Therapeutic monoclonal antibody (IGG) binding properties with tnf-α and fcγ receptor under stress conditions
Terapötik monoklonal antikorun (İGG) stres koşullari altinda tnf-α'ya ve fcγ reseptörüne bağlanma özellikleri
- Tez No: 646053
- Danışmanlar: DOÇ. DR. ÖZGE CAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoteknoloji, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Antikorlar, Antikorlar-monoklonal, Stres, Terapötik yöntemler, Tümör nekroz faktörü-alfa, Yüzey plazmon rezonans teorisi, Antibodies, Antibodies-monoclonal, Stress, Therapeutics, Tumor necrosis factor-alpha, Surface plasmon resonance theory
- Yıl: 2019
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Acıbadem Mehmet Ali Aydınlar Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Medikal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Son yıllarda monoklonal antikorların mekanızmalarının anlaşılması bir çok hastalığın tedavisi için umut olmuştur. Ek olarak teknolojinin her geçen gün gelişmesi ile birlikte terapötiklerin keşfi hız kazanmıştır ve piyasada her geçen payı artmaktadır. Terapötik amaçla kullanılan monoklonal antikorların (mAb) bağlanma özelliklerinin belirlenmesi medikal biyoteknoloji alanında büyük önem taşımaktadır. Çalışmada antikor/antijen ve antikor/reseptör bağlanma davranışları yüzey plazmon rezonansı tekniği ile incelenmiştir. Bu teknik sayesinde, in vitro olarak terapötik ilaçların hedef molekül veya reseptör ile bağlanma kinetik analizleri gerçek zamanlı olarak incelenmiştir. Yapılan çalışma, protein A/G immobilize edilmiş çip yüzeyinde IgG/TNF-α bağlanmasını ve anti histidin antikor ile immobilize edilmiş çip yüzeyinde Fc reseptörlerinin (FcγR) IgG'ye bağlanmasını kapsamaktadır. İlk olarak metodlar optimize edilmiştir, sonrasında mAb'lara kimyasal deamidasyon stresi uygulanarak (pH3 ve pH9, 24 ve 72 saat) bu iki yaklaşım ile Fc bölgesinin bağlanma davranışları incelenmiştir. Sonuç olarak, monoklonal antikorların Fc kısımlarının hedef bölge ile bağlanma kapasitesi stres uygulanmamış örnekler ile karşılaştırıldığında, pH 3 koşullarında azalma gözlemlenirken pH 9 koşullarında ise hafif bir değişime neden olmuştur. Ek olarak, IgG/TNF-α ve IgG/FcγRI bağlanma deneylerinde, nanomolar (E-09) seviyelerinde KD değerlerinin elde edilmesi ile sonuçlanmışken, aynı stress koşullarında FcγRIIIa , daha düşük afinitede (E-06) KD değerlerinin elde edilmesi ile sonuçlanmıştır.
Özet (Çeviri)
Understanding of mechanisms of action of monoclonal antibodies in recent years has been the hope for the treatment of many diseases. In addition, with the development of technology every day, the discovery of therapeutics has gained speed and therapeutics market is increasing in the market. The determination of the binding properties of monoclonal antibodies (mAb) used for therapeutic purposes is of great importance in the field of medical biotechnology. In this study, antibody/antigen and antibody/receptor binding behaviors were examined by surface plasmon resonance technique. Through this technique, binding kinetic analyzes of therapeutic drugs in the in vitro target molecule or receptor were investigated in real time. This study involves IgG/TNF-α binding on the protein A/G immobilized chip surface and binding of Fcγ receptors (FcγR) to IgG on the chip surface immobilized with anti histidine antibody. Firstly, the methods were optimized and then the Fc region's binding behaviors were investigated by applying chemical deamidation stresses to mAbs (pH 3 and pH 9, 24 hour and 72 hour). As a result, the ability of the Fc portions of the monoclonal antibodies to bind with the target site decreased at the pH 3 conditions whereas the pH 9 conditions caused a slight change in the Fc binding compared to the stress-free conditions. In addition, IgG/TNF-α and IgG/FcγRI binding assays, resulting with the KD values of nanomolar levels (E-09) exhibited lower affinity compared to FcγRIIIa experiments which resulted with KD values of (E-06) under the same stress conditions.
Benzer Tezler
- Investigation of engineered anti-vegf antibodies for cancer treatment
Kanser tedavisi için protein mühendisliği yaklaşımları ile geliştirilmiş anti-vegf antikorlarının araştırılması
MURAT KARADAĞ
Doktora
İngilizce
2022
BiyomühendislikDokuz Eylül ÜniversitesiMoleküler Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. SİNAN GÜVEN
- Determination of the biological and functional properties of monoclonal antibody in IgG structure developed for pharmaceutical use
Farmasötik kullanım için geliştirilen IgG yapısındaki monoklonal antikorun biyolojik ve fonksiyonel özelliklerinin belirlenmesi
ZEYNEP ZÜLFİYE YILDIRIM KELEŞ
Doktora
İngilizce
2023
BiyoteknolojiAcıbadem Mehmet Ali Aydınlar ÜniversitesiMedikal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ÖZGE CAN
- Detecting binding activity of a therapeutic monoclonal antibody targeting vascular endothelial growth factor using surface plasmon resonance
Vasküler endotelyal büyüme faktörünü hedeleyenterapötik monoklonal antikorun bağlanma aktivitesinin yüzey plazmon rezonans ile belirlenmesi
SERİM ERDEM
Yüksek Lisans
İngilizce
2024
Biyoteknolojiİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
DR. ÖĞR. ÜYESİ ABDULHALİM KILIÇ
- Assessment of physicochemical quality of monoclonal antibody based drugs at thermal stressand stability conditions
Monoklonal antikor temelli ilaçların fizikokimyasal kalitesinin termal stres ve stabilite koşullarında değerlendirilmesi
CEREN PAMUKCU
Yüksek Lisans
İngilizce
2023
BiyoteknolojiAcıbadem Mehmet Ali Aydınlar ÜniversitesiBiyomedikal Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ AHMET EMİN ATİK
- Characterization of structural and functional properties of anti-VEGF-IgG molecules under certain environmental stress conditions
Belirli çevresel stres faktörlerine maruz kalan anti-VEGF-IgG moleküllerinin yapısal ve fonksiyonel özelliklerinin araştırılması
AYHAN PARLAR
Doktora
İngilizce
2021
Allerji ve İmmünolojiSabancı ÜniversitesiMoleküler Biyoloji, Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MERAL YÜCE