Geri Dön

Kısa zincirli yağ asitlerinin farklı kolon epitel hücre modellerinde interlökin 34 IL34 salınımına ve makrofaj polarizasyonuna etkilerinin araştırılması

Investigation of the effects of short-chain fatty acids oninterleukin 34 release and macrophage polarization indifferent colon epithelial cell models

PDF İndir

  1. Tez No: 954853
  2. Yazar: MERAL SARPER
  3. Danışmanlar: PROF. DR. RESUL KARAKUŞ
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Allerji ve İmmünoloji, Allergy and Immunology
  6. Anahtar Kelimeler: Sodyum bütirat, İnflamasyon, Sodium butyrate, Inflammation
  7. Yıl: 2025
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Gazi Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: İmmünoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: İmmünoloji Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Kısa zincirli yağ asitleri (KZYA), mikrobiyota tarafından liflerin fermantasyonuyla üretilen; bağışıklık ve mukozal homeostazda immünmodülatör etkiler gösteren önemli metabolitlerdir. Mikrobiyota-diyet etkileşimi, özellikle inflamatuar hastalıklarda bağışıklık yanıtını düzenleyerek bütirat ve propiyonata terapötik potansiyel kazandırmaktadır. Bu çalışmanın ilk aşamasında, bütirat ve propiyonatın farklı dozlarının, rTNF-α ile inflamasyon oluşturulmuş ve oluşturulmamış insan kolon epitel hücrelerinde (FHC ve Caco-2), İL-34, İL-37 ve TGF-β1 üzerine etkisi ELISA ve RT-PCR yöntemleri ile değerlendirilmiştir. Uygulama dozları MTT testiyle, rTNF-α dozu ise hücre canlılığı ve İL-34 mRNA artışı dikkate alınarak belirlenmiştir. Her iki hücre hattında normal koşullarda KZYA'lar, İL-34 ve İL-37 düzeylerinde anlamlı değişiklik oluşturmamıştır. İnflamasyon ortamında İL-34 özellikle 48. saatte, İL-37 ise 24. ve 48. saatte artmıştır. KZYA uygulamaları İL-34 düzeyini doz bağımlı şekilde baskılamış; yüksek doz bütirat-propiyonat (YBP) grubunda protein, yüksek doz bütirat (YB) grubunda ise mRNA düzeyinde anlamlı azalmalar saptanmıştır. İL-37'de belirgin değişiklik izlenmemiştir. TGF-β1 düzeyi inflamasyon ortamında azalmış; bu baskılayıcı etki, KZYA uygulanan gruplarda her iki koşulda da sürmüştür. FHC hücrelerinde her iki ortamda DBP ve YBP gruplarında, Caco-2 hücrelerinde ise normal koşullarda DP ve DBP, inflamasyon koşullarında ise DBP grubunda sitokin ve mRNA düzeylerinde anlamlı düşüşler gözlenmiştir. Çalışmanın ikinci aşamasında, FHC ve Caco-2 hücrelerinden elde edilen süpernatantlarla, inflamatuar ve normal mikroçevre koşullarında inkübe edilen THP-1 kökenli makrofajlarda, KZYA'ların polarizasyona etkileri değerlendirilmiştir. Sitokin düzeyleri (İL-10, İL-12, TGF-β1) ELISA yöntemiyle analiz edilirken; yüzey belirteçleri [CD68 (M0), CD80 ve CD197/CCR7 (M1), CD206 ve CD163 (M2)] ise akım sitometrisi ile analiz edilmiştir. İnflamasyon oluşturulmamış ortamda, her iki hücre süpernatantıyla inkübe edilen makrofajlarda YB, İL-10 ve TGF-β1 düzeylerini artırıp, İL-12'yi azaltmıştır. İnflamasyonlu ortamda ise benzer etki YB ve YBP gruplarında gözlenmiştir. Yüzey belirteçleri açısından değerlendirildiğinde; YB ve YBP grupları, her iki hücre süpernatantıyla inkübe edilen M0 makrofajlarda M2 yönelimini desteklemiştir. TNF-α'lı gruplarda M1, TNF-α+ KZYA (özellikle YB ve YBP) gruplarında ise M1 belirteçleri baskılanmış, M2 yönelimi desteklenmiştir; ancak bu etki Caco-2 grubunda daha sınırlı kalmıştır. Sonuç olarak, KZYA'ların epitel kaynaklı sitokin yanıtlarını düzenleyip inflamatuar mikroçevreyi ve makrofaj polarizasyonunu etkilediği; bu yolla inflamatuar hastalıkların tedavisinde potansiyel immünmodülatör ajanlar olabileceği gösterilmiştir.

Özet (Çeviri)

Short-chain fatty acids (SCFAs) are important metabolites produced by the fermentation of fibers by microbiota and exhibit immunomodulatory effects on immunity and mucosal homeostasis. Microbiota-diet interaction provides therapeutic potential to butyrate and propionate by regulating the immune response, especially in inflammatory diseases. In the first stage of this study, the effects of different doses of butyrate and propionate on IL-34, IL-37 and TGF-β1 in rTNF-α induced (inflammation group) and normal human colon epithelial cells (FHC and Caco-2) were evaluated by ELISA and RT-PCR methods. Application doses were determined by MTT test, and rTNF-α dose was determined via cell viability and increase in IL-34 mRNA expression. In both cell lines, SCFAs did not cause significant changes on IL-34 and IL-37 levels under normal conditions. IL-34 increased especially at the 48th hour, and IL-37 increased at the 24th and 48th hours under the inflammatory environment. SCFA applications suppressed IL-34 levels in a dose-dependent manner; significant decreases were detected in protein levels in the high-dose butyrate-propionate (YBP) group and in mRNA levels in the high-dose butyrate (YB) group. No significant change was observed in IL-37. TGF-β1 levels decreased under the inflammatory environment; this suppressive effect continued in both conditions in the SCFA-applied groups. In FHC cells, significant decreases in cytokine and mRNA levels were observed in the DBP and YBP groups in both environments, and in Caco-2 cells, significant decreases in the DP and DBP levels were observed in the DBP group under normal conditions and under inflammation conditions. In the second stage of the study, the effects of SCFAs on polarization in THP-1 derived macrophages that were incubated with supernatants obtained from FHC and Caco-2 cells under inflammatory and normal microenvironmental conditions were evaluated. While cytokine levels (IL-10, IL-12, TGF-β1) were analyzed by ELISA method; surface markers [CD68 (M0), CD80 and CD197/CCR7 (M1), CD206 and CD163 (M2)] were analyzed by flow cytometry. In a non-inflammatory environment, YB increased IL-10 and TGF-β1 levels and decreased IL-12 level in macrophages that were incubated with both cell supernatants. A similar effect was observed in the YB and YBP groups under the inflammatory environment. When evaluated in terms of surface markers, YB and YBP groups supported M2 orientation in M0 macrophages that were incubated with both cell supernatants. In TNF-α groups, M1 markers were suppressed and M2 orientation was supported in TNF-α+ SCFA (especially YB and YBP) groups; however, this effect was more limited in the Caco-2 group. In conclusion, it has been shown that SCFAs regulate epithelium-derived cytokine responses and affect the inflammatory microenvironment and macrophage polarization; thus, they may be potential immunomodulatory agents in the treatment of inflammatory diseases.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    949414

    Targeting and activation of antigen specific CD8+ T cells with peptide-major histocompatibility complex I tetramers

    Peptit-majör histokompatibilite kompleks I tetramerleri ile antijen spesifik CD8+ T hücrelerin hedeflenmesi ve aktivasyonu

    ŞAFAK CEREN USLU ŞIVGIN

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2025

    BiyoteknolojiHacettepe Üniversitesi

    Temel Onkoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. HANDE CANPINAR

  2. Tez No

    640193

    Ülkemizde tüketilen bazı fermente gıdalarımızın in vitro ortamda probiyotik-prebiyotik etkileşmesinin incelenmesi

    Probiotic-prebiotic i̇nteraction of some fermented foods consumed in our country in vitro.

    TUBA TİKİCİ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    Beslenme ve Diyetetikİstanbul Sabahattin Zaim Üniversitesi

    Beslenme ve Diyetetik Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ MUSTAFA YAMAN

  3. Tez No

    771521

    Bergamot (Citrus bergamia) meyvesinin Lactobacillus plantarum suşu ile fermantasyonu: Fenolik bileşiklerin, kısa zincirli yağ asitlerinin analizi

    Fermentation of bergamot (Citrus bergamia) fruit with Lactobacillus plantarum strain: Analysis of phenolic compounds, short chain fatty acids

    ÖZLEM ASLAN BURSALI

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Beslenme ve DiyetetikMuğla Sıtkı Koçman Üniversitesi

    Beslenme ve Diyetetik Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ BORA EKİNCİ

  4. Tez No

    1010309

    Diyet yağ asitlerinin metabolik etkilerinin metabolomiks yöntemiyle çalışılması

    Investigation of the metabolic effects of dietary fatty acids using a metabolomics approach

    ECE KILIÇ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2026

    Biyokimyaİstanbul Teknik Üniversitesi

    Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. PERVİN BAŞARAN

    PROF. DR. KIVANÇ BİRSOY

  5. Tez No

    1016848

    Salep diyet liflerinin kolonik mikrobiyota üzerine etkilerininaraştırılması

    Investigation of the effect of salep dietary fibers on colonic microbiota

    ŞEYMA NUR DOĞAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2026

    Beslenme ve DiyetetikNecmettin Erbakan Üniversitesi

    Beslenme ve Diyetetik Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ SEDA TUNÇİL

Geri Dön