Farklı aktif madde içeren ağız gargaralarının antimikrobiyal etkinliği ve insan gingival fibroblast hücresi üzerindeki sitotoksik ve apoptotik etkilerinin karşılaştırılması
Comparison of the antimicrobial efficacy and the cytotoxic and apoptotic effects on human gingival fibroblast cells of mouthwashes containing different active ingredients
- Tez No: 965531
- Danışmanlar: PROF. DR. ARİFE KAPTAN
- Tez Türü: Diş Hekimliği Uzmanlık
- Konular: Diş Hekimliği, Dentistry
- Anahtar Kelimeler: Antimikrobiyal etki, Hücre canlılığı, Antimicrobial effect, Cell survival
- Yıl: 2025
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Sivas Cumhuriyet Üniversitesi
- Enstitü: Diş Hekimliği Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Çocuk Diş Hekimliği Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Bu çalışmada, çocuklarda kullanımı önerilen ve ticari olarak elde edilebilen çeşitli aktif maddeler içeren yedi farklı ağız gargarasının (BenriDent, Listerine Total Care, Splat White Plus, Dkdent, Klorhex, Oral-B, Colgate Plax) antimikrobiyal etkileri (Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius, Aggregatibacter actinomycetemcomitans ve Candida albicans ) ve insan gingival fibroblast hücresi (İGFH) üzerindeki apoptotik ve sitotoksik etkileri ile oksidatif DNA hasar düzeylerinin in vitro olarak değerlendirilmesi amaçlandı. İGFH'ler kültür ortamında belli bir yoğunluğa ulaştıktan sonra, 96 kuyucuklu plakalara ekildi. İGFH'ler üzerindeki sitotoksik etkiyi değerlendirmek amacıyla 2,3-Bis(2-Methoxy-4-Nitro-5-Sulfophenyl)-2H-Tetrazolium-5-Carboxanilide (XTT) ve laktat dehidrogenaz (LDH) testleri uygulandı. Apoptotik etkilerin tespiti için Annexin V testi ile birlikte Hoechst boyama işlemleri gerçekleştirildi. Oksidatif DNA hasar düzeylerinin tespiti için ise 8-hidroksi-2'-deoksiguanozin (8-OHdG) düzeyleri ELISA yöntemiyle analiz edildi. Antimikrobiyal aktivitenin değerlendirilmesinde mikrodilüsyon yöntemi kullanıldı. Hücrelerin beş farklı gargara konsantrasyonunda ( %10, %25, %50, %75, %100) dört farklı inkübasyon (1 dakika, 30 dakika, 2 saat, 24 saat) süresinde analizi gerçekleştirildi. Elde edilen verilerin istatistiksel analizi, Friedman testi, Kruskal Wallis testi kullanılarak gerçekleştirildi. Farklılıkların tespiti için Bonferroni düzeltmeli Dunn testi ve Bonferroni düzeltmeli ikili Wilcoxon İşaretli Sıralar testi uygulandı. Anlamlılık düzeyi p<0,05 olarak belirlendi. Elde edilen veriler, tüm gargara gruplarında zaman ve konsantrasyon değişkenlerinin hücre canlılığı üzerinde istatistiksel olarak anlamlı bir etkisi olduğunu gösterdi (p < 0,05). Analizler sonucunda, Colgate Plax gargarasının, BenriDent, Klorhex ve Oral-B'ye kıyasla hücrelerde daha düşük LDH salınımına neden olduğu saptandı (p<0,05). Ayrıca, Splat White Plus gargarasının LDH salınımı düzeyleri, Oral-B ve Klorhex grubuna göre anlamlı şekilde daha düşük, buna karşın 8-OHdG düzeyleri anlamlı olarak daha yüksek bulundu (p < 0,05). Akış sitometrisi sonuçlarına göre, hücre canlılık oranı en yüksek %99,40 ile BenriDent grubunda tespit edilirken, en düşük canlılık oranı %93,90 ile Splat White Plus grubunda saptandı. Standart antibiyotiklerle karşılaştırıldığında, Splat White Plus gargarasının Streptococcus mutans üzerinde en fazla antimikrobiyal etkiye sahip olduğu belirlendi (MİK = 1,56 µg/mL). Candida albicans'a karşı ise en güçlü etki Colgate Plax (MİK = 3,125 µg/mL) ve Oral-B (MİK=1,56 µg/mL) gargaralarında gözlendi. Streptococcus salivarius'a karşı tüm gargaralar, antibakteriyel etkilerini yüksek etkili kabul edilen eşik değerlere yakın düzeyde gösterdi. Aggregatibacter actinomycetemcomitans üzerinde en etkili gargaralar ise BenriDent, Splat White Plus ve Colgate Plax olup, bu ürünlerde minimum inhibisyon konsantrasyonu 50 µg/mL olarak tespit edildi. Sonuç olarak, bu çalışmada gargara formülasyonlarında yer alan çeşitli aktif maddelere bağlı olarak, ürünlerin sitotoksik, apoptotik, antimikrobiyal etkileri ile oksidatif DNA hasar düzeylerinde anlamlı farklılıklar oluşturduğu ortaya kondu.
Özet (Çeviri)
The aim of this study was to evaluate and compare, in vitro, the antimicrobial effects (against Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius, Aggregatibacter actinomycetemcomitans, and Candida albicans), as well as the cytotoxic, apoptotic effects, and oxidative DNA damage levels on human gingival fibroblast (HGF) cells of seven different commercially available mouthwashes containing various active ingredients and recommended for use in children (BenriDent, Listerine Total Care, Splat, DkDent, Klorhex, Oral-B, and Colgate Plax). After the human gingival fibroblast cells (HGFC) reached a specific density in the culture medium, they were seeded into 96-well plates. To evaluate cytotoxic effects on the cells, 2,3-Bis(2-Methoxy-4-Nitro-5-Sulfophenyl)-2H-Tetrazolium-5-Carboxanilide (XTT) and lactate dehydrogenase (LDH) assays were performed. Hoechst staining was carried out alongside the Annexin V assay to detect apoptotic effects. Oxidative DNA damage was assessed by measuring 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8-OHdG) levels using an ELISA kit. Antimicrobial activity was evaluated using the microdilution method. Cell analyses were performed at five different mouthwash concentrations (10%, 25%, 50%, 75%, and 100%) and four different incubation periods (1 minute, 30 minutes, 2 hours, and 24 hours). Statistical analysis of the obtained data was performed using the Friedman test and the Kruskal Wallis test. Differences were determined using the Dunn test with Bonferroni correction and the pairwise Wilcoxon Signed Rank test with Bonferroni correction. The significance level was set at p<0.05. The data obtained for all mouthwash groups revealed that both time and concentration variables had a statistically significant effect on cell viability levels (p < 0.05). The analysis showed that Colgate Plax mouthwash induced significantly lower LDH release in cells compared to BenriDent, Klorhex, and Oral-B (p < 0.05). Additionally, Splat mouthwash resulted in significantly lower LDH release levels than Oral-B and Klorhex, while causing significantly higher levels of 8-OHdG (p < 0.05). According to flow cytometry results, the highest cell viability rate was observed in the BenriDent group (99.40%), whereas the lowest was found in the Splat group (93.90%). Compared to standard antibiotics, Splat demonstrated the highest antimicrobial activity against Streptococcus mutans (MIC = 1.56 µg/mL). The strongest activity against Candida albicans was observed with Colgate Plax (MIC = 3.125 µg/mL) and Oral-B (MIC = 1.56 µg/mL). For Streptococcus salivarius, all mouthwashes exhibited antibacterial activity close to the threshold considered highly effective. BenriDent, Splat, and Colgate Plax were the most effective against Aggregatibacter actinomycetemcomitans, with a minimum inhibitory concentration (MIC) of 50 µg/mL. In conclusion, this study demonstrated that the differences in active ingredients among commercially available mouthwashes resulted in varying levels of cytotoxicity, apoptosis, antimicrobial activity, and oxidative DNA damage.
Benzer Tezler
- Clinical evaluation of the plaque inhibitory effect of aloe vera-containing mouth rinse in a 4-day plaque regrowth model
Aloe vera içeren ağız gargarasının, plak inhibisyonu üzerine olan etkilerinn 4 günlük plak akümülasyon modelinde klinik olarak değerlendirilmesi
NESRIN M.ABDELWANIS EL NAIHOUM
Doktora
İngilizce
2018
Diş HekimliğiYeditepe ÜniversitesiPeriodontoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BAHAR KURU
DOÇ. HARE GÜRSOY
- Assessment of hard tıssue densıty around dental ımplants usıng conventıonal radıographs
Dental implantlar çevresindeki sert doku densitesinin konvensiyonel radyograflar ile incelenmesi
WAEL ALSHAIBANI
Doktora
İngilizce
2010
Diş HekimliğiGazi ÜniversitesiAğız, Diş ve Çene Cerrahisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NUR MOLLAOĞLU
- Development of natural lozenge formulation of ginger extract
Zencefil ekstraktı ile doğal pastil formülasyonunun geliştirilmesi
MERVE KÜÇÜKÖZKAN SAVAŞÇI
Yüksek Lisans
İngilizce
2021
Eczacılık ve FarmakolojiYeditepe ÜniversitesiEczacılık Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ GÜLENGÜL DUMAN
- Antiviral etkili formülasyonların hazırlanması ve karakterizasyonu
Preparation and characterization of antiviral formulations
HATİCE HAS ZİLE
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
Eczacılık ve FarmakolojiEge ÜniversitesiFarmasötik Teknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. KEVSER ÖZGEN ÖZER
- Development of cutting-edge SERS and TERS technologies for environmental challenges
Çevresel sorunlara yönelik son teknoloji SERS ve TERS sistemlerinin geliştirilmesi
ÖZGE DEMİRTAŞ
Doktora
İngilizce
2023
Fizik ve Fizik MühendisliğiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiMikro ve Nanoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
DOÇ. DR. ALPAN BEK
PROF. DR. EMREN NALBANT