı ölüm türünü belirlemek için Annexin-V/PI incelemesi flov sitometri yöntemi kullanılmıştır. Hücrelerde apoptoz ve çekirdek integritisi, Hoechst 33258 floresan boyama metodu kullanılarak mikroskop altında incelenmiştir. Son olarak, seskiterpenlerin asetilkolinesteraz (AChE) aktivitesi, toplam antioksidan kapasite (TAK) ve toplam oksidatif durum (TOD) seviyeleri üzerine olan etkileri belirlenmiştir. Sonuçlara göre, farklı seskiterpen konsantrasyonlarının β-amiloide karşı koruyucu etkisi hücre canlılık testleriyle gösterilmiş ve seskiterpenlerin hücrelerde gerçekleşen nekroz ölümlerinde önemli ölçüde düşüşe neden olduğu flov sitometri sonuçlarıyla belirlenmiştir. Bunun dışında seskiterpen uygulamalarının AchE aktivitesinde ve TOD seviyesinde azalmaya, ve TAK seviyesinde atışa neden olduğu gözlenmiştir. Bulgularımız, anti-alzheimer potansiyellerine göre test edilen seskiterpen etkinliklerinin uygulama dozuna göre gayzulen>östrisin>farnesen>lökomisin şeklinde sıralandığını ortaya koymuştur.
Özet (Çeviri)
Alzheimer's disease (AD) generally covers 60% of mental disorders and is one of the most important neurodegenerative diseases. In our study, the human neuroblastoma cell line (SH-SY5Y) was transformed into neuron-like cells by applying retinoic acid. In the transformed cells, β-amyloid 1-42 protein (0-200 μM) was applied for 24/48 hours at wide dose intervals to establish the Alzheimer's environment and IC50 values were determined. Next, neuroprotective effect against toxicity generated by administration of four different sesquiterpenes (guaiazulene, eustricine, farnesene, leucomicine) in large doses (0-100 μg/ml) to β-amyloid administered cell medium was examined for 24 and 48 hours. 3-(4,5-dimethyl-thiazol-2-yl) 2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) and lactate dehydrogenase (LDH) release tests were performed to determine cell viability rates in the in vitro Alzheimer model. Subsequently, the Annexin-V/PI study flow cytometry method was used to determine the type of death caused by toxicity in the cells. Apoptosis and nucleus integritis in the cells were examined under the microscope using the Hoechst 33258 fluorescence staining method. Furthermore, sesquiterpenes effect on acetylcholinesterase (AChE) activity, Total antioxidant capacity (TAC) and Toplam oxidative status (TOS) levels were determined. According to the results, the protective effect of different sesquiterpenes concentrations against β-amyloid for 24 hours and 48 hours was shown by cell viability tests and the result of flow cytometry revealed that sesquiterpenes cause significant decrease in necrosis deaths in cells. It was further analyzed that the AchE activity, the TOS level and the TAC level decreased after sesquiterpene application. Our findings show that the sesquiterpenoid activities tested against anti-alzheimer potentials are ranked as guaiazulene>eustricine>farnesene>leucomicine for adminstred doses.
Benzer Tezler
- Çeşitli bitkisel ekstraktların terapötik etkilerinin Alzheimer hastalık modelinde in vitro incelenmesi
In vitro investigation in Alzheimer's disease model of therapeutic effects of various herbal extracts
HATİCE FEYZAN AY
Yüksek Lisans
Türkçe
2022
BiyomühendislikYıldız Teknik ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. RABİA ÇAKIR KOÇ
- Piper cubeba'de yer alan fitokimyasalların izolasyonu, karakterizasyonu ve in-vitro Alzheimer modelinde koruyucu etkisinin incelenmesi
Isolation,characterization of phytochemicals in Piper cubeba and investigation of their protective effect in an in-vitro Alzheimer's model
DEMET ÜNVER
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
BiyolojiÜsküdar ÜniversitesiMoleküler Biyoloji Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ SHIRIN TARBIAT
DR. ÖĞR. ÜYESİ SALİH TUNCAY
- Yenidoğan alzheimer transgenik fare modelinde farklı beyin bölgelerinde protein profil değişimlerinin incelenmesi
Investigation of brain region-specific protein profile alterations in newborn transgenic mouse model of alzheimer's disease
AİŞE RUMEYSA MAZI
Yüksek Lisans
Türkçe
2016
Biyolojiİstanbul Medipol ÜniversitesiSinir Bilim Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
YRD. DOÇ. DR. MEHMET OZANSOY
DOÇ. DR. AHMET TARIK BAYKAL
- PC12 nöronal hücre hattında amiloid beta ile oluşturulan Alzheimer modelinde saponinlerin oksidatif makromolekül hasarı üzerine etkisinin incelenmesi
The effects of saponins on oxidative macromolecule damage in Alzheimer model generated by amyloid beta-induced PC12 neuronal cell line
NİDA DEMİRÇAK
Yüksek Lisans
Türkçe
2012
Moleküler TıpDokuz Eylül ÜniversitesiMoleküler Tıp Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. PINAR AKAN
- Sarkozin'in In vitro ve In vivo nöroprotektif etkilerinin değerlendirilmesi
Evaluation of the In vitro and In vivo neuroprotective effects of sarcosine
ARZUGÜL TANAS
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
GenetikErzurum Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HASAN TÜRKEZ