Lipopolisakkarit ile indüklenen in vitro nöroinflamasyon modelinde sitikolinin mikroglial farklılaşma üzerine etkisinin araştırılması
Investigation of the effect of citicoline on microglial differentiation in a lipopolysaccharide-induced in vitro neuroinflammation model
- Tez No: 1017639
- Danışmanlar: PROF. DR. HATİCE KÜBRA ELÇİOĞLU
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Eczacılık ve Farmakoloji, Pharmacy and Pharmacology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2026
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Marmara Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Farmakoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Farmakoloji Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Amaç: Nöroinflamasyon, merkezi sinir sisteminde enfeksiyon, travma ve nörodejenerasyona yanıt olarak gelişen karmaşık bir immün sistem yanıtıdır. Mikroglial fenotipik polarizasyon, bu yanıtın nörotoksik veya nöroprotektif etkilerini belirleyen önemli mekanizmalardan biridir. Sitikolin, nöroprotektif ve anti-inflamatuar özellikleri bilinen endojen bir bileşiktir. Bu tez çalışmasında, insan mikroglia klonu 3 (HMC3) hücrelerine lipopolisakkarit (LPS) uygulaması yapılarak mikrogliaların inflamatuar fenotipe yönelmesi sağlanmış ve sitikolinin mikroglial fenotip belirteçleri üzerindeki etkilerinin in vitro koşullarda incelenmesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: Çalışmada HMC3 hücreleri kullanılmıştır. Sitikolinin hücre canlılığı üzerindeki etkisi MTT yöntemi ile değerlendirilmiştir. MTT çalışması için 2 farklı deney seti kurulmuştur. Birinci deney setinde hücreler, 50 µM, 100 µM, 500 µM ve 1 mM konsantrasyonlarında sitikolin ile 24 saat boyunca inkübe edilirken ikinci deney setinde ise hücreler, 24 saat LPS ile uyarıldıktan sonra aynı sitikolin konsantrasyonları ile 24 saat inkübe edilmiştir. Western blot analizinde pro-inflamatuar M1-benzeri belirteç olarak TNF-α, anti-inflamatuar M2-benzeri belirteçler olarak ise ARG1 ve CD206 protein ekspresyon düzeyleri değerlendirilmiştir. Bulgular: Tek başına sitikolin ve LPS+Sitikolin uygulamalarında hiçbir konsantrasyonda sitotoksik etki saptanmamıştır. Bu bulgular doğrultusunda, Western blot analizleri için sitikolinin 100 μM konsantrasyonu seçilmiştir. LPS uygulamasının TNF-α ekspresyonunu kontrol grubuna kıyasla anlamlı düzeyde artırmıştır. LPS+Sitikolin uygulamasında da bu ekspresyonun LPS grubuna kıyasla arttığı gözlenmiştir. ARG1 ekspresyonu LPS grubunda kontrol grubuna kıyasla anlamlı düzeyde azalmıştır, LPS+Sitikolin grubunda ise bu azalma daha da belirginleşmiştir. CD206 ekspresyonunda ise gruplar arasında istatistiksel olarak anlamlı bir farklılık saptanmamıştır. Sonuç: LPS ile indüklenen nöroinflamasyon modelinde 100 µM sitikolin uygulamasının mikroglianın M2-benzeri fenotipe polarizasyonunu desteklemediği görülmüştür. Elde edilen bulgular sitikolinin mikroglial fenotip üzerindeki etkilerinin hücre tipi, uygulama konsantrasyonu ve inflamasyon kaynağına göre değişkenlik gösterebileceğine işaret etmektedir. Bu nedenle sitikolinin mikroglial aktivasyon ve polarizasyon üzerindeki etkilerinin farklı konsantrasyonlar ve mikroglial hücre hatları kullanılarak daha detaylı araştırılmasına ihtiyaç duyulmaktadır.
Özet (Çeviri)
Objective: Neuroinflammation is a complex immune response develops in the central nervous system in response to infection, trauma, and neurodegeneration. Microglial phenotypic polarization is one of the key mechanisms that determines whether this response acquires neurotoxic or neuroprotective characteristics. Citicoline is an endogenous compound with known neuroprotective and anti-inflammatory properties. In this thesis study, lipopolysaccharide (LPS) was applied to human microglia clone 3 (HMC3) cells to induce an inflammatory phenotype in microglia, and the effects of citicoline on microglial phenotype markers were aimed to be investigated under in vitro conditions. Material and Method: HMC3 cells were used in the study. The effect of citicoline on cell viability was evaluated by the MTT method. Two different experimental sets were established for the MTT study. In the first experimental set, cells were incubated with citicoline at concentrations of 50 µM, 100 µM, 500 µM, and 1 mM for 24 hours, while in the second experimental set, cells were stimulated with LPS for 24 hours and then incubated with the same citicoline concentrations for 24 hours. In Western blot analysis, TNF-α as a pro-inflammatory M1-like marker, and ARG-1 and CD206 protein expression levels as anti-inflammatory M2-like markers were evaluated. Results: No cytotoxic effect was detected at any concentration following citicoline alone and LPS+Citicoline applications. Based on these findings, the 100 μM citicoline was selected for Western blot analyses. LPS application significantly increased TNF-α expression compared to the control group. In the LPS+Citicoline group, TNF-α expression was further elevated compared to the LPS group. ARG1 expression was significantly decreased in the LPS group compared to the control, and this decrease was further pronounced in the LPS+Citicoline group. No statistically significant difference was detected among the groups in CD206 expression. Conclusion: In the LPS-induced neuroinflammation model, 100 µM citicoline did not support M2-like phenotypic polarization of microglia. The findings obtained indicate that the effects of citicoline on microglial phenotype may vary depending on cell type, application concentration, and source of inflammation. Therefore, the effects of citicoline on microglial activation and polarization need to be investigated in more detail using different application concentrations and other microglial cell lines.
Benzer Tezler
- Magnezyum sülfatın nöroinflamasyon üzerine etkisinin incelenmesi
Investigation of the effects of magnesium sulfate on neuroinflammation
MELTEM ULUTAŞ
Yüksek Lisans
Türkçe
2025
Biyofizikİstinye ÜniversitesiSinir Bilim Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
DR. ÖĞR. ÜYESİ ESMA NUR OKATAN
- Arı ekmeğinin mikroglia hücre hatlarındaki sitotoksik, genotoksik, antigenotoksik ve nöroinflamatuar etkilerinin araştırılması
Investigation of the cytotoxic, genotoxic and neuroinflammatory effects of bee bread on microglia cell lines
FAYSAL YILMAZ
- Farelerde lipopolisakkarit ile indüklenen bozulmuş bellek modelinde mas reseptör agonisti AVE0991'in olası rolünün incelenmesi
Investigation of the possible role of mas receptor agonist AVE0991 in a model of lipopolysacharide-induced impaired memory in mice
DİLŞAT ERÜMİT
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2022
Eczacılık ve FarmakolojiTrakya ÜniversitesiTıbbi Farmakoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ÇETİN HAKAN KARADAĞ
- Yeni sentezlenmiş metiltiyazol türevi bileşiğin lipopolisakkarit (LPS) ile indüklenmiş nöroinflamasyon üzerindeki etkinliğinin in vivo araştırılması
In vivo investigation of the efficacy of newly synthesized methylthiazole derivative compound on lipopolysaccharide (LPS)-induced neuroinflammation
EZGİ KAR
Doktora
Türkçe
2023
BiyokimyaEskişehir Osmangazi ÜniversitesiTıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. İBRAHİM ÖZKAN ALATAŞ
- Evaluation of the effects of green-synthesized gold nanoparticles on LPS-induced in vitro neuroinflammation
Yeşil sentez yöntemi ile sentezlenen altın nanoparçacıklarının LPS ile indüklenen in vitro nöroinflamasyon üzerindeki etkilerinin değerlendirilmesi
SHAHD JEHAD MAHMOUD AL-JAZARA
Yüksek Lisans
İngilizce
2024
BiyomühendislikBahçeşehir ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
Assist. Prof. Dr. CANAN BAĞCI