Mezenkimal kök hücreler ve immun sistem arasındaki ilişkinin in vitro koşullarda değerlendirilmesi
Evaluation of the relationship between mesenchymal stem cells and immune system in in vitro conditions
- Tez No: 723033
- Danışmanlar: PROF. DR. FATMA OĞUZ
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Tıbbi Biyoloji, Medical Biology
- Anahtar Kelimeler: Fetal kan, Kök hücreler, Umbilikal kord, İmmün sistem, İmmünomodülasyon, İn vitro, Fetal blood, Stem cells, Umbilical cord, Immune system, Immunomodulation, In vitro
- Yıl: 2022
- Dil: Türkçe
- Üniversite: İstanbul Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Mezenkimal kök hücreler (MKH)'lerin klinik uygulamalarından önce hücrelerin immünmodülatör özelliklerinin belirlenmesi gerekmektedir. Çalışmamızda MKH'lerin immün sistem hücreleri tarafından salgılanan sitokinlere olan etkisinin belirlenmesi hedeflendi. Periferal kan mononükler hücreler (PKMH) ve MKH ko-kültür öncesi ve sonrası CD4+ T hücrelerin hücre içi sitokin seviyeleri (Interlökin-4 (IL-4), Interferon-γ (IFNγ), and Interlökin-17 (IL-17)) akım sitometri ile tespit edildi. Aynı zamanda Tümör büyüme faktörü (TGF)- β, IL-4, IL-17, IFNγ süpernatant sitokin seviyeleri ELISA ile ölçüldü. Çalışmamızda MKH'ler kordon kanı (KK) ve Wharton Jeli'nden (WJ) izole edilmiş olup plastik adherent olmaları mikroskopta ve yüzey belirteçleri (CD44 (%100), CD73 (%99,6), CD90 (%100), CD105 (%88)) akım sitometri yöntemiyle gösterilmiştir. Çalışmada, ko-kültür MKH/PKMH 1/5 ve 1/10 oranlarında, 24 saat ve 72 saat inkübasyon süreleri hem KK hem de WJ MKH'leri kullanıldı. Çalışmada KK-MKH'lerle stimule edilen PKMH'leri ko-kültür sonuçları kültür öncesiyle karşılaştırıldığında farklı immünmodülatör özellikler gösterdikleri bulunmuştur. Pro-inflamatuvar sitokinlerden IFNγ ve IL-17 hem KK-MKH hem de WJ-MKH ve PKMH ko-kültürü sonrası hücre içi seviyeleri artış gösterirken süpernatanttaki sitokin seviyeleri anlamlı derecede düşmüştür (p<0,05). Anti-inflamatuvar sitokinlerden IL-4'ün ko-kültür sonrası hücre içi seviyesi anlamlı derecede artarken süpernatantta anlamlı derecede azalmıştır (p<0,05). Anti-inflamatuvar sitokin olan TGF- β'ın ise süpernatanttaki seviyesi hem KK-MKH hem de WJ-MKH için anlamlı derecede azalmıştır (p<0,05). MKH ve immün sistem hücrelerinin interaksiyonu karmaşık bir süreci başlatmaktadır. Kordon kanı ve WJ-MKH ile PKMH'ler arasındaki ilişkilerin belirlendiği bu çalışma ile MKH'lerin uygulanma öncesi ve sonrasında pro-inflamatuvar ve anti-inflamatuvar özellikleri tespit edilerek en uygun MKH kaynağının seçilmesi ve immünmodülasyon etkilerinin belirlenmesi açısından klinik çalışmalara ışık tutacaktır.
Özet (Çeviri)
Determination the immunomodulatory properties of mesenchymal stem cells (MSCs) is necessary before clinical applications. In this study, it was aimed to determine the effect of MSCs on cytokines secreted by immune system cells. Intracellular cytokine levels (Interleukin-4 (IL-4), Interferon-γ (IFNγ), and Interleukin-17 (IL-17)) detected by akım cytometry before and after co-culture between peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and MCSs. At the same time, tumor growth factor (TGF)-β, IL-4, IL-17, IFNγ supernatant cytokine levels were measured by ELISA. In our study, MSCs were isolated from cord blood (CB) and Wharton's Jelly (WJ), and their plastic adherence was observed under the microscope and surface markers (CD44 (100%), CD73 (99.6%), CD90 (100%), CD105 ( 88%)) shown by akım cytometry method. In the study, both CB and WJ-MSCs were used in co-culture MSC/PBMC ratios of 1/5 and 1/10, incubation times of 24 hours and 72 hours. In this study, it was found that PBMCs stimulated with CB-MSCs showed different immunomodulatory properties when the results of co-culture were compared with those before culture. While the intracellular levels of pro-inflammatory cytokines IFNγ and IL-17 increased after both CB-MSC and WJ-MSC and PBMC co-culture, cytokine levels in the supernatant decreased significantly (p<0.05). Among the anti-inflammatory cytokines, IL-4 increased significantly after co-culture, but decreased significantly from the supernatant (p<0.05). The level of TGF-β, which is an anti-inflammatory cytokine, in the supernatant was significantly decreased for both CB-MSC and WJ-MSC (p<0.05). It was reached with the results obtained, the effects of cord blood and WJ-MSC on PBMC were determined and the pro-inflammatory and anti-inflammatory properties of MSCs were determined before and after the application, contributing to the scientific platform.The interaction of MSC and immune system cells initiates a complex process. Therefore, more comprehensive studies are needed to select the most appropriate MSC source and to determine its immunomodulation effects for future clinical researches.
Benzer Tezler
- LPS indüklü HMC3 mikroglia nöroinflamasyon modelinde Topo IIß gen ifadesinin susturulmasının incelenmesi
Investigation of silencing of Topo IIß gene expression in LPS-induced HMC3 microglia neuroinflammation model
MELİKE CANSEL EREN
- Assessment of the effects of melatonin on the funtional deficits induced by cellular stress in obese donor derived mesenchymal STEM cells
Melatonin'in obez donor mezenkimal kök hücrelerinde hücresel strese bağlı olarak oluşan fonksiyon bozuklukları üzerindeki etkilerinin değerlendirilmesi
ECE GİZEM POLAT
Yüksek Lisans
İngilizce
2024
BiyolojiHacettepe ÜniversitesiKök Hücre Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. FATİMA SUSANNA FAUSTINA AERTS KAYA
- Differentiation of vessel wall cells from umbilical cord blood mesenchymal cells for vascular tissue engineering
Damar doku mühendisliği amacıyla kordon kanı mezenkimal hücrelerinden damar duvarı endotel hücre farklılaşması
PINAR HÜNER OMAY
Doktora
İngilizce
2016
Polimer Bilim ve Teknolojisiİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
PROF. DR. HAKAN BERMEK
- Spatial modeling of tumor microenvironment
Tümör mikroortamin uzaysal modellenmesi̇
BARIŞ ALTUNKARA
Yüksek Lisans
İngilizce
2023
BiyomühendislikGebze Teknik ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ PINAR PİR
- Kanser kök hücre lizatı ile yüklenmiş dendritik hücrelerin antitümör immün yanıtlarının incelenmesi
Investigation of antitumor immune responses of dendritic cells loaded with cancer stem cell lysate
EDA AÇIKGÖZ
Doktora
Türkçe
2019
Histoloji ve EmbriyolojiEge ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÜLPERİ ÖKTEM