Glutatyon S-transferaz (GST) enziminin japon bıldırcın (Coturnix coturnix japonica) karaciğerinden saflaştırılması ve karakterizasyonu
Purification and characterization of glutathion S-transferase enzyme from quail (Coturnix coturnix japonica) liver
- Tez No: 533319
- Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ YUSUF TEMEL
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Glutatyon S-transferaz, bıldırcın karaciğeri, saflaştırma, karakterizasyon, Glutathione S-Transferase, Enzyme, Purification, Caracterization, Metal, Inhibition, Quail, Liver
- Yıl: 2018
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Bingöl Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Bu çalışmada, glutatyon S-transferaz (GST; EC 2.5.1.18) enzimi bıldırcın karaciğerinden amonyum sülfat çöktürmesi ve glutatyon-agaroz afinite kromatografisi kullanılarak 15,86 EÜ/mg protein spesifik aktivite ile %12,36 verimle 46,1 kat saflaştırıldı. Enzim saflığını kontrol etmek ve alt birim molekül kütlelerini belirlemek amacıyla SDS-PAGE yapıldı ve tek bant elde edildi. Bıldırcın karaciğerinden saflaştırılan GST enziminin alt birim molekül kütlesi yaklaşık olarak 25,1 kDa belirlendi. Bıldırcın karaciğerinden saflaştırılan GST enzimi için yapılan karakterizasyon çalışmalarında; optimum pH, Tris-HCI tamponu pH=8,5, optimum iyonik şiddet, Tris-HCI tamponu 1,4 M, stabil pH, Tris-HCI tamponu pH = 8,5 ve optimum sıcaklık 55oC olarak bulundu. Saf enzime ait KM ve Vmax değerleri Lineweaver-Burk grafiklerinden faydalanılarak GSH substratı için KM, 0,114 mM, Vmax 0,672 EÜ/mL; CDNB substratı için KM, 0,048 mM, Vmax, 0,047 EÜ/ mL olarak hesaplandı.
Özet (Çeviri)
In the present study, glutathione S-transferase enzyme (GST; EC 2.5.1.18) was purified from quail (Coturnix, coturnix japonica) liver with 15.86 EU/mg specific activity, in a yield of 12.36%, 46.1 purification fold, by ammonium sulfate precipitation and glutathione agarose affinity chromatography. SDS-PAGE was performed to control enzyme purity and to determine subunit molecular masses and single band was obtained. The subunit molecular mass of the GST enzyme purified from the quail liver was determined as approximately 25.1 kDa. Quail liver GST enzyme characterization studies carried out; optimum pH, Tris-HCl buffer pH = 8.5, optimum ionic strength, Tris-HCl buffer 1.4 M, stable pH, Tris-HCl buffer pH = 8.5 and optimum temperature was found as 55 oC. KM and Vmax values of pure enzyme were obtained from Lineweaver-Burk graphs. For the GSH substrate, KM 0.114 mM, Vmax 0.672 EU / mL, for CDNB substrate, KM 0.048 mM, Vmax 0.047 EU / mL was calculated respectively.
Benzer Tezler
- Glutatyon S-transferaz (GST) enziminin tavuk yüreğinden saflaştırılması ve karakterizasyonu
Purification and characterization of glutathione S- transferase enzyme from chicken heart
SUAT ZOR
- Glutatyon S-transferaz (GST) enziminin insan eritrositlerinden saflaştırılması, bazı karbazol türevlerinin enzim aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi
Purification of glutathione S-transferase (GST) enzyme from human erythrocytes, investigation of the effects of some carbazole derivatives on enzyme activity
FUAT KARTAL
Yüksek Lisans
Türkçe
2022
BiyokimyaAtatürk ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ÖMER İRFAN KÜFREVİOĞLU
DR. ÖĞR. ÜYESİ MUHAMMET SERHAT ÖZASLAN
- Halofilik mikroorganizmalar olan Pseudomonas halophila DSM 3050 ve Haloarcula hispanica ATCC 33960'da glutatyon S-transferaz (GST) enziminin optimizasyonu ve spesifik aktivitesinin belirlenmesi
Determination of glutathione S-transferase (GST) specific activity and optimization of enzyme in halophilic microorganisms Pseudomonas halophila DSM 3050 and Haloarcula hispanica ATCC 33960
AYŞE ÇAKIR
Yüksek Lisans
Türkçe
2012
BiyokimyaAnadolu ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. KIYMET GÜVEN
YRD. DOÇ. DR. ELİF ÖZTETİK
- Purification, characterization and the effect of some drugs on glutathione s-transferase (GST) enzyme from rat erythrocyte
Glutatyon s-transferaz (GST) enziminin sıçan eritrositlerinden saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı ilaçların enzim aktivitesi üzerine etkisinin araştırılması
LUQMAN QADER AHMED KHOSHNAW
- Glutatyon s-transferaz enziminin sığır eritrositlerinden saflaştırılması ve bazı biyokimyasal özelliklerinin incelenmesi
Purification of glutathione s-transferase from bovine erythrocytes and research of some biochemical properties
SERDAR GÜVERCİN
