İn vitro nonalkolik yağlı karaciğer modelinde mitokondriyal kökenli mots-c peptidinin hastalık etyopatogenezi üzerine etkileri
Effects of mitochondrially originated mots-c peptide on disease etiopathogenesis in nonalcoholic fatty liver disease in vitro model
- Tez No: 519745
- Danışmanlar: DOÇ. DR. FATİH EREN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Tıbbi Biyoloji, Gastroenteroloji, Medical Biology, Gastroenterology
- Anahtar Kelimeler: DNA-mitokondrial, Etyopatogenez, Hücre dizisi, Hücre kültürü, Karaciğer yağlanması, Mitokondriler, İn vitro, DNA-mitochondrial, Etiopathogenesis, Cell line, Cell culture, Fatty liver, Mitochondria, In vitro
- Yıl: 2018
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Marmara Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Tıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Amaç: 2015 yılında mitokondriyal DNA'ya ait yeni bir gen keşfedilmiştir. Bu genin fonksiyonel ürünü olan 16 amino asitlik 12S rRNA tip-c mitokondriyal açık okuma çerçevesi (MOTS-c) peptidinin deneysel hayvan modellerinde AMPK yolağı üzerinden insülin direnci ve obeziteyi azalttığı bildirilmiştir. Ancak bu peptidin NAFLD üzerine etkisi ile ilişkili olarak literatürde bilgimiz dahilinde herhangi bir çalışma yoktur. Bu araştırmadaki amacımız in vitro NAFLD modelinde, MOTS-c peptidinin yağlanmayı azaltan bir etkisinin olup olmadığını tespit etmektir. Yöntem: Çalışmamızda, öncelikle 75 cm2'lik flasklara ekimi yapılan HepG2 hücreleri 24 saatlik düşük glikoz ortamında aç bırakılmıştır. Ardından 1mM konsantrasyonunda palmitik ve oleik asit uygulanarak in vitro NAFLD modeli oluşturulmuştur. Yağlanma Oil Red O (ORO) yöntemi ile kantifiye edilmiştir. Hücre canlılığı Cell Count and Viability Kit (MUSE) ile tespit edilmiştir. Hücrelere 10 µM MOTS-c peptidi 24 saat süre ile uygulanmıştır. Bulgular: Yağlanma modeli oluşturulan HepG2 hücrelerinde yapılan duplike çalışmalar sonucu kontrol gruba göre anlamlı bir yağ birikimi görülmüş ve model oluşturulmuştur (p<0,05). MOTS-c peptidinin hücreler üzerine herhangi bir toksik etkisi olmadığı hücre canlılığı analizi ile saptanmıştır. MOTS-c peptidinin yağlanmayı azalttığı tespit edilmiştir (p<0,05). Sonuçlar: MOTS-c peptidinin yağlanmayı azaltıcı etkisi ile NAFLD etyopatogenezi ilişkili olduğu gözlemlenmiştir. Bu etkiyi gerçekten AMPK yolağını hedef alarak gerçekleştirdiğini göstermek amacıyla AMPK yolağında bulunan AMPK ve ACC proteinlerine ve aktif formları olan p-AMPK ve p-ACC proteinlerine Western Blot yöntemi ile bakılmasını planlamaktayız. Bu çalışma ile NAFLD tedavisi için MOTS-c peptidinin tedavi adaylarından biri olabileceğini düşünmekteyiz.
Özet (Çeviri)
Aim: In 2015, a novel gene belonging to mitochondrial genome was discovered. It has been identified in studies on cell lines and animal models that this gene's functional product which is a 16-amino-acid peptide named mitochondrial open reading frame of the 12S rRNA-c (MOTS-c) regulates insulin sensitivity and metabolic homeostasis by AMPK pathway. However, according to our literature search, there are not any studies investigating MOTS-c effects on NAFLD etiopathogenesis. For this reason, we aim to examine MOTS-c effects on the pathogenesis of the disease in in vitro NAFLD model. Methods: In our study, first of all, HepG2 cells cultured in T75 flasks were starved in low glucose medium. After that, palmitic and oleic acid mix in 1 mM concentration was given to cells in order to generate in vitro NAFLD model. Lipid droplets were confirmed by using Oil Red O method. Cell viability was confirmed by using Cell Count and Viability Kit (MUSE). Then, MOTS-c in 10 µM concentration was applied to cells in the time with 24 hours. Results: As a result of duplicate experiments on fatty HepG2 cells, compared to control group cells, it has been considered to be very statistically significant and in vitro NAFLD model was created (p<0,05). According to cell viability analysis, the MOTS-c peptid is not toxic on cells. Finally, the MOTS-c peptide decreases the lipid droplets (p<0,05). Conclusion: The MOTS-c peptide is associated with NAFLD etiopathogenesis via a reducing effect of lipid droplets. With the aim of showing that MOTS-c targets AMPK pathway, we have planned to examine AMPK and ACC and also active forms p-AMPK and p-ACC by Western Blot. With this study, we think that MOTS-c could be a treatment candidate for NAFLD.
Benzer Tezler
- Deneysel hepatik lipidozis oluşturulan tavşanlarda kekik otu (thymus vulgaris) yağı ve thymol'ün immunojenik aktivitelerinin araştırılması
Investigation of the immunogenic activities of thyme (thymus vulgaris) oil and thymol in rabbits with experimental hepatic lipidosis
GENCAY EKİNCİ
Doktora
Türkçe
2020
Endokrinoloji ve Metabolizma HastalıklarıErciyes ÜniversitesiVeterinerlik İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. VEHBİ GÜNEŞ
- Mitokondriyal MOTS-C geni nükleotit varyasyonlarının nonalkolik yağlı karaciğer hastalığı etyopatogenezi ile ilişkisi
The associ̇ati̇on of mi̇tochondri̇al MOTS-C gene nucleoti̇de vari̇ati̇ons wi̇th the eti̇opathogenesi̇s of non-alcoholi̇c fatty li̇ver di̇sease
AYÇA ÖNAL
Yüksek Lisans
Türkçe
2018
Tıbbi BiyolojiMarmara ÜniversitesiTıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. FATİH EREN
- İleri glikasyon son ürünlerinin DNA ve proteinlerde meydana getirdiği oksidatif hasara karşı deve dikeni (Silybum marianum L.) tohumunun koruyucu etkisinin araştırılması
Protective effect of the seeds of Silybum marianum against advanced glycation end products induced oxidative DNA and protein damage
NESRİN İNCEÖREN
- Hepatik stellat hücreler üzerine çörek otu bileşenlerinin anti-fibrotik etkileri
Anti-fibrotic effects of nigella components on hepatic stellate cells
REHAM ALWARDA
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
BiyokimyaGaziantep ÜniversitesiTıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ MUSTAFA ÖRKMEZ
- İn vitro nonalkolik steatohepatit(NASH) modelinde otofaji ve nash patogenezi üzerine melatoninin etkileri
Autophagy in the nonalcoholic steatohepatitis (NASH) in vitro model and the effects of melatonin on nash pathogenesis
YUSUF ZİYA YAŞAR
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
GenetikMarmara ÜniversitesiTıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. FATİH EREN