Geri Dön

Fibroblast hücre kültüründe jak-stat sinyal yolağı inhibisyonunun kollajen biyosentezi üzerine etkilerinin araştırılması

The investigation of the effects of jak-stat signal inhibition on collagen biosynthesis in fibroblast cell culture

PDF İndir

  1. Tez No: 512755
  2. Yazar: MEHTAP ŞAHİN
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. HÜSEYİN AYDIN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Biyosentez, Fibroblastlar, Hücre kültürü, Kolajen, Sinyal nakli, Tofasitinib, Biosynthesis, Fibroblasts, Cell culture, Collagen, Signal transduction, Tofacitinib
  7. Yıl: 2018
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Sivas Cumhuriyet Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Fibrozisin arttığı çeşitli hastalıklarda (hepatik fibroz, skleroderma gibi) kontrolsüz kollajen sentezi ve birikimi olmaktadır. Kollajen sentezini inhibe eden ajanlar oldukça sınırlıdır. Tofasitinib selektif JAK-kinaz (1/3) inhibitörüdür. Günümüzde romatoid artrit tedavisinde kullanılmaktadır. JAK yolağı inhibisyonun kollajen sentezine etkileri net olarak bilinmemektedir. Çalışmamızın amacı fibroblast hücre kültüründe JAK-STAT yolağı inhibisyonunun kollajen biyosentezi üzerine etkisini araştırmaktır. BJ-CRL 1474 (cilt) ve BRL3A (hepatik) fibroblast hücre kültürlerinin uygun ortamda çoğalması sağlandı. 96'lık flasklarda çoğalan fibroblast hücrelerine sırasıyla 25nM, 50nM, 100nM, 200nM, 400Nm ve 800nM konsantrasyonlarında tofasitinib uygulandı. Hücre canlılığı ve miktarı spektrofotometreyle okundu. Ayrıca ELİSA yöntemi ile doku metalloproteinaz inhbitörü (TIMP-1), matriks metalloproteinaz 3 (MMP-3), dönüştürücü büyüme faktörü (TGF-1β) ve hidroksiprolin düzeyleri ölçüldü. Tofasitinib'in sitotoksik etkisi 100nM konsantrasyonda başladı (p<0,05). En yüksek etki ise 800nM'de elde edildi. Tofasitinib'in zamana bağlı sitotoksik etkisi 72. saatte, 24. ve 48. saate göre tüm konsantrasyonlarda anlamlı olarak daha yüksek saptandı (p<0,05). Kollajen sentezinin ana uyarıcısı olan TFG-1β düzeyi 25nM konsantrasyonda dahi anlamlı olarak düşük saptandı (p<0,05). En düşük düzeye 800nM konsantrasyonlarında ulaşıldı. Konsantrasyonlar arasındaki farklar istatistiksel olarak bulundu (p<0,05). Yine sırasıyla MMP-3, TIMP-1 ve hidroksiprolin sevilerinde kontrole göre anlamlı düşüş saptandı (p<0,05). Her üç biyobelirteçteki düşüş 100nM konsantrasyonunda başladı. Her iki hücre kültüründeki (hepatik ve deri) sonuçlar benzerdi ve istatistiksel olarak anlamlı değildi (p>0,05). JAK-kinaz inhibitörü olan tofasitinib'in fibroblast hücre kültüründe fibroblast hücre proliferasyonunu zamana ve konsantrasyona göre baskıladığı gösterdik. Ancak bu etkinin klinik yansımaları için daha kapsamlı hayvan model ve insan çalışmalarına ihtiyaç vardır.

Özet (Çeviri)

Uncontrolled collagen synthesis and deposition occur in various diseases such as hepatic fibrosis, scleroderma. The agents that inhibit collagen synthesis are very limited. Tofacitinib is a selective JAK-kinase (1/3) inhibitor. Currently it used in the treatment of rheumatoid arthritis. The effects of JAK pathway inhibition on collagen synthesis are not clearly known. The aim of the study is to investigate the effect of JAK-STAT pathway inhibition on collagen biosynthesis in fibroblast cell culture. BJ-CRL 1474 (skin) and BRL3A (hepatic) fibroblast cell cultures were proliferated in the appropriate medium. Tofacitinib was administered to fibroblast cells proliferating on 96-well flasks at concentrations of 25nM, 50nM, 100nM, 200nM, 400Nm and 800nM, respectively. Cell viability and quantity were read by spectrophotometer. Tissue metalloproteinase inhibitor (TIMP-1), matrix metalloproteinase 3 (MMP-3), transforming growth factor (TGF-1β) and hydroxyproline levels were measured by ELISA method. The cytotoxic effect of tofacitinib started at 100 nM concentration (p <0.05). The highest effect was obtained at 800nM. The time-dependent cytotoxic effect of tofacitinib was significantly higher 72th hours than at 24th and 48th hours at all concentrations (p <0.05). TFG-1β, the major stimulus of collagen synthesis, was found to be significantly low even at 25 nM concentration (p <0.05). The lowest concentration was reached at 800nM. The differences between the concentrations were statistically significant (p <0.05). Again, there was a significant decrease in MMP-3, TIMP-1 and hydroxyproline levels, respectively (p <0,05). The decline in all three biomarkers started at a concentration of 100nM. The results in both cell cultures (hepatic and skin) were similar and not statistically significant (p> 0.05). JAK kinase inhibitör, tofacitinib has been shown to inhibit fibroblast cell proliferation in fibroblast cell culture by time and concentration. However, more extensive animal model and human studies are needed for clinical manifestations of this effect.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    828862

    Lipopolisakkarit (LPS) ile indüklenen tavuk embriyo fibroblast hücre kültüründe serum amiloid A üretimi üzerine immun sistemin ve A vitamininin rollerinin moleküler teknikler ile araştırılması

    Research of immune system and vitamin A role on serum amyloid A production in chicken embryo fibroblast cell culture induced with lipopolysaccharide (LPS) by molecular techniques

    BELMA DAYI

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Veteriner HekimliğiAfyon Kocatepe Üniversitesi

    Veterinerlik Patolojisi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ALPER SEVİMLİ

  2. Tez No

    260955

    Rosa damescena'nın oksidatif strese karşı antioksidan ve antitoksik etkilerinin fibroblast hücre kültüründe değerlendirilmesi

    Evaluation of antitoxic and antioxidant effects of Rosa damescena for oxidative stress in cell cultured fibroblasts

    ZEYNEP KAHYA

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2010

    Tıbbi Biyolojiİstanbul Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. İLHAN ONARAN

  3. Tez No

    99614

    Dental döküm alaşımlarından element salınımı ve sitotoksik etkilerinin hücre kültüründe değerlendirilmesi

    Release of elements from dental casting alloys and evaluation of cytotoxic effects in cell culture medium

    GÜL GÜNAL AKPINAR

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2001

    Diş HekimliğiAnkara Üniversitesi

    Protetik Diş Tedavisi Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. GÜLŞEN CAN

  4. Tez No

    912130

    Primer hücre kültüründe, TGF-β ile oluşturulan deneysel akciğer fibrozıs modeli üzerinde yeni potansiyel antifibrotik moleküllerin etkisinin araştırılması

    Investigation of the effect of new potential antifibrotic molecules on experimental lung fibrosis model induced with TGF-β in primary cell culture

    HÜLYA GÜVEN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    Tıbbi BiyolojiGaziantep Üniversitesi

    Solunum Biyolojisi Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ SİBEL DOĞRU

    DOÇ. DR. SERDAR ÖZTUZCU

  5. Tez No

    197204

    Hücre kültüründe tümör hücrelerine akıllı polimerik taşıyıcılar ile anttisens oligonükleotit aktarımı

    Transfer of antisense oligonucletide into tumor cells in cell culture by using intelligent polymeric carriers

    ELA KIRSAÇ OSKAY

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2005

    BiyomühendislikHacettepe Üniversitesi

    Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. KEVSER PİŞKİN ÖZDEN

Geri Dön