Geri Dön

Gökkuşağı alabalık solungacından 6- fosfoglukonat dehidrogenaz enziminin saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı metal iyonlarının enzim aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi

Investigatiuons on purification and characterization of 6 - phosphogluconate dehydrogenase from rainbow trout gills and inhibition effects of some metal ions on the enzyme activity

  1. Tez No: 415306
  2. Yazar: ARZU ÖZTÜRK KESEBİR
  3. Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. ALİ ATASEVER
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2015
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Atatürk Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

6-fosfoglukonat dehidrogenaz (6-PGD) (6-PGD; E.C. 1.1.1.44) enzimi Gökkuşağı Alabalığı solungacından saflaştırıldı. Saflaştırma işlemi homojenatın hazırlanması ve 2',5'ADP Sepharose 4B afinite kolon kromatografisi olmak üzere 2 basamakta gerçekleştirildi. 10,268 EÜ/mg spesifik aktivitesine sahip olan 6-PGD enzimi %40 verimle 401 kat saflaştırıldı. Enzim aktivitesi spektrofotometrik olarak 340 nm'de ölçüldü. Enzim için optimum pH değeri pH 8,0, optimum iyonik şiddet değeri 0,4 M, optimum sıcaklık değeri 50°C ve stabil pH değeri pH 8,0 bulunmuştur. NADP+ için KM değeri 0,89 µM ve Vmax değeri 0,331 EÜ/mL olarak; 6-PGA (6-fosfoglukonat) için KM değeri 0,16 mM ve Vmax değeri 1,52 EÜ/mL bulunmuştur. Ayrıca 6-PGD enzimi üzerine bazı metallerin inhibisyon etkileri incelendi ve Ki sabitleri hesaplandı. Metaller ve Ki sabitleri; Ag1 iyonu için 0,082±0,017, Fe3+ için 0,071±0,012, Hg2+ metali 0,0095±0,0007, Cu2+ için 0,028±0,004, Mn2+ 0,25±0,06, Mg2+ için 0,0037±0,00089, Zn2+ için 0,0031±0,0013, Ta1 için 0,023±0,005, Ni2+ için 0,019±0,003 ve Co2+ metal iyonu için 0,015±0,0019 olarak bulundu. En yüksek Ki değeri Fe3+ için 0,71±0,012 mM, en düşük Ki değeri ise 0,0031±0,0013 mM ile Zn2+ için bulunmuştur.

Özet (Çeviri)

The enzyme 6- phosphogluconate dehydrogenase (6-PGD) (6-PGD; E.C. 1.1.1.44) was purified from rainbow trout gills. Purification was performed in 2 steps: homogenate preparation and 2',5' ADP Sepharose 4B affinity chromatography. The enzyme 6-PGD with 10,268 EU/mg specific activity was purified at 401-fold with a yield of 40%. Enzyme activity was measured spectrophotometrically at 340 nm. The optimum pH, optimum ionic intensity, optimum temperature and stable pH for the enzyme were 8,0, 0,4 M, 50°C and 8,0, respectively. KM and Vmax values were determined as 0,89 µM and Vmax 0,331EÜ/mL for NADP+ and as 0,16 mM Vmax and 1,52 EU/mL for 6-PGA, respectively. Also, inhibition effects of some metals on 6-PGA and Ki values were determined. Ki values for the metals were determined as to be: Ag1 0,082±0,017 Hg2+ 0,071±0,012, Fe3+ 0,0095±0,0007, Mn2+ 0,028±0,004, Cu2+ 0,0037±0,00089, Mg2+ 0,25±0,06, Zn2+ 0,023±0,005, Ta1 0,0031±0,0013, Ni2+ 0,015±0,019, Co2+ 0,003±0,0019 respectively.

Benzer Tezler

  1. Gökkuşağı alabalık (Oncorhynchus mykiss, walbaum) larında bazı immunostimulan'ların spesifik olmayan bağışıklık sistemi üzerine etkisi

    The Effect of some immunostimulants to the non-specific immune system of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, walbaum)

    SÜHEYLA DÜĞENCİ KARATAŞ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2001

    Su Ürünleriİstanbul Üniversitesi

    Su Ürünleri Yetiştiriciliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AKIN CANDAN

  2. Gökkuşağı alabalık (Oncorhynchus mykiss) eritrositlerinden karbonik anhidraz enziminin saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı antibiyotiklerin enzim aktivitesi üzerine inhibisyon etkilerinin incelenmesi

    Purification and characterization of carbonic anhydrase from rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) erythrocytes and inhibition effects of some antibiotics on enzyme activity

    OLCAY HİSAR

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2002

    Su ÜrünleriAtatürk Üniversitesi

    Su Ürünleri Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. TELAT YANIK

    PROF.DR. İRFAN KÜFREVİOĞLU

  3. Gökkuşağı alabalık (Oncorhynchus mykiss) filetosunda Listeria monocytogenes`in gelişimi üzerine vakum ve modifiye atmosferde ambalajlamanın etkisi

    The effects of vacuum and modified atmosphere packaging on growth of Listeria monocytogenes in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) fillets

    MEHTAP YILMAZ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2004

    Su ÜrünleriAtatürk Üniversitesi

    Su Ürünleri Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. MAHMUT KOCAMAN

  4. Gökkuşağı alabalık ( oncorhynchus mykiss) dokularından karbonik anhidraz enziminin saflaştırılması, karakterizasyonu ve kinetik özelliklerinin incelenmesi

    Purification and characterization of carbonic anhydrase from rainbow trout (oncorhynchus mykiss) tissues and inhibition effects of some antibiotics on enzyme activity

    HAKAN SÖYÜT

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2006

    KimyaAtatürk Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. ŞÜKRÜ BEYDEMİR

    DOÇ. DR. OLCAY HİSAR

  5. Gökkuşağı alabalık (Oncorhynchus mykiss) karaciğer dokusundan glutatyon redüktaz enziminin saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı metallerin enzim aktivitesi üzerine inhibisyon etkilerinin incelenmesi

    Purification and characterization of glutathione reductase enzyme from rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) liver tissue and investigation of the inhibition effects of some metals on enzyme activity

    BİLGE TEKMAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2007

    BiyokimyaAtatürk Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. HASAN ÖZDEMİR