Elektrokonvulsif tedavinin etki mekanizmasının bir hayvan modelinde en erken gen proteinlerinin gösterilmesi yoluyla araştırılması
Başlık çevirisi mevcut değil.
- Tez No: 88886
- Danışmanlar: PROF. DR. TURGAY DALKARA
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Nöroloji, Neurology
- Anahtar Kelimeler: Elektrokonvülsif nöbet, c-Fos, FosB, immünohistokimya, fare iv, Elektrokonvülsif tedavi, Proteinler, Electroconvulsive seizure, c-Fos, FosB, immunohistochemistry, mouse, Electroconvulsive therapy, Proteins
- Yıl: 1999
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Temel Nörolojik Bilimler Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
ÖZET Bu çalışmada Swiss albino farelerde elektrokonvülsif nöbetlerin etkilediği beyin alanları ve etkilenme örüntüleri, nöron plastikliğinin bir göstergesi olarak kullanılan en erken gen proteinlerinden c-Fos ve FosB ekspresyonlan incelenerek araştırılmıştır. Farelere korneal elektrotlar aracılığıyla 16 miliamper şiddetinde, 2,5 ms aralıklı, 30 adet 15 milisaniyelik monofazik vuru verilerek 10-20 saniye süren jeneralize tonik- klonik nöbetler oluşturulmuştur. Klinikte elektrokonvülsif tedavinin etkisi tekrarlayan nöbetlerle ortaya çıktığı için tek nöbet uyarılan farelere ek olarak 7 kez nöbet geçirtilen hayvanlar da incelenmişlerdir. Yalancı işlem, tek elektrokonvülsif nöbet (EKN) ve 7 EKN uygulanan farelerde 3 ya da 24 saat sonra pentobarbital anestezisi altında kalp içi paraformaldehid perfüzyonuyla doku fiksasyonu yapıldıktan sonra, beyinleri çıkartılmıştır. Beyinler %30'luk sükroz çözeltisinde bekletildikten sonra kuru buzla dondurulup kayan mikrotomla 40 mikronluk dilimler halinde kesilmiştir. Çözeltide yüzer şekilde saklanan kesitlerde standart immünohistokinıyasal yöntemler kullanılarak c-Fos ve FosB proteinleri araştırılmıştır. Bu işlem için primer antikor olarak anti-c-Fos (1/200) ve anti-FosB (1/1000) antikorları, ardından da biyotinli sekonder antikorlar kullanılmış, renk verici olarak diaminobenzidin seçilmiştir. Kesitler mikroskop altında incelenerek boyanmanın miktarı ve dağılımı saptanmıştır. Bir yalancı uygulamadan 3 saat sonra, bazal ekspresyonun da yüksek bulunduğu talamusun paraventriküler çekirdeğinde, retrosplenial kortekste, piriform, entorinal ve singulat kortekslerde ve bunlara ek olarak bazal ekspresyonun çok düşük olduğu CAİ bölgesi ve amigdalada belirgin c-Fos ekspresyonu görülmüştür. Bir yalancı uygulamadan 3 saat sonra en yoğun FosB ekspresyonu ise hipokampusun CAİ bölgesinde görülmüş, amigdala, singulat korteks, retrosplenial korteks gibi limbik alanlarda da önemli ekspresyon artışı saptanmıştır. Tek EKN 'ten sonra c-Fos ve FosB ekspresyonu birçok beyin alanında yaygın olarak artmış, c-Fos ekspresyonu 24 saat içinde normale dönerken FosB ekspresyonu azalmakla beraber bazal düzeyinden yüksek kalmıştır. Yedi EKN sonrası c-Fos ekspresyon artışı çok azalmış buna karşın FosB ekspresyonu yüksek seyretmeye devam etmiştir. EKNTerin kronik etkilerini araştırmak amacıyla 7 EKN'ten 24 saat sonra incelenen hayvanlardaki FosB ekspresyonu, 7 kez yalancı uygulama yapılan hayvanlardaki ekspresyonla karşılaştırıldığında, limbik prefrontal korteks, singulat korteks, piriform korteks, somatosensoriyel korteks, entorinal korteks, dentat girus, hipokampusun CA3 alanı, lateral septum, mediyal striatum, talamusun paraventriküler çekirdeği ve amigdalada FosB ekspresyonunun daha yoğun olduğu görülmüştür (Mann-Withney-U testi, p<0.05). Yedi EKN geçiren farelerin beyinlerinde FosB ekspresyonu yoğunluğu bakımından korelasyon gösteren anatomik alanlar incelendiğinde limbik sistem içinde yer alan dentat girus, CA3 alanı, lateral septum, ve mediyal striatumun birbirleriyle ve prefrontal limbik korteks, singulat korteks, nükleus akumbens ve amigdalamn birbirleriyle korelasyonlarının yüksek olduğu saptanmıştır. Tedavi ile FosB ekspresyonunun kronik olarak arttığı nöronlarm protein sentez örüntülerini yani davranışlarını değiştirme yolunda oldukları, FosB ekspresyon artışının yüksek korelasyon gösterdiği bölgelerin de birbirleri ile işlevsel bağlan olduğu kabul edilirse, EKNTerin özellikle limbik sistem içindeki bölgelerde plastik değişikliklere yol açtığı ve belki de depresyonda da rol alan nöron ağlarının davranışlarının değişmesinde etkili olduğu söylenebilir. FosB proteini bu değişikliklerin izlenebilmesi için iyi bir deneysel araç olarak görünmektedir.
Özet (Çeviri)
ABSTRACT In this study, brain regions affected by electroconvulsive seizures were determined by using expression of C-Fos and FosB immediate early gene proteins as markers of neuronal plasticity. Generalized tonic-clonic seizures lasting 1 0-20 seconds were induced in Swiss albino mice with application of 30 monophasic pulses (of 15 ms duration, 16 mA intensity and separated by 2.5 ms intervals) through corneal electrodes. Mice in treatment groups were given single or multiple (seven), daily shocks in order to discern the effects of chronic treatment, which is more relevant to the electroconvulsive therapy applications in clinical practice. Sham-treated and seizure-induced mice were anesthetized with pentobarbital and intracardiacally perfused with paraformaldehyde three or twenty-four hours after treatment. Brains were then removed and kept in 30% sucrose solution overnight. Later, they were frozen on dry ice and cut into 40 micron-thick slices with a sliding microtome. Free floating sections were treated with anti-c-Fos (1/200) and anti-FosB (1/1000) antibodies, followed by biotinylated secondary antibodies and stained with diaminobenzidine. Mounted and coverslipped sections were examined with a light microscope to determine the intensity and distribution of staining. Three hours after single, sham treatment, c-Fos expression was intense in the paraventricular nucleus of thalamus, retrosplenial, piriform, entorhinal and cingulate cortices and in amygdala and CA1 region of hippocampus. Prominent FosB expression was observed in limbic structures such as CA1 region of hippocampus, amygdala, cingulate and retrosplenial cortices. There was an overall induction of c-Fos and FosB expression after a single seizure. Twenty-four hours later, FosB expression remained high while c-Fos expression returned to basal levels. After 7 seizures, c-Fos induction was grossly attenuated but FosB induction was unaffected and remained high. Twenty- four hours after the seventh seizure, FosB expression was higher in limbic prefrontal, cingulate, piriform, somatosensory, entorhinal cortices and in dentate gyrus, CA3 region of hippocampus, lateral septum, medial striatum, paraventricular nucleus and amygdala compared to the expression in seven-times sham treated animals (Mann-Withney-U test, p<0.05). Intensity of FosB expression showed high correlations among dentate gyrus, CA3 region, lateral septum, medial striatum and among prefrontal limbic cortex, cingulate cortex, nucleus accumbens and amygdala in these mice. Long-term FosB expression induction with chronic treatment in these areas may show that neurons prepare to change their protein synthesis patterns and behavior in response. Regions with high correlations of FosB expression patterns may indicate functional unity of neuronal networks involving those areas. These results demonstrate that electroconvulsive seizures cause plastic changes especially in limbic structures, which might play a role in their therapeutic actions. Examination of FosB expression seems to be a promising experimental tool to monitor these changes.
Benzer Tezler
- Elektrokonvulsif tedavinin antidepresan etkinliği ve yan etkileri
Başlık çevirisi yok
MUSTAFA ÖZTÜRKOĞLU
- Haftada iki gün ve haftada üç gün uygulanan elektrokonvülsif tedavilerin etkinliğinin karşılaştırılması
Comparison of the efficacy of electroconvulsive therapy given two vs. three days per week
ÖZLEM YALNIZ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2000
PsikiyatriAnkara ÜniversitesiPsikiyatri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ALİ KEMAL GÖĞÜŞ
- Elektrokonvülsif tedavide serum çinko düzeylerinin ve kognitif fonksiyonların incelenmesi
Başlık çevirisi yok
ÖZNUR ORAN
- Metoprololun fındık farelerinde maksimal elektroşok nöbetine (MEN) etkisi
Başlık çevirisi yok
SİBEL ÖZYAZGAN
Yüksek Lisans
Türkçe
1990
Eczacılık ve Farmakolojiİstanbul ÜniversitesiFarmakoloji Ana Bilim Dalı
PROF.DR. ZEKİ ÖZÜNER