The optimization of the high salt, low salt, equilibration, and elution buffers of the downstream process for the protein-a purification of cetuximab, a biosimilar, with phosphate and citrate buffer solutions
Bir biyobenzer olan cetuxımab molekülünün alt akım prosesinde, protein-a saflaştırılmasında kullanılacak olan yüksek tuz, düşük tuz, ekilibrasyon ve elüsyon tamponlarının fosfat ve sitrat tampon çözeltileri kullanılarak optimize edilmesi
- Tez No: 696291
- Danışmanlar: PROF. DR. AHMET AYDIN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoteknoloji, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2021
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Yeditepe Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Biyoteknoloji Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
İnsanda oluşan en hasar verici kanser türlerinden ikisi baş ve boyun tümörleridir. Bu tümörler damar sistemleri geliştirerek kendilerini besler ve büyütürler. Cetuximab molekülü baş ve boyun tümör hücrelerinin Epidermal Büyüme Faktörü reseptörlerini inhibe eder. Bu sayede tümörlerin damar sistemi geliştirmesini engelleyen Cetuximab, erken evre tedavilerde yaşam süresinde uzama, yaşam kalitesinde artış gibi umut vadeden sonuçlar ortaya koymuştur. Cetuximab molekülünün biyobenzerini elde etmek için yola çıkan Nobel İlaç'ın, üretim miktarını 2000 litrelik ticari üretim boyutuna taşınabilmesi için bu kimyasal saflaştırma ve üretme sürecini optimize etmesi gerekmektedir. Bu tez alt akım sürecinin optimizasyonunun ilk aşamasının tampon çözelti seçimini ele almaktadır. Bu aşamada yer alan Protein-A afinite kromatografisi sitrat ve fosfat tampon çözeltilerinde gerçekleştirilmiş, yapılan deneyler analitik HPLC cihazlarıyla daha küçük ölçeklerde tekrar edilmiş ve doğrulanmış, titre ve verim hesaplamaları yapılmıştır. Daha sonra elusyon aşamasından ayrıştırılan proteinin orijinal molekülün asidik, bazik ve ana varyantına olan benzerlik yüzdeleri ölçülmüştür. Tüm yapılan deneylerin sonunda fosfat tamponu ile perçekleştirilen Protein-A kromatografisinin protein geri kazanımı açısından %95'lik verimlilik barajını aştığı, katyon değişim kromatografisi analizinde de asidik, ana ve bazik varyantların orjinal moleküle benzerliği açısından yüzdesel olarak en yakın olduğu görülmüştür.
Özet (Çeviri)
Two of the most vicious cancer types in humans are head and neck tumors. These tumors build vascular structures within to feed themselves and grow. The molecule Cetuximab inhibits the Epidermal Growth Factor receptors of these tumor cells. This way, with preventing them from building vascular structures, in the early stage treatments of these tumors, Cetuximab is promising hope with extended life expectancy and increased life quality. Nobel Pharmaceuticals, a company aiming to produce biosimilars of the Cetuximab molecule, needs to optimize the chemical process of purifying and producing the molecule to reach the 2000 liter production size for the market. This thesis has focused on the downstream process's first step, namely the buffer solution choice optimization. In this step, the Protein-A affinity chromatography has been performed in phosphate and citrate buffer solutions, the experiments have been repeated in analytical HPLC devices with smaller sizes and verified, and titer and yield calculations have been performed. Afterward, the protein, taken from the elution step, has been compared to the original molecule with its acidic, basic, and main variants. After all experiments and calculations, it has been found that the Protein-A chromatography performed with the phosphate buffer has performed above the 95% percent minimum expectancy of protein recovery. The proteins obtained from the phosphate buffer experiments have also scored highest in the cation exchange chromatography analysis, with the closest percentile values to the original molecule's acidic, basic and main variants.
Benzer Tezler
- Synthesis and optimization of the transition metal boride nanoparticles and their possible magnetic/hybrid composite applications
Başlık çevirisi yok
SINA KHOSHSIMA
Doktora
İngilizce
2020
Metalurji MühendisliğiKoç ÜniversitesiMalzeme Bilimi ve Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET SUAT SOMER
DR. ÖĞR. ÜYESİ ÖZGE BALCI
- Stres altındaki bazı bitkilerde biyoteknolojik önemi olan fenilalanin amonyum liyaz enziminin aktivitesinin belirlenmesi, optimizasyonu ve karakterizasyonu
Determination of enzyme activity, optimization and characterization of the biotechnologically important phenylalanine ammonia lyase from some plants under stress
SEDA ŞİRİN
- Haloarkeal proteaz üretimi üzerine kültür koşullarının optimizasyonu ve enzim aktivitesinin karakterizasyonu
Optimization of culture conditions on the haloarchaeal protease production and characterization of enzyme activity
ÜMİT TOR
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
BiyolojiMustafa Kemal ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. BİRGÜL ÖZCAN
- Ergimiş tuz elektroliz yöntemiyle çeliklerin borlanması ve proses parametrelerinin optimizasyonu
Electrochemical Boronizing of steels in molten salt and optimization of process parameters
GÜLDEM KARTAL
Yüksek Lisans
Türkçe
2004
Metalurji Mühendisliğiİstanbul Teknik ÜniversitesiMalzeme Bilimi ve Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. SERVET TİMUR
- Yoğunlaştırılmış güneş enerjisi santrallerinde kullanılmak üzere termofiziksel özellikleri iyileştirilmiş nitrat bazlı tuz eriyik/nanogözenekli alumina membran kompozit yapıların tasarlanması
Design of nitrate-based molten salt/nanoporous aluminum membrane composite structures with improved thermophysical properties for use in concentrated solar termal plants
MUSTAFA GÖKTÜRK YAZLAK
Yüksek Lisans
Türkçe
2020
Metalurji MühendisliğiTobb Ekonomi ve Teknoloji ÜniversitesiMikro ve Nanoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
DOÇ. DR. HATİCE DURAN DURMUŞ