Çocuklarda üriner sistem enfeksiyonu etkeni olan escherichia coli izolatlarında virülans faktörleri, filogenetik grup özellikleri ve ST131 klonu varlığının araştırılması
Investigation of virulence factors, phylogenetic group features, and the presence of ST131 clone in escherichia coli isolates, A urinary tract infection agent in children
- Tez No: 797320
- Danışmanlar: PROF. DR. GÜLLÜ İŞTAR DOLAPÇI
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: Mikrobiyoloji, Microbiology
- Anahtar Kelimeler: Escherichia coli, Filogenetik, Nüks, Virülans, Virülans faktörleri, Çocuklar, Üriner sistem, Üriner sistem enfeksiyonları, Escherichia coli, Phylogenetic, Recurrence, Virulence, Virulence factors, Children, Urinary tract, Urinary tract infections
- Yıl: 2023
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ankara Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Tıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
AMAÇ: Bu çalışmada; Ocak 2021 – Eylül 2021 tarihleri arasında Ankara Üniversitesi Tıp Fakültesi Cebeci Hastanesi Merkez Mikrobiyoloji Laboratuvarında 3-18 yaş arası çocuk hastaların üriner sistem enfeksiyonu (ÜSE) ön tanısıyla gönderilen idrar örneklerinden elde edilen 100 ilk, 100 tekrarlayan ÜSE etkeni toplam 200 adet Esherichia coli izolatının antimikrobiyal direnç oranları, filogenetik grup dağılımları, virülans faktörleri sıklığı ve O25b/ST131 klonuna ait olup olmadıkları değerlendirilmiştir. Elde edilen verilerin ilk ve tekrarlayan ÜSE etkenleri arasındaki ve O25b/ST131 klonuna ait olan ve olmayan izolatlar arasındaki dağılımları araştırılarak, ülkemizdeki sürveyans verilerine katkıda bulunmanın yanı sıra daha etkin bir ÜSE yönetimi için geliştirilebilecek tanı, tedavi ve profilaksi seçenekleri için yapılacak yeni çalışmalara ışık tutması amaçlanmıştır. GEREÇ VE YÖNTEM: Konvansiyonel yöntemler ile tanımlanan izolatların antimikrobiyal duyarlılıkları Kirby-Bauer disk difüzyon yöntemiyle, genişlemiş spektrumlu beta-laktamaz (GSBL) üretimleri çift disk sinerji testi ile değerlendirilmiş, biyofilm oluşumları mikroplak yöntemi, hemolizin üretimleri kanlı agara ekim tekniği ile araştırılmıştır. Filogenetik gruplandırma, O25b/ST131 klonu, virülans genlerinin araştırılması, izolatların moleküler düzeyde üropatojenik E. coli (UPEC) olarak sınıflandırılması ve virotiplendirilmelerinde polimeraz zincir reaksiyonu (PZR) kullanılmıştır. Aynı hastadan farklı zamanlarda toplanan izolatların arasındaki ilişkiyi ortaya koymak için değişken alanlı jel elektroforezi (PFGE) yapılmıştır. BULGULAR: En yüksek antimikrobiyal direnç oranı ampisilin (n=100, %50), amoksisilin-klavulanik asit (n=43, %21,5), sefazolin (n=99, %49,5), sefotaksim (n=43, %21,5) ve trimetoprim-sülfametoksazol'e (n=55, %27,5) karşı gözlenmiştir. Tekrarlayan ÜSE etkenlerinde (n=100) ilk ÜSE etkenlerine göre sefotaksim (n=29, %29), sefepim (n=25, %25) ve trimetoprim-sülfametoksazol (n=35, %35); O25b/ST131 izolatlarında (n=67) ise bu klonda olmayanlara (n=133) göre siprofloksasin (n=17, %25,4), amikasin (n=3, %4,5) ve gentamisin (n=10, %14,9) direnç oranları daha yüksek saptanmıştır (p<0,05). İzolatların 58'inin (%29) çoklu ilaca dirençli (ÇİD) olduğu, 38'inin (%19) GSBL ürettiği bulunmuştur. Tekrarlayan ÜSE etkenlerinde ÇİD ve/veya GSBL üreten izolatların oranı ilk ÜSE etkenlerine göre daha fazla bulunmuştur (sırasıyla n=36 (%36) / n=22 (%22); n=27 (%27) / n=11 (%11); p<0,05). İzolatların 3'ünde (%1,5) biyofilm oluşumu gözlenmiş, bu izolatların tamamı filogenetik grup A'ya ait bulunmuştur. Hemolizin üretimi izolatların 29'unda (%14,5) görülmüş olup, hemolizin üreten izolatlar içinde O25b/ST131 klonunun oranı bu klona ait olmayan izolatlara göre daha yüksek saptanmıştır (sırasıyla n=23 (%79) / n=6 (%21); p<0,0001). İzolatların 91'inin (%45,5) D, 75'inin (%37,5) B2, 25'inin (%12,5) A ve 9'unun (%4,5) B1 filogenetik grubunda yer aldığı bulunmuştur. B2 ve D grubunda yer alan izolatların antimikrobiyal dirençlerinin daha yüksek olduğu ve daha fazla sayıda virülans geni taşıdıkları saptanmıştır (p<0,05). İzolatların 67'si (%33,5) O25b/ST131 klonuna ait bulunmuştur. İlk ve tekrarlayan ÜSE etkenleri içindeki O25b/ST131 klonu oranları benzer bulunmuştur (p>0,05). İzolatların en sık adezyon [fimH n=194 (%97), papA n=114 (%57), yfcV n=99 (%49,5)] ve demir edinim sistemlerine [fyuA n=171 (%85,5), chuA n=156 (%78), iutA n=146 (%73)] ait virülans genleri taşıdıkları görülürken, en az oranda toksin grubu [vat n=64 (%32), hlyA n=31 (%15,5), cnf I n=13 (%6,5)] virülans genleri bulunmuştur. O25b/ST131 klonuna ait izolatlarda tüm virülans faktörleri bu klona ait olmayan izolatlara göre daha sık saptanmıştır (p<0,05). Antimikrobiyal direnç ile en sık birlikte görülen virülans geni papA olmuştur (ampisilin, amoksisilin-klavulanik asit, piperasilin-tazobaktam, sefazolin, sefotaksim, sefepim, siprofloksasin ve trimetoprim-sülfametoksazol direnci, p<0,05). İzolatların 101'i (%50,5)'i moleküler analizle UPEC olarak tanımlanmıştır. O25b/ST131 klonuna ait izolatların 65'i (%97), bu klona ait olmayan izolatların ise 36'sı (%27,1) moleküler analizle UPEC olarak tanımlanmıştır (p<0,0001). Çalışmamızda O25b/ST131 klonundaki izolatların 40'ı (%59,7) virotip B, 18'i (%26,9) virotip C, 3'ü (%4,5) virotip A ve 3'ü (%4,5) virotip D olarak saptanmıştır. PFGE ile 15 hastaya ait 33 izolat değerlendirilmiş, dokuz hastanın (%60), sonradan toplanan izolatı ile ilk izolatının aynı profilde olduğu görülmüştür. SONUÇ: E. coli'ye bağlı gelişen ÜSE çocuklarda önemli bir sağlık sorunudur. Özellikle E. coli O25b/ST131 klonu virülans faktörü ve antimikrobiyal direnç oranlarının yüksek olması sebebiyle ciddi bir halk sağlığı sorunu haline gelmektedir. Bu klona ilişkin sürveyansa, tanı testlerine, tedavi algoritmalarına ve önleyici tedbirlere odaklanılması zorlu E. coli enfeksiyonlarına karşı koymada yardımcı olacak, yeni profilaksi, tedavi veya aşı stratejilerinin geliştirilmesine, taşıyıcılık ve kolonizasyonun önlenmesine yönelik çalışmalara ışık tutacaktır.
Özet (Çeviri)
AIM: In this study; antimicrobial resistance rates, phylogenetic group distributions, virulence factors frequency, and belonging to the O25b/ST131 clone of a total of 200 Escherichia coli isolates (causative agents of 100 first and 100 recurrent urinary tract infections (UTI)) isolated from pediatric patients' (3-18 years) mid-stream urine samples between January 2021 and September 2021. The isolates obtained from Ankara University Faculty of Medicine Cebeci Hospital Central Microbiology Laboratory with the preliminary diagnosis of UTI of pediatric patients. In addition to contributing to the surveillance data in our country, it is aimed to shed light on new studies for diagnosis, treatment and prophylaxis options that can be developed for a more effective UTI management by investigating the distribution of the obtained data between the first and recurrent UTI agents and between the isolates belonging and not belonging to the O25b/ST131 clone. MATERIALS AND METHODS: Antimicrobial susceptibility testing of the conventionally identified E. coli isolates evaluated by Kirby-Bauer disc diffusion method, extended spectrum beta-lactamase (ESBL) production assessed by double disc synergy test, biofilm formation investigated by microplate method and hemolysin production detected by blood agar cultivation technique. Polymerase chain reaction (PCR) was used for phylogenetic grouping, investigation of the O25b/ST131 clone and virulence genes, identification of uropathogenic E. coli (UPEC) at the molecular level, and virotyping. Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) was performed to reveal the relationship between isolates collected at different times from the same patient. RESULTS: The highest antimicrobial resistance rates were against ampicillin (n=100, 50%), amoxicillin-clavulanic acid (n=43, 21.5%), cefazolin (n=99, 49.5%), cefotaxime (n=43, 21.5%) and trimethoprim-sulfamethoxazole (n=55, 27.5%). In recurrent UTI agents (n=100), according to the first UTI agents, resistance rates were higher for cefotaxime (n=29, 29%), cefepime (n=25, 25%) and trimethoprim-sulfamethoxazole (n=35, 35%); in O25b/ST131 isolates (n=67), comparing to the non-O25b/ST131 isolates (n=133), the resistance rates were higher for ciprofloxacin (n=17, 25.4%), amikacin (n=3, 4.5%) and gentamicin (n=10, 14.9%) (p<0,05). The rate of multidrug-resistant (MDR) and extended-spectrum beta-lactamase (ESBL) producing isolates was found to be 29% (n=58) and 19% (n=38), respectively. The rates of MDR and/or ESBL were higher in recurrent UTI isolates than in first UTI agents (n=36 (36%) vs n=22 (22%); n=27 (27%) vs n=11 (11%) respectively, p<0.05). Biofilm formation was observed in three (1.5%) of the isolates and all of them were found to belong to phylogenetic group A. Hemolysis production was observed in 29 (14.5%) of the isolates, and the ratio of the O25b/ST131 clone in these isolates was found to be higher than the non-O25b/ST131 (n=23 (79%) and n=6 (21%) respectively, p<0.0001). It was found that 91 (45.5%) of the isolates were in D, 75 (37.5%) in B2, 25 (12.5%) in A, and 9 (4.5%) in B1 phylogenetic group. It was determined that the isolates in groups B2 and D had higher antimicrobial resistance and carried more virulence genes (p<0,05). Sixty-seven (33.5%) of the isolates were found to belong to the O25b/ST131 clone. The rates of the O25b/ST131 clone among the first and recurrent UTI agents were found to be similar (p>0,05). The most common virulence factor group were adhesins [fimH n=194 (97%), papA n=114 (57%), yfcV n=99 (49.5%)] followed by iron uptake systems [fyuA n=171 (85.5%), chuA n=156 (78%), iutA n=146 (73%)], while the least detected virulence genes were found in toxin group [vat n=64 (32%), hlyA n=31 (15.5%), cnf I n=13 (6.5%)]. All virulence factors were detected more frequently in isolates belonging to the O25b/ST131 clone compared to isolates not belonging to this clone (p<0.05). The most common virulence gene detected with antimicrobial resistance was papA (ampicillin, amoxicillin-clavulanic acid, piperacillin-tazobactam, cefazolin, cefotaxime, cefepime, ciprofloxacin and trimethoprim-sulfamethoxazole resistance, p<0.05). One hundred and one (50.5%) of the isolates were defined as UPEC at molecular level. Sixty-five (97%) of the isolates belonging to the O25b/ST131 clone and 36 (27.1%) of the isolates not belonging to this clone were defined as molecular UPEC (p<0.0001). In our study, 40 (59.7%) of the isolates in the O25b/ST131 clone were detemined as virotype B, while 18 (26.9%) of them as virotype C, 3 (4.5%) of them as virotype A and 3 (4,5%) of them were as virotype D. Thirty-three E. coli isolated from 15 patients were evaluated with PFGE, and it was observed that the latter isolate and the first isolate of nine patients (60%) had the same band profile. CONCLUSIONS: UTI caused by E. coli is an important health problem in children. Especially, E. coli O25b/ST131 clone is becoming a serious public health problem due to its high virulence and antimicrobial resistance rates. Focusing on surveillance, diagnostic testing, treatment algorithms, and preventive measures for this clone will help to manage challenging E. coli infections, and will shed light on the development of new prophylaxis, treatment or vaccine strategies, and studies to prevent carriage and colonization.
Benzer Tezler
- Çocuk idrar örneklerinden escherichia coli izolasyonu; genişlemiş spektrumlu beta-laktamaz pozitif izolatların antibiyotik duyarlılıkları, direnç ile virülens genlerinin analizi ve filogenetik gruplarının belirlenmesi
Escherichia coli isolation from child urine samples; antibiotic sensitivity of expanded spectrum beta-lactamase positive isolates, analysis of resistance and virulian genes and determination of phylogenetic groups
HİCRAN ALKAN
- Sivas'ta kadınların işgücüne katılım farklılıkları
Başlık çevirisi yok
BİNNUR ERCEM
Yüksek Lisans
Türkçe
1984
SosyolojiCumhuriyet ÜniversitesiKurumlar Sosyolojisi Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. FARUK KOCACIK
- İlkokul çağı erkek çocuklarında inmemiş testis anomalisi ve insidansı
The anomaly and incidence of cryptorchidism in primary school boys
SERDAR SEZGİN
- Türkiye'de korunmaya muhtaç çocuklar meselesine mukayeseli bir bakış ve Bursa örneği
Başlık çevirisi yok
SERPİL AYTAÇ
- Baba yoksunluğunun benlik kavramına etkisi ve babasız öğrencilerin problemlerinin hangi alanlarda yoğunlaştığının saptanması
Başlık çevirisi yok
OYA GÜNGÖRMÜŞ
Yüksek Lisans
Türkçe
1986
Çocuk Sağlığı ve Hastalıklarıİstanbul ÜniversitesiGelişim Psikolojisi Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. AYSEL EKŞİ