Geri Dön

Isolation and characterization of the K9 type yeast killer protein

K9 tipi maya toksik proteinin izolasyonu ve karakterizasyonu

  1. Tez No: 143488
  2. Yazar: EDA BENER
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. FATİH İZGÜ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoloji, Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Hansemıla mraHi, maya öldürücü proteinleri, K9 tipi maya öldürücü proteini, Hansenula mrakii, yeast killer proteins, K9 type yeast killer protein
  7. Yıl: 2003
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Öldürücü fenotipe (K4) sahip bazı maya suşları bulundukları ortama“öldürücü proteinler”ya da“öldürücü toksinler”adı verilen polypeptid toxin salgılar. Bu öldürücü proteinlerin bazdan yalnızca bazı maya türlerinin büyümelerini engellemekle kalmaz, ayrıca bazı Gram (+) hastalık yapıcı bakterilerin de büyümelerini engeller. Maya öldürücü proteinlerinin ümit verici antimikrobiyal ajanlar olması nedeniyle, bu çalışmada K9 tipi maya öldürücü proteinini Hansenula mrakii NCYC 500 suşunu kaynak suş olarak kullanarak izole ve karakterize etmeyi amaçladık. Yapılan öldürme alanı testi sonuçlarına göre, K9 tipi öldürücü proteinin optimum üretim şartlarının pH 4.6 ve 26 °C de gerçekleştiği belirlendi. Kültür ortamında salınan proteinler ultrafiltrasyon yöntemiyle konsantre edildi ve amonyum sülfat çöktürmesi yöntemiyle fraksiyonlara ayrıldı. K9 tipi maya toksik proteini, doğal halinde, preparatif tüp jellerden izole edildi ve izole edilen protein öldürücü aktivite gösterdi. İzole edilen K9 tipi maya toksik proteinin 38 kDa büyüklüğünde bir protein olduğu“SDS-PAJE”yöntemiyle bulundu. Bu proteinin izoelektrik noktasının 4.7 ile 4.8 arasında olduğu yüksek voltajlı dikey jel elektrofokuslama yöntemiyle gösterildi Bu proteinin yapısında şeker olmadığı“western blotlama ve glikoanaliz”yöntemiyle bulundu. İzole edilen proteinin termal stabilite ve pH stabilite özellikleri öldürme alanı testi ile araştırıldı. K9 tipi maya toksik proteinin izolasyonunun ve moleküler kütle, izoelektrik nokta ve glikozilasyonu bakımından karakterizasyonunun, bu proteinin endüstriyel amaçlı büyük ölçekte üretimine katkıda bulunması beklenmektedir.

Özet (Çeviri)

Yeast strains with killer phenotype (K4) secrete polypeptide toxins into the medium that are designated as“killer toxins”or“killer proteins”. Some of these killer proteins are inhibitory not only to other yeast species but also Gram (+) pathogenic bacteria. As yeast MBer proteins are promising antimicrobial agents, in tfus study our aim was to purify and characterize K9 type yeast killer protein by using Hansemda mrakii NCYC 500 strain as the source of this protein. The optimum killer protein production conditions were found to be at pH 4.6 and at 26 °C in a killer zone assay. The secreted proteins in the culture medium were concentrated by ultrafiltration and fractioned by ammonium sulfate precipitation method. The K9 type killer protein was isolated in native form from preparative non-denaturing tube gels and it showed the killer activity. The isolated K9 type killer protein was shown to be a 38 kDa protein by SDS- PAGE. The isoelectric point of the protein was found to be between 4.7 and 4.8 by high voltage gel electrofbcusing. The protein was found to be non- gh/cosylated by western blot and gh/codetection analysis. The thermal and pH stability properties of the isolated killer protein were investigated by killer zone assay. The isolation and characterization of K9 type yeast killer protein in terms of its molecular weight, isoelectric point, and gh/cosylation will be of help in large- scale purification of this protein for industrial purposes.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    143154

    Isolation and characterization of the K4 type yeast killer toxin

    K4 tipi öldürücü maya toksininin izolasyonu ve karekterizasyonu

    TOLGA ACUN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2003

    BiyolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. FATİH İZGÜ

  2. Tez No

    129349

    Isolation and characterization of an adhesin protein from the surface of a respiratory pathogen Moraxella catarrhalis

    Moraxella catarrhalis bakterisinin yüzeyinden bir adhesin proteininin izole edilmesi ve karakterizasyonu

    TOLGA TURAN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2002

    Tıbbi Biyolojiİhsan Doğramacı Bilkent Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. KAMRUDDİN AHMED

  3. Tez No

    216339

    Synthesis and characterization of stimuli-responsive bioaffinity sorbents for isolation and recognition of biological molecules

    Biyolojik moleküllerin izolasyonu ve tanınması için uyarı-cevap biyoafinite sorbentlerinin sentezi ve karakterizasyonu

    ATİFET BEGÜM ELMAS

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2007

    KimyaHacettepe Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. SERAP ŞENEL

  4. Tez No

    65419

    Bezelye'den (Pisum sativum) axi 1 (oksin bağımsızlık) geninin izole edilmesi ve karakterizasyonu

    Isolation and characterization of axi 1 (auxin independent) gene from pisum sativum

    YEŞİM YALÇIN MENDİ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    1997

    ZiraatÇukurova Üniversitesi

    Bahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. SELİM ÇETİNER

  5. Tez No

    95433

    Isolation and characterization of rust resistance marker DNAs of wheat

    Buğdayda pas hastalığına karşı direnç markör DNAlarının isolasyonu ve tanımlanması

    SEVGİ SALMAN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2000

    BiyolojiBoğaziçi Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MÜGE TÜRET SAYAR

Geri Dön