Klinik örneklerden izole edilen pseudomonas aeruginosa kökenlerinin proteaz aktivitelerinin (elastaz ve alkali proteaz) değişik yöntemlerle gösterilmesi
Başlık çevirisi mevcut değil.
- Tez No: 91987
- Danışmanlar: DOÇ.DR. AYŞEGÜL YAĞCI
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: Mikrobiyoloji, Microbiology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2000
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Marmara Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
ÖZET Pseudomonas aeruginosa primer olarak hastane infeksiyonu etkeni olan fırsatçı bir patojendir. Konak savunması bozulduğu zaman oldukça virulan olup özellikle bağışık ödünlü (kanser, yanık, travma, kistik fibroz) kişilerde ciddi infeksiyonlara neden olan bir mikroorganizmadır. Pseudomonas aeruginosa infeksiyonlannm patogenezinde çeşitli virülans faktörleri rol oynar. Bunlar içinde elastaz, alkali proteaz, aljinat, ekzotoksin A ve fosfolipaz C sıklıkla suçlanan hücre dışı ürünlerdir. Çalışmamızda çeşitli klinik örneklerde etken olarak izole edilen 50 Pseudomonas aeruginosa kökeni çalışmaya alınmıştır. Bakterinin virülansında önemli olarak kabul edilen, elastaz ve alkali proteaz enzimlerinin aktivitesinin saptanmasında değişik yöntemler karşılaştınlmıştır. Elastaz aktivitesinin belirlenmesinde elastin-nutrient ağarda çizgi ekimle zon, bu ağarda açılan kuyucuklarda süpernatanın oluşturduğu zon ve elastin kongo kırmızısıyla süpernatanın oluşturduğu absorbans değerleri karşılaştuılmıştır. Elastin kongo kırmızısı yöntemi ile süpernatanlar arasındaki ilişki katsayısı (r=88.4, p < 0.001), elastin kongo kırmızısı yöntemi ile çizgi (r= 84.6, p < 0.001) ve çizgi ile süpernatanlar (r=76.8, p < 0.001) arasındakine göre daha yüksek bulunmuştur. Ağarda süpernatan zonunun ölçülmesi rutin laborotuvarda kullanılabilecek bir yöntem olarak önerilebilir. Alkali proteaz enziminin saptanmasında süpernatanın BKI- yağsız sütlü 42 iağarda oluşturduğu zon, azur mavisiyle verdiği aborbans ve 2İmogram yöntemiyle oluşturduğu banûar karşılaştinlmıştır. Alkali proteaz aMvitesinin belirlenmesinde BKI- yağsız sütlü agar ve azur mavisi yöntemi karşılaştırıldığında ileri derecede anlamlı bir ilişki (r=87.40, p değeri 0.001'den küçük) saptanmıştır. Zimogram SDS-PAGE yönteminde ise standart enzim sağlanamadığında kantitasyon yapılamamasına rağmen, şeffaf bantların büyüklükleri diğer iki yöntemle parelellik göstermiştir. Alkali proteaz enziminin saptanmasında BKI- yağsız sütlü agar yöntemi diğer İM yönteme göre basit ve her laboratuvar şartlarında kolayca uygulanabilir bir yöntem olduğunda dolayı tercih edilebilir. 43
Özet (Çeviri)
< SUMMARY Pseudomonas aeruginosa is an opportunistic pathogen mainly isolated from nosocomial infections when host defense mechanisms are destroyed especially in cancer, burn, trauma patients. Several virulence factors are important in disease pathogenesis, among them elastase, alkaline protease, alginate, exotoxin A are commonly encountered ones. Fifty Pseudomonas aeruginosa strains isolated from different clinical samples are included in this study. Different methods are compared for detection of protease activity (elastase, alkaline protease) of the strains. Elastase activity was determined by three different methods including direct inoculation of the strains into elastin -nutrient agar, detection of the zone diameter of the supernatant on the agar and detection of the absorbance value by elastin-congo red method. Correlation rate between elastin congo red and supernatant was found higher (r=87.15, p < 0.001), than the rate between elastin congo red and direct inoculation (r= 85.40, p < 0.001) and supernatant and direct inoculation (r=85.45, p < 0.001). Measurement of the zone diameter of the supernatant in the elastin -nutrient agar can be suggested as an easy method for routine laboratories. Alkaline protease activity was determined comparing the zone diameter produced by the supernatant in the BHI-skim milk agar, the absorbance value by azure blue method and the bands produced by the zymography SDS-PAGE assay. When we compared BKI-skim milk agar to azure blue method for determination 44of alkaline protease activity, we have found a significant relationship (r greater than 0.87, p less than 0.001). Although quantitation could not be possible because of the inavailability of the standart enzyme by zymography SDS-PAGE assay, the size of lysed bands were in parellel by other two assays. BKI-skim milk agar assay could be preferred through other two assays for alkaline protease enzyme activity determination, since it is rather simple and could be applied in every laboratory conditions. 45
Benzer Tezler
- Toplumdan edinilen pnömonilerde etken olan bakteriler ve antibiyotiklere duyarlılıkları
Community-aquired pneumonia causative organisme and antibiotical sensitivity
SAVAŞ VURAL
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1998
Mikrobiyolojiİstanbul ÜniversitesiMikrobiyoloji ve Klinik Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF.DR. MÜZEYYEN MAMAL TORUN
- Klinik örneklerden izole edilen pesudomonas aeruginosa suşlarının SDS-page protein profilleri, antibiyotik duyarlılıkları, biyokimyasal ve piyosin tiplendirimi
SDS-page protein profiles, antibotic sensitivity, biocehimical and pycin typing of pseudomonas aeruginosa strains isolated from various clinical specime
BELGİN ALTINOK
- Çeşitli klinik örneklerden izole edilen Pseudomonas aeruginosa suşlarının antimikrobiyal ajanlara duyarlılığı
Başlık çevirisi yok
SARİYE YILMAZ
Yüksek Lisans
Türkçe
1999
Veteriner HekimliğiYüzüncü Yıl ÜniversitesiMikrobiyoloji ve Klinik Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MUSTAFA BERKTAŞ
- Sivas yöresinde çeşitli örneklerden izole edilen pseudomonas türleri ve bunların bazı antimikrobiyallere in-vitro duyarlılıkları
Pseudomonas species isolated from various specimens and their in-vitro susceptibility to some antimicrobials, in Sivas, Turkey
FUNDA KOÇOĞLU
- Seftriaksonun amikasin, netilmisin ve tobramisin ile kombinasyonlarının pseudomonas aeruginosa suşlarına karşı in vitro etkilerinin araştırılması
Başlık çevirisi yok
ALEV YERGÖK
Yüksek Lisans
Türkçe
1990
Mikrobiyolojiİstanbul ÜniversitesiMikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF.DR. ENVER TALİ ÇETİN