In vitro growth and development of sugar beet (beta vulgaris L.) from callus, ovule, suspension cells and protoplasts
Kallus, ovül, süspansiyon ve protoplast kültürleri ile şeker pancarının (beta vulgaris L.) in vitro koşullarda büyüme ve gelişmesi
- Tez No: 93245
- Danışmanlar: PROF. DR. ZEKİ KAYA
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyoloji, Biology
- Anahtar Kelimeler: Beta vulgaris L, ikiye-katlanmış haploid bitki üretimi, kallus kültürü, süspansiyon kültürü, protoplast kültürü, protoplast füzyonu, polietilen glikol (PEG), Kemik kallusu, Kültür, Over kültürü, Süspansiyon, İn vitro, Şeker pancarı, Beta vulgaris L, doubled haploids, callus culture, suspension culture, protoplast culture, protoplast fusion, polyethylene glycol (PEG), Bony callus, Culture, Ovary culture, Suspension, In vitro, Sugar beet
- Yıl: 2000
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
VI oz KALLUS, OVUL, SÜSPANSİYON VE PROTOPLAST KÜLTÜRLERİ İLE ŞEKER PANCARININ {BETA VULGARIS L.) İN VİTRO KOŞULLARDA BÜYÜME VE GELİŞMESİ Gürel, Songül Doktora, Biyoloji Bölümü Danışman: Prof. Dr. Zeki Kaya Mayıs, 2000, 174 sayfa Şeker pancarında (Beta vulgaris L.) in vitro koşullarda kallus, övül, süspansiyon ve protoplast kültürleri ile yapılan büyüme ve gelişme çalışmalarında Türkiye'de ıslah edilen değişik ıslah hatları kullanılmıştır. Hipokotil ve kotiledon eksplantlan, yaprak ve yaprak sapı eksplantlanna göre daha çok kallus üretmişlerdir. Naftalen asetik asit veya 2.4-diklorofenoksi asetik asit'in 0.5 mg/1 benzilaminopürin veya kinetin ile kombinasyonu yüksek oranda kallus üretmiştir. Sadece yaprak sapı ve yaprak eksplantlan doğrudan organogenesis yoluyla sürgün meydana getirmiş, hem kinetin hem de benzilaminopürin sürgün oluşumunu artırmıştır.vu Ön soğuk muamelesi (4 °C) ve aktif kömür kullanımı, haploid embriyo üretimini artırmış, buna karşın gümüş nitrat embriyo başlangıcım azaltmış veya tamamen engellemiştir. Kolhisin ve trifluralin, kromozom katlanması bakımından benzer etkiler göstermiş, fakat her iki kimyasal da sıvı ortamda kullanıldığında daha etkili olmuşlardır Süspansiyon kültüründe, en yüksek hücre büyüme oram Mİ 14 ıslah hattından elde edilmiştir. Hücre bölünme oranlan ise, 0.25 mg/1 benzilaminopürin ve 2,4- diklorofenoksi asetik asit içeren ortamlarda en yüksek olmuştur. Protoplastlar, süspansiyon hücreleri ile yaprak mezofıl dokusundan izole edilmişlerdir. % 1.0 selülaz, % 0.1 hemiselülaz, % 1.0 pektinaz ve % 0.1 driselaz içeren enzim karışımı, hem verim hem de canlılık bakımından en uygun kombinasyon olarak tesbit edilmişlerdir. Yüksek başlangıç yoğunluğuna sahip protoplastlar (105, 2x 1 05 ve 3 x 105), daha çok hücre kolonisi oluşturmuşlardır. Kallus sadece ıslah hattı ÇBM315'in süspansiyon protoplastlanndan elde edilebilmiştir. Protoplast füzyonu işleminde sonra, en yüksek canlılık oram % 20 PEG ile 25 dakika işlem süresi kombinasyonundan elde edilmiştir. Genel olarak, % 25 PEG ile 20 dakika işlem süresi kombinasyonu en yüksek füzyon oranını vermiştir. Düşük PEG (% 20 veya 25) ile kısa işlem süresi (15 veya 20 dakika) birlikte uygulandığında, heterofüzyonlann hücre kolonisi oluşturma kapasiteleri en yüksek olmuştur. Füzyona uğratılan protoplastlardan kallus elde edilememiştir. W. VtaSEKÖÜLKrtM KURUL»vuı Kallus veya explantlardan sürgün oluşumu şeker pancannda gen transferi çalışmalarında kullanılabilir ve ovüllerden elde edilen kromozom sayılan ikiye katlanmış haploid bitkiler ise saf hatların elde edilmesine olanak sağlar. Protoplast izolasyonu ve füzyonu çalışmalarında metod geliştirilmesi doğal olarak var olan melezleme engelini ortadan kaldırmakta ve klasik ıslah metodlanna göre daha hızlı bir alternatif olmaktadır. Ancak sürgün oluşturma çalışmaları için gelecekte bu tür çalışmalara devam edilmelidir.
Özet (Çeviri)
uı ABSTRACT IN VITRO GROWTH AND DEVELOPMENT OF SUGAR BEET (BETA VULGARIS L.) FROM CALLUS, OVULE, SUSPENSION CELLS AND PROTOPLASTS Gürel, Songül Ph.D., Department of Biology Supervisor: Prof. Dr. Zeki Kaya May, 2000, 174 pages To study in vitro growth and development of sugar beet from callus, ovule, suspension cells and protoplasts, explants from different Turkish breeding lines of sugar beet were utilized. Hypocotyl and cotyledon explants produced more callus than leaf and petiole explants. The use of naphthaleneacetic acid and 2,4-dichlorophenoxyacetic acid in combination with benzylaminopurine and kinetin at 0.5 mg/1 increased callus formation. Only petiole and leaf explants formed shoots via direct organogenesis, and both kinetin and benzylaminopurine promoted shoot formation. <&£, îfteSffiÛ?MTtM KURULU ?mâIV Cold pretreatment (4 °C) and the use of charcoal increased the frequency of haploid embryos whereas silver nitrate decreased or completely inhibited embryo induction. Colchicine and trifluralin were similarly effective in chromosome doubling, but both agents were more effective when used in liquid medium. In suspension culture, the highest cell growth rate was obtained from breeding line Ml 14. Medim containing 0.25 mg/1 benzylaminopurine and 2,4- dichlorophenoxyacetic acid induced the highest rates of cell division. Protoplasts were isolated from suspension cells and leaf mesophyll tissue. The enzyme mixture containing 1.0 % cellulase, 0.1 % hemicellulase, 1.0 % pectinase and 0.1 % driselase was found to be the most suitable combination in terms of both yield and viability of protoplasts. The higher initial plating densities (105, 2x1 05 and 3xl05) produced more cell colonies. Callus was only obtained from suspension- derived protoplasts of breeding line ÇBM315. Following protoplast fusion treatments, the highest rate of fused protoplast viability was obtained with 25 min treatment of 20 % polyethylene glycol (PEG). In general, 25 % PEG combined with 20 min treatment duration produced the highest fusion frequency. The capacity of heterofusions to form cell colonies was highest when lower PEG (20 or 25 %) was used for shorter treatment durations (15 or 20 min). Macrocallus formation from the fused protoplats could not be achieved.Regeneration of shoots from callus or seedling tissues can be used in prospective studies on genetic transformation of sugar beet and induction of doubled haploids from ovules offers the possibility of the production of homozygous sugar beet lines. Developing a method for protoplast isolation and fusion may overcome the limitations of natural crossing barriers or provide a rapid alternative to traditional breeding methods but attempts to regenerate shoots should be studied further.
Benzer Tezler
- Palladyom eşektrodun seçici elektrokatalitik özelliklerinin D-Glikozun elektrooksidsyonunda belirlenmesi
The Determination of selective properties of palladium electrode in D-Glucose electrooxidation
İPEK BECERİK
- Değişik patlıcan genotiplerinde in vitro androgenesis ve haploid bitki oluşumunu uyarıcı bazı etmenler üzerinde araştırmalar
Başlık çevirisi yok
ŞEBNEM KARAKULLUKÇU
- Growth and development of sunflower (Helianthus annuus l.) in vitro
Ayçiçeği (Helianthus annuus l.)'nin in vitro'da büyüme ve gelişimi
ÖZGÜR CEM ERKİN
Yüksek Lisans
İngilizce
1999
BiyolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. SERTAÇ ÖNDE
- Induction of callus from P.somniferum and P.orientale in vitro conditions
P.somniferum ve P.orientale in vitro şartlarda kallus (organize olmamış hücreler) elde edilmesi
VOLKAN SEYRANTEPE
