Pankreas adacık hücrelerinin canlılığının korunması için kimyasal yöntemlerin geliştirilmesi
The development of chemical methods to protect the viability of pancreas islet cell
- Tez No: 441902
- Danışmanlar: DOÇ. DR. FATMA ARSLAN
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2016
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Gazi Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Tip 1 şeker hastalığının tedavisinde pankreas adacık hücre nakli, bağışıklık sistemi baskılayıcı ilaçların kullanımı şartı ile başarılı bir tedavi yöntemidir. Uzun süre bağışıklık sistemi baskılayıcı ilaçlarının kullanılmasının ciddi yan etkileri bulunmaktadır. Adacık hücrelerinin, bağışıklık sistemi tarafından tanınmasını ve sitokin saldırısını engellemek, hem bu ilaçların kullanımını ortadan kaldıracak hem de naklin başarısını arttıracak etmenlerdendir. Bu çalışmada, bağışıklık sistemi saldırılarından adacık hücrelerini korumak için adacık hücrelerinin yüzeyi biyouyumlu polimer olan poli-L-Glutamik asit (PLGA) ve türevleri ile modifiye edildi. Sentezlenen bütün polimerlerin yapıları 1H-NMR ve FT-IR ile aydınlatıldı. PLGA‟nın serbest karboksilik asit grubu N-hidroksisüksinimit (NHS) kimyasalı ile aktifleştirildi. Aktifleştirilen PLGA ile adacık hücre yüzeyindeki amin grupları arasında kovalent bağ oluşturuldu ve adacık hücre yüzeyi modifiye edildi. Yüzey modifikasyonu işleminin adacık hücre canlılığı, fonksiyonelliği ve endoplazmik retikulum stresi üzerine olumsuz bir etkisi olmadığı gözlendi. NHS türevi bileşilerinin suda geç çözülme problemini aşmak için N-hidroksisülfosüksinimit (sülfo-NHS) kimyasalı kullanıldı. Sülfo-NHS ile aktifleştirilen PLGA kullanılarak adacık hücrelerinin yüzey modifikasyonu işlemi gerçekleşti. Yüzey modifikasyonu gerçekleşen adacıklar sitokin karışımı içeren besiyeri ile 48 saat kültüre edildi. Adacık hücrelerinin % canlılıkları değerlendirildiğinde PLGA ile yüzeyi modifiye edilen adacık hücrelerinin canlılığının kontrol grubundan % 12 daha fazla olduğu gözlendi (p<0.001). Yüzey modifikasyonu işleminin gerçekleştiğini floresan grubu bağlanarak sentezlenen PLGA ile ispatlandı. Hücre yüzeyindeki tabaka kalınlığını streptavidin-biyotin etkileşimi ile arttırmanın yüzey modifikasyonu işleminde etkinliği biyositin grubu bağlanarak sentezlenen PLGA ile araştırıldı. Bu etkileşimin adacık hücre fonksiyonelliği olan insülin salınımı üzerine olumsuz etkisinin olduğu gözlendi. Çalışmanın in-vivo başarısını değerlendirmek için yüzeyi PLGA-sülfo-NHS ile muamele edilen sıçan adacık hücreleri farelerin böbrek kapsülü altına nakil edildi. Kontrol grubunda 11 günlük in-vivo başarı gözlenirken PLGA grubunda 17 günlük başarı gözlendi.
Özet (Çeviri)
Pancreatic islet cell transplantation is a considerable successful treatment method for the treatment of type 1 diabetes with the usage of immune suppressing drugs. However, there are serious side effects of prolonged use of immune suppressing drugs. To prevent the recognition of islet cells by the immune system and to prevent the cytokines attack are the factors, which will both eliminate the use of these drugs and also increase the success of the transplantation. In this study, the surface of islet cells are modified with poly-L-glutamic acid (PLGA), a biocompatible polymer and its derivatives, to protect the islet cells from the immune system attack. The structure of all synthesized polymers was clarified by 1H-NMR and FT-IR. The free carboxylic acid group of PLGA was activated with N-hydroxysuccinimide (NHS) chemicals. A covalent bond was formed between amine groups on the surface of islet cells and activated PLGA, and the surface of islet cells was modified. Any kind of adverse effect of surface modification processes was not found on the viability of the islet cells functionality or endoplasmic reticulum stress. N-hydroxysulfosuccinimide (sulfo-NHS) chemical was used to overcome the problem of late disintegration of NHS derivatives component in water. The surface modificaiton of islet cells was done by using PLGA activated by Sulfo-NHS. The modificated islets were cultured for 48 hours in medium containing cytokine mixture. By the assesment of the % viability of islet cell viability, it is determined that the viability rates of islet cells with surface modificaiton with PLGA are 12% more than control group (p<0.001). The surface modification process was demonstrated with PLGA synthesized by fluorescence group binding. The operation of increase of layer thickness of cell surface with streptavidin-biotin interaction on surface modification process was studied with PLGA synthesized by connecting biocytin group. Adverse effect of this interaction was found on insulin secretion, which is islet cell functionality. To evaluate the in-vivo success of the study, the rat islet cells, whose surface was treated with PLGA-sulfo-NHS, was transplanted under the kidney capsule of mice. A 11-days success was observed in control group, while it was 17-days for PLGA-group.
Benzer Tezler
- Oral karvakrol uygulamasinin izole siçan pankreas adacik hücrelerinde H2O2 ile oluşturulan hasara karşi etkileri
The effects of oral carvacrol treatment against H2O2 induced on isolated pancreas islet cells in rats
ASLI ŞAN DAĞLI GÜL
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2010
FizyolojiHacettepe ÜniversitesiFizyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ERSİN FADILLIOĞLU
- İn-vitro langerhans adacık hücre canlılığına bazı hücre ve hormon uygulamalarının etkileri
Some of in-vitro cell viability of islet of langerhans cell and hormone effects
MELTEM ATEŞ
Yüksek Lisans
Türkçe
2012
Histoloji ve EmbriyolojiGazi ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. GÜLNUR TAKE KAPLANOĞLU
- Pankreas adacık beta hücrelerinin flow sitometrik ve immünomanyetik izolasyonu
Flow cytmetric and immunomagnetic isolation of pancreatic islet beta cell
BERRİN OĞUZHAN
Doktora
Türkçe
2004
Allerji ve İmmünolojiİstanbul Üniversitesiİmmünoloji Ana Bilim Dalı
PROF.DR. TEMEL YILMAZ
- Yaban arı venomunun pankreas adacık hücre canlılık ve fonksiyonu üzerine etkisinin in vitro değerlendirilmesi
In-vitro evaluation of bee venom effects on viability andfunction of pancreatic islet cells
MÜYESSER SAYKI ARSLAN
Tıpta Yan Dal Uzmanlık
Türkçe
2013
Endokrinoloji ve Metabolizma HastalıklarıSağlık BakanlığıEndokrinoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TUNCAY DELİBAŞI
- Vildagliptin uygulamasının pankreas adacık hücreleri üzerine etkisi
Effect of vildagliptin supplementation on pancreas islet cell
GÜLBAHAR BÖYÜK