Geri Dön

In vivo effect of Epilobium hirsutum L. and Viscum album L. on protein and mRNA expressions of rat liver vitamin D3 metabolizing CYP24A1 and CYP27B1 enzymes

Epilobium hirsutum L. ve Viscum album L.?nin sıçan karaciğer vitamin D3 metabolizmasında rol alan CYP24A1 ve CYP27B1 enzimlerinin protein ve mRNA ekspresyonu üzerindeki in vivo etkileri

PDF İndir

  1. Tez No: 313761
  2. Yazar: MELİKE SEVER
  3. Danışmanlar: PROF. DR. ALAATTİN ŞEN, PROF. DR. ORHAN ADALI
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2012
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Epilobium hirsutum L. Avrasya'ya özgü, tıbbi bitki olarak kabul edilen ve Türkiye'de tüylü yakı otu olarak bilinen çok yıllık bir bitkidir. Analjezik, anti-mikrobiyal ve antiproliferatif etkilere sahiptir. İçerdiği polifenoller sayesinde çeşitli farmakolojik etkilere sahip olduğu için birçok hastalığın tedavisinde ve önlenmesinde etkili olduğu düşünülmektedir. Viscum album L. ise aynı şekilde alternatif tıpta kullanılan ve Türkiye'de ökse otu olarak bilinen çalı türüdür. Makrofajların fagositik ve sitotoksik etkilerinin genişletilmesinde etkili olduğu gibi bağışıklık sisteminin güçlendirilmesinde de rol almaktadır. Ayrıca, steril ekstraktları kanser tedavisinde kullanılmaktadır. CYP24A1 ve CYP27B1, sitokrom P450 enzimleri arasında yer alıp vitamin D3 metabolizmasında görev yapan en önemli enzimlerdendir. CYP24A1 ve CYP27B1 enzimlerinin ikisi de mitokondriyal enzimler olup birçok organda bulunmaktadırlar. CYP24A1 enzimi vitamin D bileşiklerinin inaktivasyonunda yer alır. 25-OH-D3 ve 1,25-(OH)2D3 moleküllerinin 24-hidroksilasyonunu katalizlediği için 24-hidroksilaz enzimi olarak da bilinir. CYP27B1 ise esas olarak vitamin D aktivasyonunda görev yapar. 25-OH-D3 molekülünün 1?-hidroksilasyonunu katalizlediği için 1?-hidroksilaz enzimi olarak da bilinir. Bu çalışmada Epilobium hirsutum L. ve Viscum album L. (çam ağaçları üzerinde yetişen alt türü-subsp. austriacum (Wiesb.) Vollmann) bitkilerinin sıçan karaciğer CYP24A1 ve CYP27B1 mRNA ve protein ekspresyonları üzerine in vivo etkileri araştırılmıştır. Bunun için, Epilobium hirsutum'un 18.75mg sulu ekstraktı wistar albino sıçanlara 9 gün boyunca intraperitonal olarak enjekte edilmiştir. Viscum album içinse bu miktar 10 mg olarak belirlenmiştir. 11 tane sıçan ise kontrol olarak kullanılmıştır. Daha sonra, sıçanlar dekapite edilerek karaciğerleri çıkarılmış ve S1.5 fraksiyonlar elde edilmiştir. mRNA ekspresyonu tayini, kantitatif gerçek zamanlı PZR kullanılarak, protein ekspresyonu tayini ise ?Western blot? tekniği ile elde edilmiştir.Deneyler sonucunda Epilobium hirsutum L. bitkisinin sulu ekstraktının CYP24A1 protein ekspresyonunu %31 azalttığı gözlemlenmiştir (p<0.0001). Ayrıca, Epilobium hirsutum L., CYP27B1 protein ekspresyonunu %18 azaltmıştır (p<0.05). CYP24A1 mRNA ekspresyonunun karaciğerde saptanması zor olduğu için, bu bitkinin CYP24A1 mRNA ekspresyonu üzerine etkileri deneysel olarak gösterilemezken, Epilobium hirsutum L.'in CYP27B1 mRNA ekspresyonunu kontrollere göre 2.7 kat arttırtığı bulunmuştur (p<0.005). Aynı şekilde Viscum album L. bitkisinin sulu ekstraktı CYP24A1 ve CYP27B1 protein ve mRNA ekspresyonlarını etkilemiştir. Viscum album L. CYP24A1 protein ekspresyonunu %17 azaltmıştır (p<0.05). Ayrıca, Viscum album L.'in CYP27B1 protein ekspresyonunu %18 azalttığı bulunmuştur (p<0.05). CYP24A1 mRNA ekspresyonunun karaciğerde saptanması zor olduğu için, bu bitkinin CYP24A1 mRNA ekspresyonu üzerine etkileri deneysel olarak gösterilemezken, Viscum album L. CYP27B1 mRNA ekspresyonunu kontrollere göre 3.8 kat arttırdığı gözlemlenmiştir (p<0.005). Sonuç olarak, Epilobium hirsutum L. ve Viscum album L. tıbbi bitkilerinin CYP24A1 ve CYP27B1 ekspresyonunu değiştirebilmekte ve dolayısıyla vitamin D3 metabolizmasını etkilemektedir.

Özet (Çeviri)

Epilobium hirsutum L. (Onagraceae) is a flowering, tall and perennial plant and native to Eurasia. It shows analgesic, anti-microbial and anti-proliferative activity, and it is used in our country as an alternative medicine. The pharmacological effect of Epilobium hirsutum L. could be explained by the presence of polyphenolics including steroids, tannins and flavonoids in the aerial parts. Viscum album L. (Loranthaceae) is a shrub that grows as an epiphyte on the branches of deciduous trees. It involves in the enhancement of macrophage phagocytic and cytotoxic mediated abilities as well as the strengthening the immune system. CYP24A1 and CYP27B1 are members of cytochrome P450 superfamily and the most important enzymes involved in the metabolism of vitamin D3. CYP27B1 and CYP24A1 are mitochondrial enzymes and also known as 25-hydroxyvitamin D3 1alpha-hydroxylase and 24-hydroxylase, respectively. CYP24A1 involves in 24-hydroxylation of 25-OH-D3 and 1,25-(OH)2D3 which is required for the catabolism of vitamin D3 compounds while CYP27B1 involves in 1?-hydroxylation of 25-OH-D3 into 1,25-(OH)2D3. In this study, in vivo effects of Epilobium hirsutum and Viscum album (subspecies growing on pine-trees-subsp. austriacum (Wiesb.) Vollmann) on rat liver CYP24A1 and CYP27B1 mRNA and protein expressions were investigated. To achieve this goal, 37.5 mg water extract of Epilobium hirsutum L./kg body weight/day was intraperitoneally injected to male rats for 9 days. To study the effect of Viscum album L., 10 mg water extract of Viscum album L./kg body weight/day was injected with the same conditions. After decapitation, livers were removed and S1.5 fractions were prepared. Effects of Epilobium hirsutum L. and Viscum album L. on rat liver mRNA and protein expressions were analyzed by qRT-PCR and western blotting, respectively. Epilobium hirsutum L. extract caused 31% and 18% decrease in rat liver CYP24A1 (p<0.0001) and CYP27B1 (p<0.05) protein expressions, respectively. The effect of Epilobium hirsutum L. on mRNA expression of CYP24A1 could not be observed, because CYP24A1 mRNA was almost undetectable in liver. Injection of Epilobium hirsutum L. to rats caused 2.7 fold increase in mRNA expression of CYP27B1 with respect to controls and normalized with GAPDH (Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase) expression as an internal reference (p<0.005). Viscum album L. caused 17% decrease in CYP24A1 protein expression (p<0.05). When rats injected with plant extract of Viscum album L., 18% decrease in CYP27B1 protein expression was observed (p<0.05). The effect of Viscum album L. on mRNA expression of CYP24A1 could not be observed since CYP24A1 mRNA was almost undetectable in liver. Injection of Viscum album L. to rats caused 3.8 fold increase in mRNA expression of CYP27B1 with respect to controls and normalized with GAPDH (Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase) expression as an internal reference (p<0.005). In conclusion, vitamin D3 metabolism may be affected by medicinal plants Epilobium hirsutum L. and Viscum album L. due to the changes in mRNA and protein expressions of CYP24A1 and CYP27B1 enzymes.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    313656

    Effect of medicinal plants Epilobium hirsutum L. and Viscum album L. on rat liver flavin-containing monooxygenase activity and expression

    Tıbbi bitkiler Epilobium hirsutum L. ve Viscum album L.'nin sıçan karaciğer mikrozomal flavin monooksijenaz (FMO) aktivitesi ve ekspresyonu üzerine etkileri

    HASAN UFUK ÇELEBİOĞLU

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2012

    BiyokimyaOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. AYŞE MİNE GENÇLER ÖZKAN

    PROF. DR. ORHAN ADALI

  2. Tez No

    416375

    The effects of folk medicinal plants Viscum album L. and Epilobium hirsutum L. on protein and mrna expressions of rat liver bile acid synthesizing CYPs

    Tıbbi bitki Viscum album L. ve Epilobium hirsutum L. 'nin sıçan karaciğer safra asit metabolizmasında rol oynayan CYP enzimlerinin protein ve mrna ekspresyonları üzerindeki etkileri

    TÛBA ÇULCU

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2015

    BiyokimyaOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ORHAN ADALI

    PROF. DR. ALAATTİN ŞEN

  3. Tez No

    151

    Devrelerin büyük işaret cevaplarının bilgisayar yardımıyla bulunması

    Başlık çevirisi yok

    NÜKHET GÜNEYİ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1985

    Elektrik ve Elektronik MühendisliğiUludağ Üniversitesi

    Elektrik-Elektronik Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ERGÜR TÜTÜNCÜOĞLU

  4. Tez No

    101

    Ulaş Sağlık Ocağı merkezinde nüfusun bazı niteliklerine ve konutların durumuna ilişkin bir çalışma

    An Investigation carried out at the Ulaş Public Health Centre concerning some characteristics of the population and housing conditions in the district of Ulaş

    EROL ŞANLI

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    1985

    Halk SağlığıCumhuriyet Üniversitesi

    Halk Sağlığı Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. SERVET ÖZGÜR

  5. Tez No

    201

    Çimentonun sertleşmesi üzerinde kimyasal komponentlerin etkisi

    Başlık çevirisi yok

    NACİYE TÜRKEL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1986

    Kimya MühendisliğiUludağ Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MUSTAFA CEBE

Geri Dön