Blastosist sıvısı aspirasyonunun in vitro sığır embriyolarında dondurma sonrası viyabiliteye etkisi
Effect of artificial collapse method on freezed-post thawed bovine blastocysts viability
- Tez No: 473708
- Danışmanlar: PROF. DR. MUSTAFA KAYMAZ
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyoteknoloji, Veteriner Hekimliği, Biotechnology, Veterinary Medicine
- Anahtar Kelimeler: Blastosist, Dondurarak saklama, Embriyo, Sığırlar, Veteriner hekimlik, Üreme teknikleri, İnekler, Blastocyst, Cryopreservation, Embryo, Cattles, Veterinary medicine, Reproduction techniques, Cows
- Yıl: 2017
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ankara Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Veterinerlik Doğum ve Jinekolojisi Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Bu çalışmada in vitro koşullarda üretilen sığır embriyolarından blastosist sıvısının aspirasyonu yapıldıktan sonra, embriyoların vitrifikasyon ve yavaş dondurma metotlarıyla dondurulup çözdürülmesini takiben viyabilitelerinin incelenmesi amaçlanmıştır. Çalışmada lokal mezbahalardan toplanan ovaryumlardan elde edilen oositlerde maturasyon, fertilizasyon ve embriyo kültürü yapılmasını takiben zigotların cleavage kontrolü IVF sonrası 27-31. saatlerde ve 51-55. saatler olmak üzere iki kez inverted mikroskop altında kayıt alındı. Embriyonik kültürün 7-8-9. günlerinde oluşan toplamda 597 adet 5 hücreli ve 5 hücreden büyük aşamadaki zigotlardan 271 adet BL ve Exp-Bl elde edildi (%45,39). Bunların 141 adeti (%52,02) iyi kaliteli (good) olarak değerlendirilerek çalışmada kullanıldı. Embriyolar; aspire ve vitrifiye edilen embriyolar (Grup I), vitrifikasyon kontrol (Grup II), aspire ve yavaş dondurma ile dondurulan embriyolar (Grup III) ve yavaş dondurma kontrol (Grup IV) olmak üzere dört gruba ayrıldı. Aspirasyon gruplarında yer alan Bl/Exp Bl'nin blastosöl sıvısı, özel olarak hazırlanan kağillar cam pipet ile mikromanipülatör ve inverted mikroskop kullanılarak yapıldı. Embriyonun iç hücre kümesine dokunulmadan trofoblast hücreleri arasından mikroenjeksiyon pipetiyle girilerek blastosist sıvısının tümü blastosist kavitesi tamamen kollabe olana kadar aspire edildi. Bütün gruplarda çözdürme sonrası embriyoların canlılık oranları, 24-48-72. saatlerde ve 7 gün süre ile takip edildi. Yapılan istatistik değerlendirmeler sonucunda, her iki yöntem ile dondurulan embriyoların 3 gün ve 7 gün takiplerinde toplam hatched oranı ekspanded blastosistlerde blastosistlere göre daha başarılı bulundu (p=0,004 ve p=0,006). Çözdürme sonrasında embriyoların 24-48 ve 72. saatlerdeki toplam hatching-hatched oranı incelendiğinde; Grup I (%28,57), Grup II (%39,39) ve Grup IV (%41,18) arasında önemli bir farklılık bulunmazken, Grup III (%71,88) diğer gruplardan önemli bir şekilde yüksek bulundu (p=0,002). Çözdürme sonrası 7 gün süre ile incelenen embriyoların hatching-hatched oranı Grup III (%78,10)'te diğer gruplardan önemli bir şekilde yüksek bulundu (Grup I-%31; Grup II-%48,50; Grup IV-%55,90) ve Grup I,II ve IV arasındaki farklılığın ise önemsiz olduğu tespit edildi (p<0,001). Yapılan çalışmada, blastosist sıvısı aspirasyonunun yavaş dondurmada rahatlıkla kullanılabileceği ve başarılı sonuçlar elde edilebileceği sonucuna varıldı. Aspirasyon için embriyo seçiminde embriyonun ekspanded blastosist aşamasında olması, çözdürme sonrası viyabiliteyi olumlu etkilediği kanısına varıldı.
Özet (Çeviri)
The aim of this study is to investigate the viability of in vitro produced embryos, which will be frozen and thawed by using slow freezing and vitrification methods after blastocyst fluid aspiration. In this study, oocytes were obtained from slaughter house ovaries using standard techniques. Cleavage checked was done 27-31 hours and 51-55. hours after IVF under the inverted microscope. Blastocysts or expanded blastocysts were obtained from 5- cell ≤ zygotes at 7-8-9 days post fertilization (45,39%). Good embryos were used in the study and four groups were formed; Group I-vitrification aspirated, Group II- vitrification control, Group III-slow freeze aspirated and Group IV-slow freeze control. Embryos at 7-8-9th days were aspirated using micromanuplator attached to the inverted microscope. For aspiration, capillary glass pipettes prepared with micropipette puller. Microinjection pipette was entered the blastocyst cavity through trophoblast cells without damaging inner cell mass and blastocoel fluid were aspirated until the collapse of blastocyst cavity. After thawing, embryo viability was checked for 24-48-72nd hours and 7 days. As a result of the statistical evaluations, the total hatched ratio of frozen embryos in both methods that follwing 3 days and 7 days after thawing was found to expanded blastocysts were more successful than blastocysts (p = 0,004 and p = 0,006). When embryo viability was examined for 3 days, there was no significant difference was found between Group I (28,57%), Group II (39,39%), Group IV (41,18%) but Group III (71,88%) was found significant difference from other groups (p=0,002). While embryo viability was examined for 7 days, the rates of hatched embryos of slow freeze aspirated group (Group III) (78,10%) was significantly higher (p<0,001) than vitrification aspirated groups (Group I) (31%), vitrification control (Group II) (48,50%) and slow freeze control (Group IV) (55,90%). There was no difference between vitrification control, vitrification aspirated and slow freeze control groups. In the current study, it has been concluded that blastocyst fluid aspiration can be easily used in slow freezing method and successful results can be obtained. Viability is positively effected after thawing when embryo is in expanded blastocyt stage at the selection of the embryo for aspiration.
Benzer Tezler
- Maturasyon medyumuna folikül sıvısı ilavesinin sığır oositlerinin in vitro fertilizasyonu ve embriyo gelişimi üzerine etkisi
Effect of follicular fluid addition to maturation medium on in vitro fertilization and embryo development of bovine oocytes
MAİDE GÖLBAŞI
Doktora
Türkçe
2025
BiyoteknolojiSelçuk ÜniversitesiVeterinerlik Doğum ve Jinekolojisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. DURSUN ALİ DİNÇ
DOÇ. DR. SAKİNE ÜLKÜM ÇİZMECİ
- Sığırlarda in vitro koşullarında üretilen sığır embriyolarının kalitelerinin iyileştirilmesi olanakları
Possibilities for improving quality of in-vitro produced embryos in cattle
SHAHRAM BOHLOOLI
- Comparison of the levels of igfbp 1, osteopontin and pge2 in endometrial washing liquid between women with polycystic ovary syndrome, endometrioma, unexplained subfertility and fertile healthy women
Polikistik over sendromu, endometrioma, açıklanamayan infertilite tanısı alan hastalar ile daha önce doğum yapmış infertilite hikâyesi olmayan sağlıklı kadınların endometrial yıkama sıvısında endometrial reseptivite belirteçleri olan ıgfbp 1, osteopontin ve pge2 düzeylerinin karşılaştırılması
EMİNE DEMİREL
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2014
Kadın Hastalıkları ve Doğumİzmir Katip Çelebi ÜniversitesiKadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SEFA KELEKÇİ
- İn vitro fertilizasyon (IVF) tedavisi uygulanan kadınlarda serum D vitamini düzeylerinin oosit toplama işlemi sırasında elde edilen foliküler sıvı granüloza hücrelerinin diferansiyasyonuna etkisi
The effects of serum vitamin D levels on differentiation of granulosa cells obtainded from follicular fluid during oocyte pick up from women undergo İVF treatment
EBRU ÇELİK
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2019
Histoloji ve EmbriyolojiAnkara ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. OYA EVİRGEN
- Ovaryen endometrioması olan IVF yapılan hastalarda serum ve folikül sıvısında GDF-9 ve BMP -15 parametrelerinin karşılaştırılması
Comparison of GDF-9 and BMP -15 parameters in serum and follicule fluid of ivf patients with ovarian endometrioma
AYTAN RASULZADE
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2023
Kadın Hastalıkları ve DoğumGazi ÜniversitesiKadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AHMET ERDEM