Geri Dön

CD40 ligand (CD154) genin ökaryotik ekspresyon vektörüne klonlanması

Cloning of CD40 ligand (CD154) gene into eukaryotic expression vector

  1. Tez No: 138289
  2. Yazar: GÜNEŞ ESENDAĞLI
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. DİCLE GÜÇ, YRD. DOÇ. DR. AYŞEN GÜNEL ÖZCAN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Tıbbi Biyoloji, Medical Biology
  6. Anahtar Kelimeler: CD40 ligand, T-A Klonlama, ökaryotik ekspresyon vektörü, CD40 ligand, T-A cloning, eukaryotic expression vector
  7. Yıl: 2003
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Temel İmmünoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

ÖZET Esendağlı, G., CD40 Ligand (CD154) geninin ökaryotik ekspresyon vektörüne klonlanması, Hacettepe Üniversitesi Sağlık Bilimleri Enstitüsü Temel İmmünoloji Programı Bilim Uzmanlığı Tezi, Ankara, 2003. CD40L kostimülatör molekülü, hem hücresel immünite hem de hümoral immünitede önemli rol oynar. CD40L anahtar molekül olma özelliği ile, immünoterapi ve gen tedavisi yaklaşımlarında sıklıkla yer almaktadır. Bu yaklaşımların ortak moleküler yönü hedef molekülün yüksek titrede ve fonksiyonel olarak eldesinin gerekliliğidir. Bu da ilgili genin uygun bir vektöre klonlanması ile mümkündür. Bu çalışmada fare CD40L geni pTARGETT memeli ekspresyon vektörüne klonlandı. Balb/c fareden izole edilden splenositlerde CD40L gen ekspresyonu uyarıldı. Optimum CD40L gen ekspresyonu 2 saatlik PMA - lonomycin kombine uyarısı ve / veya 2, 5 saatlik PHA - LPS kombine uyarısı sonucunda belirlendi. Yukarda belirtilen zaman aralıklarında splenositlerden total RNA izole edildi ve RT-PCR metodu ile gene spesifik kodlayan dizinin amplifikasyonu sağlandı. PCR ürününün vektöre direkt yerleştirilmesini olanaklı kılan, T-A klonlama yöntemi ile CD40L geninin klonlanması gerçekleştirildi.

Özet (Çeviri)

VI ABSTRACT Esendağlı, G., Cloning of CD40 Ligand (CD154) gene into eukaryotic expression vector, Hacettepe University Health Sciences Institute MSc Thesis in Basic Immunology, Ankara, 2003. CD40L is a co-stimulatory molecule which plays an important role both on cellular and humoral immunity. As a key molecule, CD40L is frequently used in immunotherapy and gene therapy approaches. The necessity of having high titer and functional yield of the target molecule, is the common molecular strategy in these therapies. This is possible by cloning the relevant gene into an appropriate vector. In this study, mouse CD40L gene is cloned into pTARGETT mammalian expression vector. CD40L gene expression is induced in isolated splenocytes from Balb/c mouse. Optimal CD40L gene expression is achieved after 2 hours incubation of PMA - lonomycin combination and / or after 2 or 5 hours incubation of PHA - LPS combination. Following the total RNA extraction from splenocytes at the appropriate time intervals indicated above, specific coding sequence of the gene is amplified by RT-PCR. T-A cloning method that enables the direct cloning of PCR product, is used to clone the CD40L gene.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    59943

    Allerjik ve allerjik olmayan bronş astmasında lenfosit altgrupları ve aktivasyon belirleyicileri

    Lymphocyte subgroups and activation markers in allergic and non-allergic asthma

    BİLUN GEMİCİOĞLU

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    1997

    Allerji ve İmmünolojiİstanbul Üniversitesi

    İmmünoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NURHAYAT YILDIRIM

  2. Tez No

    69110

    İmmünoglobülin A nefropatili hastalarda immün faktörlerin araştırılması

    Investigation of immune factors in IgA nephropathy

    AYLA GÜNLEMEZ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    1998

    Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıAnkara Üniversitesi

    Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MESİHA EKİM

  3. Tez No

    118736

    Atopik dermatitte NK hücrelerinin rolü

    The role of NK cells in atopic dermatitis

    ESİN AKTAŞ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2002

    Allerji ve İmmünolojiİstanbul Üniversitesi

    İmmünoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. GÜNNUR DENİZ

  4. Tez No

    163214

    Metabolik sendrom hastalarında soluble CD40L ve CRP düzeyinin araştırılması

    The investigation of the soluble CD40 ligand and C-reactive protein level in patients with metabolic syndrome

    İLKAY TUĞBA ÜNEK

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2004

    Endokrinoloji ve Metabolizma HastalıklarıDokuz Eylül Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    Y.DOÇ.DR. FIRAT BAYRAKTAR

  5. Tez No

    164156

    Sistemik lupus eritematozusda CD8+CD28-supresör T hücreleri

    CD8+CD28-suppressive, T cells in systemic lupus erythematosus

    AYSIN TULUNAY

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2005

    Allerji ve İmmünolojiMarmara Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. EMEL DEMİRALP

Geri Dön