Trombositlerin Candida albicans üzerine antifungal etkinliğinin araştırılması
Investigation of antifungal activity of platelets on Candida albicans
- Tez No: 510393
- Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ RIZA AYTAÇ ÇETİNKAYA
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Mikrobiyoloji, Microbiology
- Anahtar Kelimeler: Candida albicans, Antifungal Direnci, Trombositten Zengin Plazma, Antifungal ajanlar, Antifungal duyarlılık testleri, Kan bileşenleri transfüzyonu, Kan trombositleri, Kandida, Candida albicans, Antifungal resistance, Antifungal agents, Antifungal sensitivity tests, Blood component transfusion, Blood platelets, Candida, Platelet rich plasma
- Yıl: 2018
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Sağlık Bilimleri Üniversitesi
- Enstitü: Gülhane Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kan Bankacılığı ve Transfüzyon Tıbbı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Mantar enfeksiyonlarında etken olarak en sık Candida türleri, özellikle de Candida albicans saptanmaktadır. Bu çalışmada gönüllülerden elde edilen trombositten zengin plazmanın (TZP) C. albicans ATCC 10231 suşuna karşı in vitro antifungal etkinliği ile bu etkinlikte rol oynayabileceği düşünülen bazı kemokin ve kinosidinlerin olası etkinliğinin değerlendirilmesi amaçlandı. Dokuz gönüllüden Magellan PRP™ kiti kullanılarak 3'er ml TZP elde edildi. Otolog trombin eldesi için %10'luk kalsiyum glukonat kullanıldı. Otolog trombin ile aktive edilen TZP'nin, son maya konsantrasyonu 1x103 kob/ml ve 1x104 kob/ml olan C. albicans izolatı üzerindeki antifungal etkinliğinin ortaya konulması amacıyla 1., 2., 4., 8. ve 16. saatlerde Sabouraud Dekstroz Agar (SDA) yüzeyine ekimleri yapıldı. 30°C'de 18-24 saatlik inkübasyon sonrası koloniler sayıldı. Aynı zamanda her ekim saatinde kemokin ve kinosidinler [(Trombosit Faktör-4 (Human PF-4), İnterlökin-8 (Human IL-8) ve Timosin-β4 (Human TMSB4)] eş zamanlı olarak ELISA yöntemiyle ölçüldü. Trombositten zengin plazmadaki medyan Beyaz Küre (WBC) sayısı; 49,4x103/μl, medyan trombosit sayısı 2165x103/μl olarak saptandı. TZP'deki trombosit ve WBC verimliliğinde yaklaşık 9 kat artış saptandı. Başlangıç maya konsantrasyonu 103 olan TZP grubunun (TZP-103) saatlere göre üreyen koloni medyan değerleri sırasıyla 1., 2., 4., 8., ve 16. saatler için 3, 7, 34, 143 ve 500 iken başlangıç maya konsantrasyonu 104 olan TZP grubu (TZP-104) için bu değerler 19, 48, 166, 500 ve 500'dü. Aynı saatler için başlangıç maya konsantrasyonu 103 olan PBS (kontrol) grubunun koloni medyan değerleri ise sırasıyla 242, 280, 500, 500 ve 500'dü. TZP-103'ün PBS-kontrol grubuyla karşılaştırıldığında antifungal etkinliğinin 8. saatte halen devam ettiği, 16. saatte ise kaybolduğu görüldü. İki grup arası 8. saatteki koloni üremelerindeki fark istatistiksel olarak anlamlıydı (p<0,05). TZP- 104'ün antifungal etkinliğinin 4. saatte devam ettiği, 8. saatte bu etkinliğin azaldığı, 16. saatte ise antifungal etkinliğin ortadan kalktığı görüldü. Her iki grupta eşit miktarda TZP kullanılmış olması ve buna bağlı ortama salınan kemokin ve kinosidin miktarı aynı olmasına rağmen TZP 103 grubunun daha etkin bulunmasında C. albicans konsantrasyonunun önemli olabileceği düşünüldü. ELISA yöntemiyle her iki TZP'li grupta IL-8 seviyelerinde saatlere göre artış olmakla birlikte C. albicans'a karşı antifungal etki tespit edilmedi. TMSB4 miktarı yoğun trombosit varlığına bağlı olarak PBS-kontrol grubuna göre TZP'li gruplarda 7-10 kat daha yüksekti. TZP gruplarında ilerleyen saatlerde TMSB4 değerlerinde antifungal etkinliğine bağlı olarak gerçekleştiği değerlendirilen düşme saptandı. PF- 4, TZP-103 ve TZP-104 üzerinde antifungal etkinlikte değildi. Trombositten zengin plazmanın C. albicans ve diğer mantar enfeksiyonlarında etkili olabilmesi için, en yüksek trombosit ve lökosit değerlerinin elde edilebileceği tam otomatize kapalı sistemlerin kullanılmasının önemli olduğu düşünülmektedir. En düşük konsantrasyonda en yüksek trombosit değerleri elde edilen çalışma grubumuzda dahi literatürdeki çalışmalardaki gibi C. albicans üremeleri tamamen yok edilememiştir. Hastalarda kullanılan ilaçlar gibi tekrarlayan dozlarda TZP uygulamaları ile antifungal etki daha uzun sürelere erişebilir hatta üremeleri tamamen baskılayacak değerler elde edilebilir. Ayrıca trombositlerin antifungal etkinliğinde rol oynayabileceği düşünülen bütün kemokin, kinosidin ve benzeri diğer molekülleri kapsayan geniş çaplı bir projeye gereksinim duyulmaktadır.
Özet (Çeviri)
Candida species, especially Candida albicans, are the most common pathogen detected in fungal infections. In this study, we aimed to evaluate the in vitro antifungal activity of volunteer-derived platelet rich plasma (PRP) against C. albicans ATCC 10231 strain and the possible effect of certain chemokines, kinocidins that might play a role in this activity. Three ml of PRP from nine volunteers were derived by using Magellan PRP ™ kit. 10% calcium gluconate was used to obtain autologous thrombin. C. albicans isolates with a final yeast concentration of 1x103 cfu/ml and 1x104 cfu/ml were inoculated on Sabouraud Dextrose Agar (SDA) at the 1st, 2nd, 4th, 8th and 16th hours of incubation in order to reveal the antifungal activity of autologous thrombinactivated PRP. The colonies were counted after 18-24 hours of incubation at 30°C. At the same time, chemokines and kinocidins [(Platelet Factor-4 (Human PF-4), Interleukin-8 (Human IL-8) and Thymosin-β4 (Human TMSB4)] were measured simultaneously by ELISA method. The median values of white blood cells (WBC) and platelets in PRP were detected as 49,4x103/μl and 2165x103/μl, respectively. Approximately 9-fold increase in platelet and WBC efficacy in PRP was detected. The colony median values of the PRP groups with an initial yeast concentration of 103 and 104 (PRP-103 and PRP-104) were found to be 3, 7, 34, 143, 500 and 19, 48, 166, 500, 500 for 1st, 2nd, 4th, 8th and 16th hours, respectively. The colony median values of the PBS- (control) group with an initial yeast concentration of 103 for the same hours were 242, 280, 500, 500 and 500, respectively. Compared with the PBS-control group, the PRP-103 showed that the antifungal activity was still going on at the 8th hour and disappeared at the 16th hour. The difference in colony production between the two groups at 8th hour was statistically significant (p<0,05). It was observed that the antifungal activity continued at the 4th hour, decreased at the 8th hour, and disappeared at the 16th hour in the group PRP-104. Although the same amount of PRP was used and the same amount of chemokine and kinocidins were released in both groups, the concentration of C. albicans was considered to be important in the detection of more effective PRP-103 group. Although there was an increase in IL-8 levels by hours in the two PRP groups by ELISA method, no antifungal effect was detected against C. albicans. Test results of TMSB4 were detected 7-10 times higher in the PRP groups than in the PBScontrol group due to the presence of intense platelet concentration. It was observed that decrease in TMSB4 values results from the antifungal activity on the advancing hours in the PRP groups. Whereas PF-4 did not act an antifungal activity on PRP-103 and PRP-104. It was considered that the use of fully automated systems to obtain highest platelet and leukocyte counts in PRP is important in order to be effective in C. albicans and other fungal infections. Even in our study group where the highest platelet counts were obtained at the lowest concentration, C. albicans reproduction could not completely eliminated as mentioned in the literature. Repeated doses of PRP applications, such as drugs used in patients, may have longer duration of action and even complete repression of reproductive outcomes. In addition, a large-scale project involving all chemokines, kinocidins, and other molecules thought to play a role in the antifungal activity of platelets is needed.
Benzer Tezler
- Sağlıklı ve diyabetik kişilerden elde edilen kan hücrelerinin doku faktörü aktivitesi üzerine Candida albicans'ın etkisinin in vitro incelenmesi
The investigation of in vitro effect of Candida albicans on the tissue factor activity of blood cells that were isolated from healthy and diabetic individuals
SEDA GÜLER
Yüksek Lisans
Türkçe
2011
BiyokimyaMarmara ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. TUĞBA TUNALI AKBAY
- Non-nötropenik yoğun bakım kandidemilerinde ortalama trombosit hacmi ve trombosit değerlerinin mortalite/morbidite takibinde yeri
Başlık çevirisi yok
SELMA İLKAY ŞAHİN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2017
Enfeksiyon Hastalıkları ve Klinik MikrobiyolojiMustafa Kemal ÜniversitesiEnfeksiyon Hastalıkları ve Klinik Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SABAHATTİN OCAK
- Trombositlerin glukoz utilizasyonu üzerine aspirin, persantin ve indobufenin etkisinin araştırılması
Başlık çevirisi yok
EMİNE YAZGAN
Yüksek Lisans
Türkçe
1987
BiyokimyaUludağ ÜniversitesiFizyoloji Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. KASIM ÖZLÜK
- Preeklamptik ve normotansif maternal trombositlerin ultrasukrüktürel düzeyde karşılaştırılması
Comparasion of ultrastructural level in preeclampsia and normotensive maternal platelet
ELİF ERDEM
Yüksek Lisans
Türkçe
2011
Histoloji ve EmbriyolojiDicle ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MURAT AKKUŞ