Hipoksi modeli oluşturulmuş ARPE-19 hücrelerinde HIF-1α inhibisyonunun etkilerinin araştırılması
Investigation of the effects of HIF-1α inhibition in hypoxia-induced ARPE-19 cells
- Tez No: 985967
- Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ MEHMET ARGUN
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: Göz Hastalıkları, Eye Diseases
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2026
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Süleyman Demirel Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Göz Hastalıkları Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Retina, insan vücudunda oksijen tüketim oranı en yüksek dokulardan biridir. Yaşa bağlı makula dejenerasyonu (YBMD), diyabetik retinopati (DRP) ve retinal ven tıkanıklıkları (RVO) gibi hastalıklarda doku perfüzyonunun bozulmasına bağlı olarak retinal hipoksi gelişmektedir. Hipoksik koşullar, Hipoksi ile İndüklenebilir Faktör-1 alfa (HIF-1α) aktivasyonunu arttırmaktadır. HIF-1α aktivasyonu ile ilgili sinyal yolaklarının uyarılması, damar geçirgenliğinde artış ve anjiyogenezin yanı sıra oksidatif stres, lipid peroksidasyonu, inflamasyon ve apoptozis gibi patolojik süreçlerin ortaya çıkmasına katkıda bulunarak retinal hücre bütünlüğünün bozulmasına ve hastalık progresyonunun hızlanmasına neden olmaktadır. Bu çalışmada, CoCl2 ile ARPE-19 hücrelerinde oluşturulan kimyasal hipoksi modelinde SYP-5 ile oluşturulan HIF-1α inhibisyonunun oksidatif stres, anjiyogenez, inflamasyon ve apoptozis üzerindeki etkilerinin in vitro ortamda değerlendirilmesi amaçlanmıştır. ARPE-19 hücrelerinde Kontrol, CoCl2, DMSO, DMSO+CoCl2, DMSO+SYP-5, DMSO+CoCl2+SYP-5 grupları olmak üzere 6 grup oluşturuldu. Tüm gruplarda inkübasyon eşzamanlı olarak başlatıldı. İlgili gruplara CoCl2 uygulandı ve gruplar 24 saat inkübe edildi. Daha sonra ilgili gruplara SYP-5 ve DMSO eklenerek 24 saat daha inkübe edildi ve tüm grupların 48 saat inkübasyonu tamamlandı. Gruplar arasında MDA ve GSH seviyelerindeki değişimler spektrofotometrik yöntemle belirlenirken mitokondriyal ROS, sitozolik ROS, TNF-α, NF-κB, VEGF-A, ANG, HIF-1α ve apoptozis seviyelerindeki değişimler mikroplaka okuyucu kullanılarak ölçüldü. Çalışmamızda DMSO+CoCl2+SYP-5 grubunda CoCl2 ve DMSO+CoCl2 gruplarına göre mitokondriyal ROS, sitozolik ROS, MDA, TNF-α, NF-κB, VEGF-A, ANG, HIF-1α ve apoptozis düzeylerinde istatiksel olarak anlamlı seviyede azalma izlendi. GSH düzeyinde ise gruplar arasında istatiksel anlamlı bir fark izlenmedi. Sonuçlarımız, hipoksi modeli oluşturulmuş ARPE-19 hücrelerinde SYP-5'in inflamasyon, oksidatif stres, anjiyogenezle ilişkili hücresel yanıtları ve apoptozisi belirgin şekilde azalttığını göstermiştir. Bu bulgular, SYP-5 ile oluşturulan HIF-1α inhibisyonunun hipoksiye bağlı hücresel hasarı modüle edebileceğini ve çoklu patolojik süreçleri hedefleyebilen bir yaklaşım olarak değerlendirilebileceğini ortaya koymaktadır.
Özet (Çeviri)
The retina is one of the tissues with the highest oxygen consumption rates in the human body. In diseases such as age-related macular degeneration (AMD), diabetic retinopathy (DRP), and retinal vein occlusions (RVO), retinal hypoxia develops as a result of impaired tissue perfusion. Hypoxic conditions increase the activation of hypoxia-inducible factor-1 alpha (HIF-1α). Activation of HIF-1α–associated signaling pathways contributes to the development of various pathological processes, including increased vascular permeability and angiogenesis, as well as oxidative stress, lipid peroxidation, inflammation, and apoptosis, ultimately leading to disruption of retinal cellular integrity and acceleration of disease progression. In this study, it was aimed to evaluate in vitro the effects of HIF-1α inhibition induced by SYP-5 on oxidative stress, angiogenesis, inflammation, and apoptosis in a chemical hypoxia model established in ARPE-19 cells using CoCl2. Six experimental groups were established in ARPE-19 cells: Control, CoCl2, DMSO, DMSO+CoCl2, DMSO+SYP-5, and DMSO+CoCl2+ SYP-5. Incubation was initiated simultaneously in all groups. CoCl2 was applied to the relevant groups, and the cells were incubated for 24 hours. Subsequently, SYP-5 and DMSO were added to the appropriate groups, followed by an additional 24-hour incubation, completing a total incubation period of 48 hours for all groups. Changes in MDA and GSH levels were determined using spectrophotometric methods, while alterations in mitochondrial ROS, cytosolic ROS, TNF-α, NF-κB, VEGF-A, ANG, HIF-1α, and apoptosis levels were measured using a microplate reader. In our study, the group treated with DMSO+CoCl2+SYP-5 demonstrated a statistically significant reduction in mitochondrial ROS, cytosolic ROS, MDA, TNF-α, NF-κB, VEGF-A, ANG, HIF-1α, and apoptosis levels compared with the CoCl2 and DMSO+CoCl2 groups. No statistically significant difference was observed in GSH levels among the groups. Our results demonstrated that SYP-5 markedly reduced inflammation, oxidative stress, angiogenesis-related cellular responses, and apoptosis in hypoxia-modeled ARPE-19 cells. These findings indicate that HIF-1α inhibition mediated by SYP-5 may modulate hypoxia-induced cellular damage and could be considered a therapeutic approach capable of targeting multiple pathological processes.
Benzer Tezler
- In vitro yaşa bağlı makula dejenerasyonu modelinde bevacizumab ve miRNa-184'ün anjiyogenez yolağında etkinliğinin karşılaştırılması ve AnjiyomiRNA-155'in biyomarker özelliğinin araştırılması
Comparison of the effectiveness of bevacizumab and miRNa-184 in the angiogenesis pathway of the in vitro age related macula degeneration model and the investigation of the biomarker feature of AngiomiRNA-155
MERVE ŞAMBEL AYKUTLU
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2020
Tıbbi BiyolojiTrakya ÜniversitesiGöz Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HANDE GÜÇLÜ
- Dejeneratif retinal gen tedavi çalışmaları için yeni deney hayvan modelinin oluşturulması
Establishment of A new animal model for gene therapy studies of retinal degenerative diseases
ELİF ÖZGECAN ŞAHİN
Yüksek Lisans
Türkçe
2020
Tıbbi BiyolojiAkdeniz ÜniversitesiTıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SALİH ŞANLIOĞLU
- Hipoksi-reoksijerasyon modeli ile barsak hasarı oluşturulmuş yenidoğan sıçanlarda omeprazol ve gentamisin'in etkileri
Başlık çevirisi yok
ÜNAL BIÇAKÇI
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2004
Çocuk CerrahisiOndokuz Mayıs ÜniversitesiÇocuk Cerrahisi Ana Bilim Dalı
PROF.DR. ENDER ARITÜRK
- Deneysel olarak nekrotizan enterokolit oluşturulmuş yenidoğan sıçanlarda hiperbarik oksijen tedavisinin etkinliğinin değerlendirilmesi
Effect to hyperbaric oxygen therapy in an experimental newborn rat model of necrotizing enterocolitis
DOĞAN ŞİMŞEK
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2007
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıGataÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF.DR. İSMAİL GÖÇMEN
- Kontrol (normotansif) ve kronik devamlı hipobarik hipoksiyle hipertansiyon oluşturulan tavşanlarda kardiyovasküler parametreler üzerine akut aralıklı hipoksinin etkisi.
The effects of acute intermittent hypoxia on cardiovascular parameters in normotensive and chronic hypobaric hypoxia-induced hypertensive rabbits.
MUHİTTİN ONUR YAMAN