Geri Dön

Preparation of ascorbate oxidase enzyme electrode and its usage for L-ascorbic acid determination

Askorbat oks1daz enz1m elektrodu hazırlanması ve l-askorb1kas1t tayininde kullanılması

PDF İndir

  1. Tez No: 50707
  2. Yazar: EROL AKYILMAZ
  3. Danışmanlar: PROF.DR. ERHAN DİNÇKAYA
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyomühendislik, Bioengineering
  6. Anahtar Kelimeler: Askorbik asit, Enzimler, Ascorbate Oxidase, L- Ascorbic Acid, Enzyme Electrodes, Biosensors, Ascorbic acid, Enzymes
  7. Yıl: 1996
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Ege Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Bu tezde, salatalıktan (Cucumis sativus L.) izole edilip kısmi olarak saflaştınlan Askorbat oksidaz [(L-Askorbat: oksijen oksidoredüktaz) (EC 1.10.3.3)] glutaraldehid yardımıyla jelatin ile çapraz bağlanarak, çözünmüş oksijen probu membranı üzerinde bir biyoaktif tabaka oluşturuldu ve L-askorbik aside duyarlı bir askorbat oksidaz enzim eiektrodu geliştirildi. Ölçümler enzimatik reaksiyon uyarınca L-askorbik asit konsantrasyonu ile orantılı olarak tüketilen oksijen düzeyinin belirlenmesi yoluyla çizilen standard grafikler yardımıyla gerçekleştirildi. Hazırlanan biyosensörün optimizasyon çalışmalarında en uygun askorbat oksidaz, jelatin ve glutaraldehid oranlan sırasıyla 24,8 U/cm^, 5,9 mgjelatin/cm^ ve %2,5 olarak bulundu. Optimum çalışma ortamı olarak 50 mM'lik pH:7,5 olan fosfat tamponunun kullanılması ve ölçümlerin 35°C de yapılması gerektiği sonucuna varıldı. Geliştirilen biyosensörün karakterizasyonu amacıyla yapılan çalışmalar sonucunda 5,0xl0~5 - 1,2x10“ 3 M L-askorbik asit konsantrasyon aralığında doğrusal sonuçların alınabildiği tespit edildi. Tekrarlanabilirlik denemelerinde (n=ll), 4,0xl0”4 MTlık L-askorbik asit konsantrasyonu için ortalama değer (x)=3,99xl0"4 M, standard sapma (S.S):±0,001 ve varyasyon katsayısı (V.K):%0,251 olarak bulundu. Ayrıca substrat spesifikliği, depo kararlılığı ve bazı maddelerin girişim etkileri araştırıldı. Son olarak bazı meyva ekstraktları ve vitamin tabletlerinde, geliştirilen biyosensörle L-askorbik asit tayini yapıldı ve elde edilen sonuçlar ve metodun duyarlılığı 2,6 diklorofenolindofenol metodu ile kıyaslandı. Anahtar ' Kelimeler : Askorbat Oksidaz, L-Askorbik Asit, Enzim Elektrodlan, Biosensörler

Özet (Çeviri)

In this thesis, ascorbate oxidase [(L-Ascorbate:oxygen oxidoreductase) (EC1. 10.3.3)], isolated and partially purified from cucumber (Cucumis sativus L.) was crosslinked with gelatine by using glutaraldehyde and a bioactive layer was formed on the dissolved oxygen probe, therefore, ascorbate oxidase enzyme electrode which was sensitive for L-ascorbic acid determination was developed. Measurements were carried out by standard curves which were obtained by the determination of consumed oxygen level, related to L-ascorbic acid concentration in the enzymatic reaction. In the optimization studies of the biosensor prepared, the most suitable ascorbate oxidase, gelatine and glutaraldehyde ratios were determined as 24.8 U/cm-, 5.9 mggelatine/cm^ and, 2.5% respectively. The phosphate buffer (50 mM, pH:7.5) and 35° C were established as providing the optimum conditions. The characterization studies proved a linearity in the ascorbic acid concentration range 5.0xl0~5-1.2xl0~3 M. The reproducibility experiments (n=ll) revealed that for 4x10-4 M L-ascorbic acid, the average value (x) was 3.99x10-4 M,standard deviation (S.D) was ±0.001 and, variation coefficient (C.V) was 0.251%. Moreover, substrate specification, storage stability and the interference effects of some substances were investigated. Finally, L-ascorbic acid determination in some fruit extracts and vitamin tablets was carried out. Both the results obtained and the sensitivity of the method were compared with the 2,6 dichlorophenolindophenol method.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    55724

    Çeşitli adsorbanlarla fosfat giderilmesi

    Başlık çevirisi yok

    YEŞİM BAŞURAL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1996

    Kimya Mühendisliğiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. A. NURSAN İPEKOĞLU

  2. Tez No

    1038

    Uranyum (VI), toryum (IV), kalay (II) ve kalay (IV) ün schiff bazı komplekslerinin hazırlanması ve yapılarının spektrofotometrik yöntemlerle açıklanması

    Preparation of schiff base complexes of uranium (VI), thorium (IV), tın (II) and tın (IV) and determination of their structures by spectrometric methods

    YAKUP BARAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1985

    KimyaGazi Üniversitesi

    DOÇ. DR. BİRGÜL ERK

  3. Tez No

    1472

    Preparation of polymethylmethacrylate (PMMA) membranes by phase inversion for artificial Kidney modules

    Başlık çevirisi yok

    MOHAMMED M. MANNA

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    1987

    Kimya MühendisliğiHacettepe Üniversitesi

  4. Tez No

    3366

    CNC freze tezgahları için program hazırlama ve bilgisayarda simülasyonu

    Preparation of program for CNC milling machines and its simulation on a personel computer

    MAHMUT GÜLESİN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1988

    Makine MühendisliğiGazi Üniversitesi

    Makine Eğitimi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ERES SÖYLEMEZ

  5. Tez No

    8237

    Preparation of block copolymers with macro-azonitrile as an initiator and characterization of the products

    Blok kopolimerlerin makro-azonitril başlatıcılı ile hazırlanması ve elde edilen blok kopolimerlerin karakterizasyonu

    SEVİM ULUPINAR

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    1990

    KimyaOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. HÜSEYİN YÜRÜK

Geri Dön