Tavuk kalbinden süperoksit dismutazın saflaştırılması, karakterizasyonu ve immobilizasyonu
Purification, characterization and immobilization of superoxide dismutase form chicken heart
- Tez No: 99755
- Danışmanlar: PROF. DR. LEMAN TARHAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Kalp, Karakterizasyon, Saflaştırma, Süperoksit dismutaz, Tavuklar, İmmobilizasyon, Heart, Characterization, Purification, Superoxide dismutase, Chickens, Immobilization
- Yıl: 2000
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Dokuz Eylül Üniversitesi
- Enstitü: Eğitim Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Ortaöğretim Fen ve Matematik Alanlar Eğitimi Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
VI ÖZET Tüm aerobik organizmalarda ve bazı aeroblarda, bir metaloenzim olarak bulunan ve süperoksit serbest radikallerinin (02") giderilmesini sağlayan süperoksit dismutaz (SOD, 1.15.1.1), tavuk kalbinden saflaştırıldı, karakterize ve immobilize edildi. SOD'un saflaştırılması, amonyum sülfat ile fraksiyonlama ve hemoglobin'in uzaklaştırılmasının ardından, CM-Selüloz iyon değişim kromatografisi ve Sephadex G- 75 jel kromatografisi ile gerçekleştirildi. Sephadex G-75 jel filtrasyon sonrası enzim, 31000±1000 moleküler ağırlığa sahiptir ve elektroforez ve atomik absorpsiyon spektroskopi sonuçlarına göre Cu ve Zn elementleri içeren eşit büyüklükte iki alt birimden meydana gelmektedir. CuZnSOD enzimi, hem siyanüre hem de hidrojen peroksite hassastır. GDA ile enzimin immobilizasyonu, değişen pH ve +4°C sabit temperaturde enzim ve taşıyıcı oranlarının değişen miktarları için 0.5 mg/ml BSA varlığında ve yokluğunda gerçekleştirildi. %3 GDA/BSA+0.5 mg/ml SOD (SOD-I) ve %3 GDA/0.5 mg/ml SOD (SOD-H) için en iyi aktivite değerleri sırasıyla %27.5 ve %19 olarak bulunmuştur. Doğal ve immobilize SOD-I ve -II için optimum pH değerleri sırasıyla 8.8, 8.3 ve 8.25 dir. Hem doğal hem de immobilize enzim türevlerinin 25°C de 6 saatlik inkübasyon sonrası, pH 6.5-8.5 aralığında stabil kaldığı saptanmıştır. 65°C de doğal ve immobilize SOD-I ve -II için elde edilen aktivite değerleri, sırasıyla %80, %33, %52 dir. Ayrıca, doğal SOD enzimi üzerine iyonik şiddetin inhibitor etkisi incelendi ve sonuç olarak, artan iyonik şiddet ile monovalent iyonlar divalent iyonlara göre daha az inhibitor etki göstermiştir.
Özet (Çeviri)
vn ABSTRACT Superoxide dismutase (SOD, 1.15.1.1) which is a metalloenzyme ubiquitously found in all aerobic organisms and in some aerobes and catalyses the removal of superoxide free radicals (O?) was purified, characterized and immobilized from chicken heart. Purifying of SOD was achieved by ammonium sulfate fractionation and removed Hb, followed by ion exchange chromatography on CM-cellulose and Sephadex G-75 gel chromatography. After gel filtration on Sephadex G-75, the enzyme has a molecular weight 31000+1000 and was composed of two equally sized subunits each having Cu and Zn elements according to electrophoresis and atomic absorption spectroscopy results. The CuZnSOD enzyme was sensitive to either cyanide or hydrogen peroxide. Immobilization of the enzyme with GDA was carried out with varying amounts of enzyme and support ratios both in the presence and absence of 0.5 mg/ml BSA at different pH at a constant temperature of 4°C. The best activity values were obtained for 3% GDA/BSA+0.5 mg/ml SOD, designated I and 3% GDA/0.5 mg/ml SOD, designated II as 27.5% and 19% respectively. Optimum pH values for native enzyme and immobilized SOD -I and -II were 8.8, 8.3 and 8.25 respectively. It was obtained that both native and immobilized enzyme derivatives remained stable at pH 6.5-8.5, at 25°C after 6 h incubation. The retained activity values for native and immobilized SOD-I and -II were 80%, 33%, 52% respectively at 65°C. Also, inhibitor effect of ionic strength on native SOD enzyme was investigated and as a result, monovalent ions were shown less inhibitor effect than divalent ions with increasing ionic strength.
Benzer Tezler
- Tavuk karaciğer gama-glutamil transferazının saflaştırılması ve bazı kinetik özelliklerinin araştırılması
The Purification of the chicken liver a gamma-glutamyl transferase and the research of some kinetic properties
FİLİZ TARCAN
- Tavuk gübresinin pelet hale getirilmesi ve doğal çevre havası yardımıyla kurutulması
Başlık çevirisi yok
A.KAMİL BAYHAN
Yüksek Lisans
Türkçe
1987
ZiraatEge ÜniversitesiTarımsal Mekanizasyon Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ABDÜLKADİR YAĞCIOĞLU
- Samsun bölgesi tavuk kümeslerinde yöresel yapı malzemeleri kullanarak uygun çevre koşullarının sağlanması
Providing optimum environmental conditions for the poultry-houses of Samsun province by utilizing local construction material
TURGUT ÖZTÜRK
- Tavuk ve ördek bacak kaslarının (omurga-bacak) fonksiyon yönünden karşılaştırmalı olarak incelenmesi
Başlık çevirisi yok
AYŞE SERBEST
Doktora
Türkçe
1990
MorfolojiUludağ ÜniversitesiMorfoloji (anatomi) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TURGUT ÖZGÜDEN
- Tavuk (Gallus domesticus) ve bıldırcın (Coturnij coturnij Japonica) derisi üzerinde morfolojik araştırmalar
Morphological studies on the skin of chicken (Gallus domesticus) and quail (Coturnix coturnij Japonica)
NEVİN KURTDEDE