Kromatografi ve spektrofotometre kullanılarak yapılan glütatyon ölçüm yöntemlerinin karşılaştırılması
Comparison of glutathione determining methods which use chromatography and spectrophotometry
- Tez No: 79760
- Danışmanlar: PROF. DR. GÜLÇİN TOKER
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Glütatyon, Kromatografi-yüksek basınçlı-sıvı, Mitokondriler, Spektrofotometri, Glutathione, Chromatography-high pressure-liquid, Mitochondria, Spectrophotometry
- Yıl: 1999
- Dil: Türkçe
- Üniversite: İstanbul Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
ÖZET GSH (y-Glutamil sisteinil giisin) bütün memeli hücrelerinde sentezlenen bir tripeptittir. GSH organizmanın hayatiyeti için mutlak gerekli bir moleküldür. GSH çok çeşitli hücre içi ve hücre dışı fonksiyonlarda görev alır. Bu fonksiyonların en önemlisi organizmada sürekli olarak oluşan serbest radikallerin yıkıcı etkilerinin Önlenmesinde anti oksidan olarak görev yapmasıdır. GSH'ın kanser.yaşlanma ve kardiyovasküler hastalıklar gibi çok çeşitli kronik hastalıkta koruyucu bir faktör olduğu bir çok çalışmada gösterilmiştir. GSH'ın GSSG'ye oranı oksidatif stress için çok önemlidir ve stres şiddeti ile sıkıca bağlantılıdır. Dokularda total glutatyonun % 99,5'dan fazlasını GSH oluşturur.GSSG miktarı ise çok düşüktür. Stabil bir molekül olmayan GSH'ın ölçümünde çok çeşitli yöntemler kullanılmaktadır. Bu yöntemler enzimatik.elektroforetik.kromatografik ve flow- sitometrik olarak özetlenebilir. Bu çalışmada günümüzde yaygın olarak kullanılan Ellman.Tietze ve HPLC yöntemleri ile düşük oranda GSH içeren sıçan karaciğer mitokondrisinde GSH değerleri ölçüldü ve elde edilen değerler birbiri ile kıyaslandı. Bu üç yöntemle elde edilen mitokondri GSH değerleri şu şekilde bulunmuştur. Ellman yöntemi ile ( ortalama: 2,801 nmol / mg protein ), Tietze yöntemi ile ( ortalama: 5,626 nmol / mg protein ), HPLC yöntemi ile ( ortalama: 5,570 nmol / mg protein ) Bu üç yöntem ile elde edilen sonuçlar birbiri ile kıyaslandığında, Tietze ve HPLC yöntemi ile elde edilen sonuçlar arasında güçlü bir korelasyon bulunmuştur. Ellman yöntemi ile elde edilen değerler diğer iki yöntemle elde edilen değerlerle korelasyon göstermediği gibi literatürde yayınlanan sıçan mitokondri GSH değeıieri(4-9 nmol / mg protein) ile de uyum göstermemiştir. Bununla birlikte Tietze ve HPLC yöntemleri ile elde edilen değerler literatürde yayınlanan değerlerle tam bir uyum içindedir. Bu üç yöntemin birbirlerine göre iyi ve kötü yanları kıyaslandığında şu sonuç ortaya çıkmaktadır; Ellman yöntemi bu üç yöntemin en az hassas olanıdır, GSH ölçümü için diğer iki yönteme göre daha çok numune gerektirmektedir. Pahalı donanım gerektirmemesi ve çabuk sonuçlanması bu yöntemin iyi yanları olabilir. 31Tietze yöntemi ise Ellman yönteminden yaklaşık 1000 kez daha hassasdır. Bu yöntem ortamdaki çok düşük GSH ( 10 ng / mi ) miktarlarının ölçülmesine imkan verir. Pahalı donanım gerektirmemesi, çabuk sonuçlanması ve düşük miktarda numune gerektirmesi bu yöntemin diğer olumlu taraflarıdır. HPLC yöntemi ise bu üç yöntemin en hassasıdır ve 2,5 pmol/ mi gibi çok düşük GSH miktarlarını ölçebilir. Ayrıca bu yöntemde kullanılan numune miktarı diğer iki yöntemdekinden çok daha azdır. Pahalı donanım gerektirmesi bu yöntemin en önemli dezavantajıdır. Ellman ve HPLC yöntemleri deney ortamındaki indirgenmiş glutatyonu (GSH) ölçerken.Tietze yöntemi ise total glutatyonu (GSH + GSSG) ölçer. Tietze yöntemi ile deney ortamındaki GSH, 2-vinilpridin ile baskılanarak GSSG'de ayrıca ölçülebilir. 32
Özet (Çeviri)
Özet çevirisi mevcut değil.
Benzer Tezler
- Omeprazol'ün polarografik, spektrofotometrik ve kromatografik miktar tayini
Başlık çevirisi yok
DİLEK DOĞRUKOL (AK)
Doktora
Türkçe
1993
Eczacılık ve FarmakolojiAnadolu ÜniversitesiAnalitik Kimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MUZAFFER TUNÇEL
- Akrilonitrilin poliakrilik asit varlığında kimyasal ve elektro kimyasal yöntemlerle yükseltgen graft kopolimerizasyonu
Başlık çevirisi yok
HAMİT YILDIRIM
Yüksek Lisans
Türkçe
1998
Kimyaİstanbul Teknik ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ABDÜLKADİR SEZAİ SARAÇ
- Ankara piyasasında satılan çeşitli dondurma, şekerleme ve pasta süslerine katılan sentetik gıda boyalarının kantitatif olarak araştırılması
The Quantitative analysis of synthetic food dyes added in ice cream, candy and pastry ornaments sold in the market, in Ankara
ALEV KALYONCU
- Determination of trace anions by ion chromatography using conductivity and UV-VIS detectors
Eser anyonların iletkenlik ve UV-VIS spektrofotometre dedektörlerini kullanarak iyon kromatografi ile tayini
HAMİDE ZORLU
- Yasa dışı kullanımda yakalanan kokain örneklerinde nitel ve nicel çalışmalar
Quantitative and qualitative analysis on illicitly abused cocaine samples
FAİK ÖZTOP
