Yüksek glukoz uygulanan pc12 hücre hattında timokinonun kaspaz sistemi üzerine etkileri
The effect of thymoquinone on caspase system on high glucose treated pc12 cell line
- Tez No: 434589
- Danışmanlar: PROF. DR. SEMİHA DEDE
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Veteriner Hekimliği, Biochemistry, Veterinary Medicine
- Anahtar Kelimeler: Apoptozis, Glükoz, Hücre dizisi, Hücre kültürü, Kaspazlar, Timokinon, Apoptosis, Glucose, Cell line, Cell culture, Caspases, Thymoquinone
- Yıl: 2016
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Yüzüncü Yıl Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Veterinerlik Biyokimyası Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Bu çalışma, çeşitli şekillerde ve nedenlerle yaygın olarak kullanılan timokinonun, yüksek oranda glukoz eklenen PC12 hücre hattında, kaspaz bağımlı apoptozis üzerine çeşitli dozlarda etkilerinin araştırılması amacıyla planlandı.PC12 hücreleri in vitro koşullarda haftada iki-üç kez düzenli pasajları yapılarak (%5 FBS, %10 host serum, %1 L-Glutamin, %1 penisilin/streptomisin/%0.0125 gentamisin- RPMI 1640, %5CO2 ve %95, 37oC inkübasyon) yetiştirildi. MTT hücre canlılık testleri yapılarak timokinon ve glikoz gruplarının IC50 değeri belirlendi. Hücreler PLL ile kaplı pleytlere, 5x105 hücre olacak şeklide hazırlandı. Glukoz; G1 (150 mM), G2 (250 mM) ve G3 (350 mM), timokinon; TQ (20 µM), TQ2 (40 µM) ve TQ3 (80 µM) dozda deneme grupları ve bu gruplar arasında çaprazlama olarak hazırlandı. Altı saatlik inkübasyonu takiben tripsine edilen hücreler, dondur/çöz yöntemiyle parçalanarak analize hazırlandı. Bu örneklerde; Kaspaz 3, Kaspaz 8, Kaspaz 9 enzimleri, 8 OHdG ve M30 düzeyleri ELISA ile belirlendi. 8-OHdG bakımından, TQ1, TQ2 ve G1, G2 grupları hariç tüm gruplardaki seviyeler kontrolden önemli oranda düşük bulundu (p≤0.001). TQ'nun tüm dozlarının uygulandığı G1 ve G2 gruplarında, 8-OHdG düzeyi azaldı (p≤0.001). Kaspaz 3 ve 9 gruplar arasında açısından önemli bir değişim tespit edilmedi. Kaspaz 8 aktiviteleri TQ1, G3, T1G1, T1G2, T2G1, T2G2, T3G1 ve T3G2 gruplarında, kontrolden önemli oranda yüksek bulundu (p≤0.002). TQ'nun tüm dozlarının G2 gruplarında kaspaz 8 aktivitesini attırdığı görüldü. M30 düzeyleri; T1G1, T3G2 gruplarında kontrolden düşük bulundu (p≤0.002). Sonuç olarak, yüksek oranda glukoz ilave edilen PC12 hücre hattında, TQ uygulamasının kaspaz enzimleri ve proteini ile oksidatif DNA hasarı üzerine etkileri olduğu saptandı.
Özet (Çeviri)
This study was planned to investigate the effects of different doses of thymoquinone (TQ) which widely used various form and reason, on caspase dependent apoptosis and oxidative DNA damage in high glucose added PC12 cell line.PC12 cells were cultured the regular passages (5% FBS, 10% host serum, L-Glutamin 1%, penicillin1%/streptomycin/gentamicin %0.0125-RPMI 1640, 5% CO2 ve 95%, 37oC incubation). MTT cell viability and IC50 value were determined for glucose and TQ. Cells were seed into PLL coated plates. Glucose; G1 (150 mM), G2 (250 mM) and G3 (350 mM), thymoquinone; TQ (20 µM), TQ2 (40 µM) and TQ3 (80 µM) groups and its cross groups were prepared. Cells were used for analysis after 6 hours incubation and cell lysate were obtained by freeze/thaw cycle. In these examples; 8-OHdG, caspase 3, caspase 8, caspase 9 enzymes and M30 were analyzed by ELISA. The 8-OHdG levels decreased in all group compared to control except TQ1, TQ2 and G1, G2 (p≤0.001). In G1 and G2 groups treated with all TQ doses were observed that 8-OHdG levels decreased (p≤0.001). There were no statistically differences between groups for caspase 3 and 9 activities. Caspase 8 activities of TQ1, G3, T1G1, T1G2, T2G1, T2G2, T3G1 and T3G2 groups were higher than control group (p≤0.002). The all doses of TQ caused the increase of caspase 8 activities in G2 group. The low M30 levels were observed in T1G1, T3G2 compared to control group (p≤0.002). As a result, it was observed thatin thehigh dose glucose added PC12 cell line, using TQ have statistically important effect on oxidative DNA damage and caspase enzymes activities and protein.
Benzer Tezler
- Likopenin, yüksek glukoz uygulanan pc12 hücre hattında kaspaz sistemi üzerine etkilerinin araştırılması
Investigation of effects of lycopene on caspase system of high glucose treated pc12 cell line
BÜNYAMİN BAZYEL
Yüksek Lisans
Türkçe
2016
BiyokimyaYüzüncü Yıl ÜniversitesiVeterinerlik Biyokimyası Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SEMİHA DEDE
- Tip 1 diyabetli adölesanlarda yağ ve protein içeriği yüksek öğün için uygulanan farklı insülin rejimlerinin postprandiyal kan glukoz düzeyi üzerine etkisi
The effect of different insulin regimens used for meal of high fat and protein on postprandial blood glucose level in type 1 diabetes adolescents
AYLİN BAYINDIR GÜMÜŞ
Yüksek Lisans
Türkçe
2018
Beslenme ve DiyetetikAnkara ÜniversitesiBeslenme ve Diyetetik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ALEV KESER
- Sitotoksik konsantrasyonda glukoz uygulanan NRK-52E hücre hattında glutatyonun nekrotik ve otofajik yolaklara etkisi
The effect of glutathione on necrotic and autophagic pathways in NRK-52E cell line administered with cytotoxic concentration of glucose.
SADİYE YÜZER
Yüksek Lisans
Türkçe
2022
BiyokimyaVan Yüzüncü Yıl ÜniversitesiVeterinerlik Biyokimyası Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ SEDAT ÇETİN
- Yüksek glukoz uygulanmış böbrek hücre hattında glutatyonun kaspaz sistemi üzerine etkileri
The effect of glutathione on caspase system on high glucose treated renal cell line
GÜLAY YERTÜRK YAYCI
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
BiyokimyaYüzüncü Yıl ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SEMİHA DEDE
- Kapsaisin ve tarçının (cınnamon) yüksek glukoz konsantrasyonlarına maruz bırakılan insan eritlerinde (in vitro) protein glikozilasyonu, Na+ K+ Atpaz, Ca+2 Atpaz ve lipid peroksidasyonu düzeylerine etkisinin araştırılması
Investigation the effect of cinnamon and capsaicin protein glycosylation, Na+ K+ Atpase, Ca+2 Atpase activities and lipid peroxidation levels in human erythrocytes which exposed to high glucose concentration
NURİ GÜLEŞÇİ
Yüksek Lisans
Türkçe
2006
BiyokimyaKahramanmaraş Sütçü İmam ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. NACİYE KURTUL