Geri Dön

Glucose oxidase enzimi substrat, inhibitör ve aktivatörlerine ait kinetik parametrelerin tayini

Başlık çevirisi mevcut değil.

  1. Tez No: 3526
  2. Yazar: TEVFİK ATALAY
  3. Danışmanlar: DOÇ.DR. SALİH YILDIZ
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Aktivatör, Enzimler, Glükoz oksidaz, Kinetik parametreler, İnhibitör, Activator, Enzymes, Glucose oxidase, Kinetic parameters, Inhibitor
  7. Yıl: 1988
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Selçuk Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

ÖZET Bu çalışmada Aspergillus niger'den elde edilen Glukoz Oksidaz enziminin B-D-glukozu enzimatik olarak yükseltgeme reaksiyonu, aerobik ortamda farklı üç indikatör reaksiyondan faydalanarak spektrofotometrik teknik ile incelendi. Çalışmada inhibitörsüz veya aktivatörsüz ve değişik inhibitor ve aktivatler ile denemeler yapıldı; bunlara ait kinetik parametreler hesaplandı. 25°C da, pH'ı 7,0 olan 0,12 M fosfat tamponunda GOD-FOD- boya (o-dianisidin) metoduyla yapılan denemelerde inhibitörsüz veya aktivatörsüz durumda Kg= 2,°0419xl0 M bulundu. Bu metödla Na2S, NaN02, NaNO3 için rekabet edici (kompetitif) inhibisyon tesbit edildi ve inhibisyonun inhibitörlerin konsantrasyonları ile arttığı görüldü; inhibisyon sabiti Kj_, Na2S için 1,2955x10 M ve NaN02 için 6,3250xl0-4 M ve NaNO3 1, 2030x10“ 5 M olarak S-2 - bulundu. ve N-02 asidik ortamda dayanıksız oldukları için, inhibisyon etkileri sadece bu metodla incelenebildi. GOD-POD-boya metoduyla Na3,, Na2SO4 ile yapılan denemelerde esas olmayan aktivasyona uyan sonullar elde edildi ve aktivasyon sabiti KA ; NaN3 için 8,0729xlO-5 M ve Na2S04 için 1, 2069x10-4 M bulundu. 30°C da, pH'ı 6,1 olan 0,84 M fosfat tamponunda I3 fün ölçülmesine dayanan denemelerde inhibitörsüz veya aktivatörsüz durumda Ks - 1,9917x10-4M bulundu. NaNO3'ın inhibitor olarak kullanıldığı durumda kompetitif inhibisyon gözlendi ve inhibis yon sabiti Ki= 1,0674x10-3 M olarak hesaplandı. NaN3 ve Na2SO4 in kullanıldığı denemelerde esas olmayan aktivasyon elde edildi ve aktivasyon sabiti KA ; NaN3 için 8, 0840x10”-5 M ve Na2S04 ıııiçin l,2341x10-4 M bulundu. pH'ı 5,0 olan 0,5 M asetat tamponunda, 30°C da I-, molibdat ve o-tolidin bulunan ortamda yapılan denemelerde inhibitör- KS_ 1,9914*10-4 süz veya aktivat örsüz durumda KS- 1,9914x10 M bulundu. Bu seri denemelerde NaNO, için kompetitif inhibisyon tesbit edildi ve inhibisyon sabiti Ki=1,1733x10 -3 M olarak hesaplandı ; NaN3, NaoSO2, için esas olmayan aktivasyon belirlendi ve aktivasyon sabiti KA, NaN3, için 8,0612x10-5 M ve Na2S04 için l,2371xl0“”4 M bulundu. Çalışmada elde edilen sonuçlara göre I-3 ölçümüne dayanan metodun GOD-POD-boya metodundan daha hassas olduğu tesbit edildi, iv

Özet (Çeviri)

SUMMARY In this study, the enzymic oxidation of /3-D-glucose by Glucose Oxidase (GOD) enzyme obtained from Aspergillus, niger, under aerobic conditions were studied with a spectrophotometry method by the use of three indicator reactions. In the study, various experiments have been carried out without inhibitors and activators, and with different inhibitors and activators, and their kinetic parameters have been calculated. In the experiments carried out by GOD-POD-dye (o-diani- sidine) method at 25°C in 0-,12 M phosphate buffer, pH 7»0, Michaelis-Menten constant Kg was calculated as 2,0419x10 M without inhibitors and activators. It was determined that NapS, NaN02 and NaNO, had competitively inhibited the reaction and it was observed that the inhibition effects have increased with the rising the concentrations of them. The inhibition constant Ki was calculated as 1,2955x10“^ M for NapS, 6,3250x10”M for NaN02 and 1,2030x10 M for NaNO,. The inhibition effect -2 - of S and NOp could only be experimented in this method because these substances are unstable in. an aqueous acidic solution. The results fitted to nonessential activation type were obtained from the experiments carried out with the GOD-POD-dye method for NaN,, NapSO^,. The activation constant KA was calcu lated as 8,0729xl0~5 M for NaN, and l,2069xlO“4 M for Na2S04. At 30°C, 0,84 M fhosphate buffer, pH 6,1, the experiments based on the measurement of I* with the absent of inhibitors or activators, Kg was found as 1,9917x10 M. When NaNO^ was used as inhibitor, competitive inhibition was observed andAIa» (t1 « inhibition constant Ki was calculated as 1,0674x10 ? Mi; In,”the experiments in which NaN, and Na^SO^ were used none s s en--: tial activation was observed and activation constant K^. was found as for KaW^ 8, 0840x10“”5 M and- Na^SO^ 1, 234-lxlO“”4 M. In 0,5 M acetate buffer with pH 5.0, the experiments made under the condition at 30 °C, in which there was I“”, mo- lybdate and o-tolxdine Kg was found as 1,9914x10 M. Compet itive inhibition for NaNO, was found in these series experi ments and the inhibition constant Ki was calculated as -4 1*1733x10 M ; nonessential activation for NaN,, NagSO^ was observed and the activation constant K^ were found as 8,0612xl0“”5 M for NaNj and l,2371xl0~4 M for NapSO^. According to the results obtained from this study, the method based on the measurement of ZZ was proved that it was more sensitive than the GOD-POD-dye method. M VI

Benzer Tezler

  1. Tez No

    75567

    Çörekotu (Nigella sativa l.) lipaz enziminin stabilizasyonuna şekerlerin etkisi

    Başlık çevirisi yok

    AYSUN AKIN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1998

    Kimya Mühendisliğiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Kimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. GÜLDEM ÜSTÜN

  2. Tez No

    34225

    Kan glikoz seviyesinin belirlenmesi için geliştirilen sandviç tipi glikoz oksidaz elektrodu

    Improvement of sandwich type glucose oxidase electrode for the determination of blood glucose lever

    SELMA MUTLU

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    1994

    BiyomühendislikHacettepe Üniversitesi

    Kimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ERHAN PİŞKİN

  3. Tez No

    23438

    Development of a novel enzyme immobilization technique and its application to continous flow membrane reactor

    Yeni bir enzim tutuklama yönteminin geliştirilmesi ve sürekli enzim membran reaktörüne uygulanması

    M.YAKUP ARICA

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    1992

    BiyolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    PROF. DR. VASF N. HASIRCI

  4. Tez No

    105666

    Dolgulu kolon entegre edilmiş enzim elektrot sistemleri ile gıda örneklerinde glukoz, sukroz ve laktoz miktarının saptanması

    Determination of glucose, sucrose and lactose contents of food samples with packed bed columns integrated enzyme electrode systems

    İSMAİL HAKKI BOYACI

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2001

    Gıda MühendisliğiHacettepe Üniversitesi

    Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET MUTLU

  5. Tez No

    49807

    Enzime dayalı elektrokimyasal biyosensörlerin mediyatör kullanarak tasarımı

    Başlık çevirisi yok

    MUSTAFA EMRAH KILINÇ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1996

    Eczacılık ve FarmakolojiEge Üniversitesi

    Analitik Kimya Bilim Dalı

    DOÇ.DR. M. E. ŞENGÜN ÖZSÖZ

Geri Dön