Investigation of the effect of B. spergulifolius extracts on insulin-resistant 3T3-L1 adipocytes
B. spergulifolius ekstraktlarının insüline dayanıklı 3T3-L1 adipositler üzerindeki etkisinin araştırılması
- Tez No: 666265
- Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ SİBEL ÖZDAŞ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Moleküler Tıp, Biyomühendislik, Molecular Medicine, Bioengineering
- Anahtar Kelimeler: Bolanthus spergulifolius, diyabet, insulin dinci, 3T3-L1 adipositler, glikoz taşıyıcı tip 4, anti-diyabetik, Bolanthus spergulifolius, diabetes mellitus, insulin-resistant, 3T3-L1 adipocytes, Glucose transporter-4, anti-diabetic
- Yıl: 2021
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Adana Alparslan Türkeş Bilim ve Teknoloji Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Diabetes mellitus (DM), yetersiz insülin sekresyonu ve / veya insülin etkisi kusuru nedeniyle metabolik sonuçlar, kronik hiperglisemi ile karakterize metabolik bir hastalıktır. DM sıklıkla kardiyovasküler hastalıklara, göz, böbrek ve sinir sisteminde çeşitli komplikasyonlara neden olur. Tip 2 DM (T2DM), toplam DM'nin yaklaşık % 90'ını oluşturur. Bu nedenle, T2DM için yeni terapötik yaklaşımların ve potansiyel sinyal yolaklarındaki molekülleri hedefleyen alternatif, doğal ajanların araştırılması çok önemlidir. Tıbbi bitkiler, alternatif yeni ilaç etken maddelerinin araştırılmasında çok önemli kaynaklardır. Bolanthus spergulifolius (B. spergulifolius), Caryophyllaceae ailesinin cinslerinden biridir. Bu çalışmada B. spergulifolius ekstraktlarının 3T3-L1 adipositler üzerindeki potansiyel anti-diyabetik etkilerinin in-vitro olarak araştırılması amaçlanmıştır. B. spergulifolius, metanol (MeOH), etilasetat (EA) ve su ile ekstrakte edildi ve toplam fenolik içerikleri (TPC) Folin-Ciocalteu yöntemi ile değerlendirildi. Yüksek TPC (sulu< MeOH< EA) gösteren B.spergulifolius ekstraktlarının olgun 3T3-L1 adipositlerideki sitotoksik etkisi MTT asay ile değerlendirildi ve hücre canlılığında %50 azalmaya neden olan ekstrakt konsantrasyonları (IC50) belirlendi. MeOH, EA ve Sulu ekstraktlarının IC50 konsantrasyonları sırasıyla 305.7 ± 5.583 µg/mL, 567.4 ± 3.008 µg/mL ve 418.3 ± 4.390 µg/mL olarak gözlendi ve ileri deneylerde kullanılmak üzere seçildi için. Ölü/canlı hücre asay ile MeOH, EA ve Sulu ekstrelerinin sitotoksik etkisi doğrulanmıştır (sıırasıyla, %69.75 ± 1.70, %61.75 ± 1.70, %70 ± 4.24 ve hepsi için P< 0.05). Ayrıca, ekstrelerin olgun 3T3-L1 adipositlerinde lipid birikimi üzerindeki etkileri Oil-Red-O boyama testi ile değerlendirildi. Tedavi edilmemiş olgun adipositlere kıyasla ekstraktlar ile tedavi edilmiş olgun adipositlerde lipid birikimi etkili bir şekilde azalmıştır (tümü için P< 0.05). Ayrıca ekstraktların Bax ve Bcl-2 tarafından düzenlenen apoptoz üzerindeki etkisi qRT-PCR ile araştırılmıştır. Tedavi edilmemiş adipositlere kıyasla ekstraktlar, pro-apoptotik Bax ekspresyonunu artırarak, anti-apoptotik Bcl-2 gen ekspresyonunu azaltarak apoptozu önemli ölçüde indükledi (hepsi için P< 0.05). İnsülin direnci ile bağlantılı Glut-4 ekspresyonu, qRT-PCR, Western-blot ve Immunofluorescence boyama ile değerlendirildi. Buna paralel olarak, tedavi edilmemiş olgun adipositlere kıyasla ekstraktlarla tedavi edilen adipositlerde Glut-4 ekspresyonu, önemli ölçüde daha yüksekti (hepsi için P< 0.05). Ekstraktlar, çizik yara asay uygulamasından 30 saat sonra hücre göçünü önemli ölçüde baskıladı (hepsi için P< 0.05). Hücre morfolojisi ve hücre-çapı faz-kontrast mikroskobu, taramalı elektron mikroskobu (SEM), İmmünofloresans (anti-F-aktin ile) ve Giemsa boyaması ile değerlendirildi. Ekstraktlarla tedavi edilen adipositler kısmen küresel morfolojiyi kaybetti ve tedavi edilmemiş adipositlere kıyasla daha küçük hücre çapı gösterdi (hepsi için P< 0.05). Sonuç olarak, çalışmamız B. spergulifolius ekstraktlarının apoptozu indüklediğini, lipid birikimini azalttığını, yarayı iyileşmesini geciktirdiğini, Glut-4 seviyesini arttırdığını ve bu yolla DM'de insülin direncinin azalmasına katkıda bulunabileceğini göstermektedir.
Özet (Çeviri)
Diabetes mellitus (DM) is a metabolic disease with chronic hyperglycemia characterized by metabolic outcomes due to insufficient insulin secretion and/or insulin effect defect. DM often causes cardiovascular diseases and various complications on the eye, kidney and nervous system. Type 2 DM (T2DM) accounts for approximately 90% of the total DM. Therefore, it is very important to investigate new therapeutic approaches for T2DM and alternative, natural agents that target molecules in potential signal pathways. Medicinal plants are very significant resources in the research of alternative new drug active ingredients. Bolanthus spergulifolius (B. spergulifolius) is one of the genera of the family Caryophyllaceae. In the present study, it was aimed to investigate the potential anti-diabetic effects in-vitro of B. spergulifolius extracts on 3T3-L1 adipocytes. B. spergulifolius were extracted with methanol (MeOH), ethylacetate (EA) and Aqueous and evaluated for their total phenolic content (TPC) by Folin-Ciocalteu method. B. spergulifolius extracts showing highly TPC (Aqueous< MeOH< EA) and their different concentrations were caried out on preadipocytes differentiated in to mature 3T3-L1 adipocytes to investigate their half-maximal (50%) inhibitory concentration (IC50) by using MTT assay. The IC50 concentrations of MeOH, EA and Aqueous extracts were observed as 305.7 ± 5.583 µg/mL, 567.4 ± 3.008 µg/mL and 418.3 ± 4.390 µg/mL and were used for further experiments. A live/dead assay further confirmed the cytotoxic effect of MeOH, EA and Aqueous extracts (respectively, 69.75 ± 1.70%, 61.75 ± 1.70%, 70 ± 4.24% and for all P< 0.05). Also, effects of extracts on lipid accumulation in mature 3T3-L1 adipocytes were evaluated by Oil-Red O staining assay. The extracts effectively decreased lipid-accumulation compared to untreated adipocytes (for all P< 0.05). Morever, effect of extracts on apoptosis regulated by the Bax and Bcl-2 was investegated by qRT-PCR. The extracts significantly induced apoptosis by up-regulating pro-apoptotic Bax expression but down-regulating anti-apoptotic Bcl-2 gene expression compared to untreated adipocytes (for all P< 0.05). The Glut-4 expression linked with insulin resistance was determined by qRT-PCR, Western-blot and Immunofluorescence staining. In parallel, expression of Glut-4 in adipocytes treated with extracts was significantly lower compared to untreated adipocytes (for all P< 0.05). Extracts significantly supressed cell migration after 30 h of wounding in a scratch-assay (for all P< 0.05). Cell morphology and diameter were further evaluated by phase-contrast microscopy, Scanning electron microscope (SEM), Immunofluorescence (with F-Actin) and Giemsa staining. The adipocytes treated with extracts partially lost spherical morphology and showed smaller cell-diameter compared to untreated adipocytes (for all P< 0.05). In conclusion, these results suggest that extracts of B. spergulifolius causes to an induce apoptosis, a decrease lipid-accumulation, wound healing, Glut-4 level and migth contribute to the reducing of insulin-resistance in DM.
Benzer Tezler
- Investigation of the effect of phytic acid and its relationship with inhibin B, trace element and some biochemical markers in infertile men
Kısır erkeklerde fitik asitin etkisi ve inhibin B, eser element ve bazı biyokimyasal işaretlerle ilişkisinin incelenmesi
HUSSEIN ALI NAYYEF NAYYEF
- AZ31 magnezyum alaşımı üzerine Ni-B esaslı kompozitlerinakımsız olarak kaplanmasının korozyon direnci üzerineetkisinin incelenmesi
Investigation of the effect of ni-b based composites onthe corrosion resistance of Ni-B based composites on AZ31magnesium alloy
SALAH ELDIN K A ABDULHAMID
Doktora
Türkçe
2020
Mühendislik BilimleriKastamonu ÜniversitesiMalzeme Bilimi ve Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FATMA KANDEMİRLİ
- Golgi stresinin foliküler T ve B hücre yüzeyinde HLA-G ekspresyonuna etkisinin araştırılması
Investigation of the effect of Golgi stress on HLA-G expression on follicular T and B cell surface
MİRAY KAVUZLU
Doktora
Türkçe
2024
Tıbbi BiyolojiBaşkent ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BİLKAY BAŞTÜRK
- Acil servise başvuran kalp yetmezliği alevlenmesi hastalarında B çizgi sayısı değişikliğinin mortaliteyi öngörmedeki etkisinin araştırılması: İleriye dönük kohort çalışma
Investigation of the effect of B-line count changes on predicting mortality in patients presenting to the emergency department with acute heart failure exacerbation: A prospective cohort study
EGEMEN TAVRAK
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2025
Acil TıpEskişehir Osmangazi ÜniversitesiAcil Tıp Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MUHAMMED EVVAH KARAKILIÇ
- Trakya Üniversitesi Sağlık Araştırma ve Uygulama Merkezine başvuran tip II diyabetli hastalarda enos 4A/B gen polimorfizminin diyabetik nefropati gelişimine etkisinin araştırılması
İnvestigation of the effect of enos 4A/B gene polymorphism in developing diabetic nephropathy in TYPE II diabetic pateints in the applicant of Trakya University Health Center for Medical Research and Practice subjects
SÜLEYMAN İPEK
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
BiyofizikTrakya ÜniversitesiBiyofizik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TEVFİK GÜLYAŞAR
