Kuşburnu meyvasından izole edilen polifenol oksidaz enziminin kinetik ve elektroforetik özelliklerinin incelenmesi
Başlık çevirisi mevcut değil.
- Tez No: 35145
- Danışmanlar: DOÇ. DR. Ö. İRFAN KÜFREVİOĞLU
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Enzimler, Kinetik özellikler, Kuşburnu, Polifenol oksidaz, Enzymes, Kinetic properties, Rose hip, Polyphenol oxidase
- Yıl: 1994
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Bu çalışmada, kuşburnu meyvasından polifenol oksidaz enzimi izole edilerek, çeşitli kinetik ve elektroforetik özellikleri incelenmiştir. Bu amaçla, 8 ayrı substrat için Km ve Vmax değerlerini belirlemek üzere optimum şartlar (pH, sıcaklık ve iyonik şiddet) tesbit edildi. Optimum şartlarada 5 farklı substrat konsantrasyonunda aktivite ölçümleri yapıldı. Km değerleri katekol, 4-metil katekol, L-dopa, dopamin, gallik asit, pirogallol, L-tirozin ve p-kresol için sırasıyla 7.41x1 0“3 M, 6.06x1 0”4 M, 2.82x10-3 M, 2.64x10-3 M, 2.79x10“3 M, 8.27x10-4 M ve 8.63x10”5 M; Vmax değerleri ise aynı substratlar için 41.66, 431.96, 45.45, 42.48, 111.11, 111.73, 142.85 ve 40.00 EÜ/ml dak. olarak bulundu. Inhibitor çalışmalarında substrak olarak 4-metilkatekol kullanılarak, sodyum metabisülfit, L-sistein, askorbik asit, glutatyon, tiyoüre, sodyum azotür, sodyum dietilditiyokarbamat, ditiyoeritritol, tannik asit, benzoik asit ve p-merkaptoetanol inhibitörleri ile çalışıldı. Lineweaver-Burk grafikleri yardımıyla bu inhibitörler için Kj sabitleri ve inhibisyon türleri bulundu. Ayrıca I50 değerleri tesbit edildi. Kj sabitleri ve I50 değerlerine göre en etkili inhibitörün sodyum metabisülfit olduğu ve kompetetiv inhibisyon etkisi gösterdiği belirlendi. Enzimin sıcaklık artışına paralel olarak daha kısa sürede denature olduğu sıcaklığın düşürülmesi ile renatüre olduğu gözlendi. Enzim saflaştırıma işlemlerinde, jel filtrasyon kromatografisi ve iyon değişim kromatografisi ile iki pikin elde edilmesi ve tabii elektroforez ile iki bantın gözlenmesi iki izoenziminin varlığını gösterdi.
Özet (Çeviri)
The polyphenol oxidase enzyme was extracted from doge rose fruit and its kinetic and electrophoretic features were investigated in this study. For this purpose, optimum conditions, i.e., pH, temperature and ionic strength, affecting the values of Km and Vmax for eight different substrates were determined. The assay of activites were carried out in the optimum conditions for five different concentrations of the substrate. The values of Km for catechol, 4-methyl catechol, L- dopa, dopanine, gallic acid, pyrogallol, L-tyrosine and p-Cresol are 7.41 x10“3 M, 8.46x10-3 M, 6.06x1 0'4 M, 2.82x1 0”3 M, 2.64x1 0“3 M, 2.97x1 0”3 M, 8.27x1 0-4 M, and 8.63x10-5 M. and Vmax values for the same substrates were found 4.66, 431.96, 45.45, 42.48, 111.11, 111.73, 142.85, and 40.00 EU/ml min. respectively. In inhibitor studies, 4-methyi catechol substrate was employed with sodium metabisulphite, L- cysteine ascorbic acid, glutathione thiourea, sodium azide sodium diethyl-dithiocarbamat, benzoic acid, dithioerythritol, tannic acid and 3- mercaptoethanol inhibitors for the investigation. Kj constants and the types of inhibition of these inhibitors were found by using lineweaver-Burk graphics. In addition, the values of I50 were found. Sodium metabisulfite is found to be the most effective inhibitor and to display competitive inhibition effect on the basis of the Kj constants. It was observed that the enzyme was denaturated as the temperature increased, it was renaturated as the temperature decreased. In the processes of enzyme purification, the presence of two peaks obtained with gel filtration chromatography and ion-exchange chromatography and of two bands observed from nature polyacrylamid gel electrophoresis show that there are two distinct isoenzymes of the enzyme.
Benzer Tezler
- Kuşburnu meyvalarında (Rosacanina) absisik asit (ABA) miktarı ve elde edilen ABA'nın izomerizasyonu üzerine ışığın etkisi
Başlık çevirisi yok
MEHMET GÖNÜLLÜ
Yüksek Lisans
Türkçe
1989
BiyolojiHacettepe ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. HÜSNÜ ÇAKIRLAR
- Samsun'un Havza İlçesi'nde kuşburnunun (Rosa spp.) seleksiyon yoluyla ıslahı üzerine bir araştırma
The Selection breeding of hips (Rosa spp.) grown in Havza country of Samsun
İLKAY YAZGAN
Yüksek Lisans
Türkçe
1997
ZiraatOndokuz Mayıs ÜniversitesiBahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ŞÜKRİYE BİLGENER
- Tokat yöresinde doğal olarak yetişen kuşburnuların (Rosa spp.) seleksiyon yoluyla ıslahı ve çelikte çoğaltılması üzerinde bir araştırma
A research on improvement of rose hips (rosa spp.) by selection and propagation with cuttings, wild growing in tokat province
MEHMET GÜNEŞ
Doktora
Türkçe
1997
ZiraatYüzüncü Yıl ÜniversitesiBahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SEYİT MEHMET ŞEN
- Kuşburnu (Rosa canina L.), Trabzon hurması (Diospyros lotus L.) ve ateş dikeni (Pyracantha coccineae Roemer.) bitkilerinde tohumsuz meyve oluşumu üzerine bazı büyümeyi düzenleyici maddelerin etkisi
Induction of parthenocarpy in dog rose (Rosa canina L.), persimmon (Diospyros lotus L.) and firethorn (Pyracantha cocineae Roemer) by the application of growth substances
FATMA ATALAY
Doktora
Türkçe
1999
BiyolojiKaradeniz Teknik ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ASIM KADIOĞLU
- Kuşburnu (rosa canina L.) ve yeni dünya (eriobotrya japonica) polifenol oksidaz enziminin kinetik özelliklerinin incelenmesi
Başlık çevirisi yok
MÜCAHİT OYNAN