4-VINYLCYCLOHEXENE DIEPOXIDE İNDÜKLÜ PRİMER OVER YETMEZLİK MODELİNDE LİPOİK ASİTİN OVARYUM VE UTERUS ÜZERİNE ETKİSİ
EFFECT OF LIPOIC ACID ON OVARY AND UTERUS IN PRIMARY OVARIAN FAILURE MODEL INDUCED BY 4-VINYLCYCLOHEXENE DIEPOXIDE
- Tez No: 907759
- Danışmanlar: DOÇ. DR. SERAP CİLAKER MIÇILI
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Kadın Hastalıkları ve Doğum, Histoloji ve Embriyoloji, Obstetrics and Gynecology, Histology and Embryology
- Anahtar Kelimeler: uterus, infertilite, primer over yetmezlik, ovaryum, alfa lipoik asit, uterus, infertility, primary ovarian insufficiency, ovarium, alpha lipoic acid
- Yıl: 2018
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Dokuz Eylül Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Amaç: Programlanmış hücre ölümü olarak bilinen apoptoz, organizmada gelişimin bütün evrelerinde önemli rol oynar. Yaşlanmada apoptozun rolüne ilişkin çelişkili veriler olsa da, yaşla beraber apoptozun arttığı bilinmektedir. Yaş ile birlikte beklenen fonksiyonel folikül rezervinin azalması olarak tanımlanan ovaryan yaşlanma (senesens) da bu fizyolojik olaylardan biridir. Ovaryan yaşlanma modellerinde kullanılan 4-vinilsiklohekzen diepoksid (VCD) isimli kimyasal ile primer over yetmezlik (POY) modeli oluşturulmaktadır. VCD doğal ovaryan yaşlanma sürecindeki gibi reaktif oksijen seviyelerinde yükselmeye, primordial ve primer foliküllerin sayısında azalmaya neden olmaktadır. Alfa-Lipoik Asit (ALA) ise, hem suda hem yağda çözünebilen çok güçlü bir antioksidandır. Çalışmamızda, VCD kullanılarak primer over yetmezlik modeli oluşturulan sıçanlarda, ovaryum ve uterusta Alfa-Lipoik Asit (ALA)'in histokimyasal, immunohistokimyasal ve biyokimyasal etkilerinin araştırılması amaçlandı. Yöntem Çalışmamızda 200-250 gr ağırlığında 28 adet wistar albino sıçan Kontrol, VCD, ALA ve VCD+ALA olmak üzere 4 gruba ayrıldı. Kontrol grubuna bazal değerleri gözlemek için hiçbir uygulama yapılmadı, VCD grubuna 42 gün boyunca 80 mg/gün olacak şekilde intraperitoneal VCD uygulandı, ALA grubuna 100 mg/gün olacak şekilde oral gavaj yöntemi ile aynı süre boyunca Lipoik Asit verildi, VCD+ALA grubuna ise, 42 gün boyunca VCD uygulanıp aynı anda ALA tedavisi uygulandı. 42. günün sonunda denekler sakrifiye edildi. Sağ ovaryum ve uterus histolojik incelemeler için fikse edildi, sol ovaryum ve uterus ise biyokimyasal incelemeler için uygun şartlarda homojenize edilip saklandı. Histokimyasal analizler için, Hematoksilen&Eozin, Periyodik Asit Schiff (PAS) ve Masson Trichrome boyamaları; immünohistokimyasal analizler için Kaspaz-3, iNos ve eNos immün boyamaları yapıldı. Biyokimyasal analizler için ELISA yöntemi ile serbest FSH, LH ve Estradiol (E2) hormon seviyeleri, spektrofotometrik yöntem ile GPx, MDA, GSH ölçümleri ve ELISA yöntemi iNos ile eNos protein ölçümleri yapıldı. Bulgular: Kontrol grubunda ovaryum ve uterus dokusunda normal histolojik yapı gözlendi. VCD grubunda, primordial ve primer folikül sayısında azalma, korpus luteum ve kistik folikül sayısında artış olduğu, zona pellusida yapısının bozulduğu, bağ doku artışı ve vakuolize foliküller olduğu gözlendi. ALA grubu kontrol grubuna benzer özellikteydi. VCD+ALA grubunda ise primordial ve primer folikül sayısında artış, korpus luteum ve kistik folikül sayısında azalma, bağ doku miktarında azalma olduğu ve zona pellusida yapılarının normal olduğu gözlendi. Ovaryum dokusunda POY modelinin kanıtlanması için yapılan kaspaz-3 immunohistokimyasında kontrol grubuna kıyasla VCD grubunda foliküler hücrelerde artmış kaspaz-3 aktivitesi gözlenirken, VCD+ALA grubunda azalma olduğu gözlendi. ALA grubunda ise kontrole yakın sonuçlar elde edildi. Uterus dokusundaki eNos immunohistokimyasal boyamasında, kontrol grubuna kıyasla VCD grubunda azalmış immunreaktivite gözlenirken, VCD+ALA grubunda artış olduğu gözlendi. iNos immunohistokimyasal boyamasında ise kontrol grubuna kıyasla VCD grubunda artmış immunreaktivite gözlenirken, VCD+ALA grubunda azalmış olduğu gözlendi. ALA grubunda ise eNos ve iNos immunreaktiviteleri kontrol grubuna benzerdi. Plazma FSH ve LH hormon düzeyleri ise VCD grubunda tüm gruplara göre artış gösterdi, VCD+ALA grubunda ise VCD grubuna göre azalmıştı. Estradiol seviyesi ise VCD grubunda diğer gruplara kıyasla azalmıştı. Hem ovaryum hem uterus dokusunda iNos seviyesinin VCD grubunda arttığı, ALA uygulanan tedavi grubunda ise azaldığı gözlendi. eNos seviyesinin ise, VCD grubunda azaldığı, ALA uygulanan grupta arttığı gözlendi. MDA değerleri hem ovaryum hem uterus dokusunda, kontrol grubuna kıyasla VCD grubunda artış gösterirken, VCD+ALA grubunda azalma gösterdi. GPx ve GSH değerleri ise kontrol grubuna kıyasla VCD grubunda azalma gösterirken, VCD+ALA grubunda artış gösterdi. Sonuç: Elde ettiğimiz sonuçlar doğrultusunda, primer over yetmezlik nedeniyle folikül kaybı gözlenen sıçanlarda, alfa lipoik asidin folikül rezervini koruyucu etkisi ile ovaryum ve uterus dokusunda eNos ve iNos mekanizmalarını düzenleyici etkisi olduğu gözlendi. Primer over yetmezlik sonucu infertilite gözlenen ve perimenopozal dönemlerde gebelik planlayan vakalarda folikül rezervinin korunması ve gebelik şansının artırılması için klinikteki mevcut tedavilere ek olarak lipoik asit kullanımının da olumlu etkileri olduğu gösterilmiş oldu.
Özet (Çeviri)
Objective: Apoptosis, known as programmed cell death, plays an important role in all phases of development in the organism. Although it is contradictory to the role of apoptosis in aging, it is known that apoptosis increases with age. Ovarian aging, which is defined as a decrease in the expected functional follicle reserve with age, is one of these physiological events. Primary ovarian failure (POY) model is established with 4 vinicyclohexene diepoxide (VCD) chemicals used in ovarian aging models. VCD causes elevation in reactive oxygen levels as in the natural ovarian aging process, leading to a decrease in the number of primordial and primary follicles. Alpha-Lipoic Acid (ALA) is a very powerful antioxidant that is soluble in both water and oil. In our study, it was aimed to investigate the histochemical, immunohistochemical and biochemical effects of ovary and uterus Alpha-Lipoic Acid (ALA) in rats in whom a primer over failure model was constructed using VCD. Method: In our study, 28 wistar albino rats weighing 200-250 gr were divided into 4 groups as Control, VCD, ALA and VCD + ALA. In the control group, no application was made to observe the basal values, VCD was administered intraperitoneally to the VCD group as 80 mg / day for 42 days, Lipoic Acid was administered for the same duration as oral gavage as 100 mg / day for the ALA group, in VCD+ALA group VCD was applied for 42 days and ALA treatment was applied at the same time. At the end of the 42nd day, the subjects were sacrificed. The right ovary and uterus were fixed for histological examinations, while the left ovary and uterus were homogenized and stored under suitable conditions for biochemical examinations. Hematoxylin & Eosin, Periodic Acid Schiff (PAS) and Masson Trichrome staining for histochemical analyzes; Caspase-3, iNOS and eNOS immuno staining were performed for immunohistochemical analyzes. Free FSH, LH and Estradiol (E2) hormone levels were measured by ELISA for biochemical analyzes. Measurements of GPx, MDA, GSH by spectrophotometric method and iNOS and eNOS protein measurements by ELISA method were performed. Results: A normal histological structure was observed in the ovary and uterus in the control group. In the VCD group, there was a decrease in the number of primordial and primary follicles, an increase in the number of corpus luteum and cystic follicles, a decrease in zona pellucida structure, increased connective tissue and vacuolized follicles. The ALA group was similar to the control group. In the VCD + ALA group, there was an increase in the number of primordial and primary follicles, a decrease in the number of corpus luteum and cystic follicles, a decrease in the amount of connective tissue, and zona pellucida structures were normal. In the case of caspase-3 immunohistochemistry for the demonstration of POY model in ovarian tissue, increased activity of caspase-3 in follicular cells was observed in the VCD group compared to the control group, and a decrease in the VCD + ALA group was observed. In the ALA group, results were close to the control. The eNOS immunohistochemical staining of the uterine tissue showed decreased VCD + ALA group as decreased immunoreactivity in the VCD group compared to the control group. Immunohistochemical staining for iNOS showed increased immunoreactivity in the VCD group compared to the control group and decreased in the VCD + ALA group. In the ALA group, eNOS and iNOS immunoreactivity were similar to the control group. Plasma FSH and LH hormone levels were increased in the VCD group compared to all groups, while in the VCD + ALA group, the levels were lower than in the VCD group. Estradiol level decreased in the VCD group compared to the other groups. It was observed that iNOS levels in the ovary and uterus tissues increased in the VCD group and decreased in the ALA treatment group. eNOS levels decreased in the VCD group and increased in the ALA applied group. MDA values increased in the VCD group compared to the control group in both ovary and uterus, and decreased in the VCD + ALA group. GPx and GSH values showed a decrease in the VCD group compared to the control group, while the VCD + ALA group showed an increase. Conclusion: In the result, it was observed that alpha lipoic acid has a protective effect on follicle reserve in rats with loss of follicle causing of primer ovarian failure and regulatory effect of eNOS and iNOS mechanisms in ovary and uterus. Lipoic acid using has also been shown to be beneficial in addition to the existing treatments in the clinic for preserving the follicle reserve and increasing the chances of pregnancy in cases of primer ovarian failure infertility and for planning pregnancies during perimenopausal periods.
Benzer Tezler
- Sıçanlarda 4-Vinylcyclohexene Diepoxide (VCD) ile oluşturulan deneysel Prematür Over Yetmezliği'ne Silymarin'in Etkisi
Effect of silymarine on experimental premature ovarian failure in rats induced by 4-Vinlycyclohexene diepoxide (VCD)
MUSTAFA ÇELİK
Yüksek Lisans
Türkçe
2009
Histoloji ve EmbriyolojiEskişehir Osmangazi ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. A.ERGİN AÇIKALIN
- 4-Vinilsikloheksen Diepoksid uygulanan sıçanlarda Dehidroepiandrosteron'un ovaryumlarda uzun dönem etkileri
Long term ovarian effects of Dehidroepiandrosterone on 4 Vinylcyclohexene Diepoxide applied rats
MEHMET CANER ÖZER
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2010
Histoloji ve EmbriyolojiEskişehir Osmangazi ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ERİNÇ ARAL
- Sıçanlarda 4-vinilsikloheksen diepoksid ile oluşturulan prematür ovaryan yetmezlik modelinde kurkuminin koruyucu etkisi
Protective effect of curcumin in premature ovarian failure model induced by 4-vinylcyclohexene diepoxide in rats
ALİ SERDAR KARATAŞ
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
Histoloji ve EmbriyolojiZonguldak Bülent Ecevit ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ METE KEÇECİ
- Sıçan in vivo düşük over rezervi modelinde androjen tedavisinin ovaryan folliküllerin gelişimine etkisi
Effect of androgen treatment on ovarian follicular development in diminished ovarian reserve in vivo rat model
CİHAN ÇAKIR
Doktora
Türkçe
2019
Histoloji ve EmbriyolojiBursa Uludağ ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. BERRİN AVCI
- Sıçan in vivo prematür ovaryan yetmezliği modelinde intraovaryan plateletten zengin plazma uygulamasının ovaryan foliküllerin gelişimine etkisi
The effect of intraovarian platelet-rich plasma injection on the development of ovarian follicles in the rat in vivo model of premature ovarian failure
GÖKTAN KUŞPINAR
Doktora
Türkçe
2023
Histoloji ve EmbriyolojiBursa Uludağ ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BERRİN AVCI